1．熱應(yīng)激對魚類的影響
1．1熱應(yīng)激對魚類神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響
在魚類的熱應(yīng)激反應(yīng)過程中，可使細(xì)胞儲存的兒茶酚胺類激素大量釋放和血液皮質(zhì)醇含量顯著升高。兒茶酚胺和皮質(zhì)醇的變化會對魚類機(jī)體的免疫功能產(chǎn)生影響。在應(yīng)激過程中，兒茶酚胺主要加速分解糖原，升高血糖來滿足應(yīng)激時機(jī)體能量的需求，另外，還能促進(jìn)促腎上腺皮質(zhì)激素、生長素、三碘甲狀腺原氨酸和甲狀腺素等的分泌，從而協(xié)調(diào)更多的防御機(jī)制來對抗應(yīng)激反應(yīng)。但是，過多的兒茶酚胺也會導(dǎo)致采食量下降，耗能、耗氧增加和組織缺血等不利情況。皮質(zhì)醇能促進(jìn)脂肪動員，導(dǎo)致脂肪合成減少，機(jī)體消瘦，引起生長停滯。
1. 2熱應(yīng)激對魚類抗氧化調(diào)節(jié)能力的影響
脾臟是魚類重要的免疫器官之一，含有大量的巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞在受到外界刺激處于應(yīng)激狀態(tài)時，會發(fā)生呼吸爆發(fā)，產(chǎn)生大量自由基，完成吞噬、滅菌的生理功能，并誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)。當(dāng)機(jī)體受到異常刺激，體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除的平衡狀態(tài)被打破，自由基濃度會異常增加。高濃度的自由基會攻擊 DNA 和 RNA，使其主鏈斷裂，并且能夠破壞和降解堿基，導(dǎo)致堿基突變，改變其熱穩(wěn)定性，還可引起蛋白質(zhì)變性，產(chǎn)生自身免疫性疾病。具有強(qiáng)氧化性的自由基會針對質(zhì)膜進(jìn)行破壞，引起脂質(zhì)的過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化物。其中，丙二醛是脂質(zhì)過氧化物分解后產(chǎn)生的一類會對生物產(chǎn)生很強(qiáng)毒性作用的物質(zhì)。
1. 3熱應(yīng)激導(dǎo)致HSP基因表達(dá)上調(diào)
熱應(yīng)激蛋白（HSP）是魚類在應(yīng)激條件下產(chǎn)生的一種非特異性、能增強(qiáng)機(jī)體對高低溫、創(chuàng)傷、細(xì)菌和病毒感染等適應(yīng)能力的防御性產(chǎn)物。HSP的主要生理功能是促進(jìn)與維持新生多肽鏈的正確折疊，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長、分裂、分化、死亡，參與細(xì)胞的抗損傷、修復(fù)和熱耐受過程，有助于細(xì)胞恢復(fù)正常的結(jié)構(gòu)和機(jī)能，并在多種疾病的治療中起重要作用。同時HSP具有抗氧化作用。它的抗氧化作用表現(xiàn)在：HSP可以抑制氧自由基關(guān)鍵酶產(chǎn)生，通過反饋?zhàn)饔檬寡踝杂苫漠a(chǎn)生減少；HSP可上調(diào)內(nèi)源性抗氧化酶水平，來維持細(xì)胞的功能和生存；HSP能夠?qū)μ瞧べ|(zhì)激素的釋放和代謝造成影響。
2．杜仲葉提取物在抗熱應(yīng)激中的作用
杜仲葉提取物是以杜仲葉為原料，采用現(xiàn)代先進(jìn)提取工藝生產(chǎn)出來的，具有優(yōu)越的抗氧化、清除自由基、抗熱應(yīng)激、抑菌和提高免疫力的作用，是一種高效、環(huán)保、安全、無毒副作用的綠色飼料添加劑。杜仲葉提取物抗熱應(yīng)激的作用主要表現(xiàn)在以下幾個方面。
2. 1杜仲葉提取物對血液激素物質(zhì)的影響
研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉提取物中的綠原酸可抑制成纖維細(xì)胞引起的成纖維細(xì)胞膠原網(wǎng)架的收縮，抑制應(yīng)激反應(yīng)所致的促腎上腺皮質(zhì)激素的升高。
2．2杜仲葉提取物對魚體抗氧化功能的影響
杜仲葉提取物能清除體內(nèi)由于熱應(yīng)激產(chǎn)生的自由基，保護(hù)魚體組織免受氧化損傷。杜仲葉提取物中的綠原酸及其衍生物具有比抗壞血酸，咖啡酸和生育酚更強(qiáng)的自由基消除效果，可有效清除DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基，綠原酸有抗氧化作用，是因?yàn)樗幸欢康腞-OH基，能形成具有抗氧化作用的氫自由基，以消除羥自由基和超陰離子等自由基的活性，達(dá)到保護(hù)組織免受氧化作用的目的。
杜仲葉提取物中的多糖和黃酮類化合物同樣具有顯著的自由基清除能力，其作用機(jī)理包括：①通過向自由基轉(zhuǎn)移電子，清除自由基；②與金屬離子螫合阻斷自由基的生成；③活化抗氧化酶活性；④抑制酶氧化作用。
2．3杜仲葉提取物對HSP70的影響
已有研究表明，水產(chǎn)動物機(jī)體的熱耐受力和免疫功能均與HSP70基因的表達(dá)量密切相關(guān)。研究表明，HSP70可以維持細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)態(tài)，它在細(xì)胞內(nèi)的增多或高表達(dá)可以明顯改善細(xì)胞生存能力，提高細(xì)胞對熱應(yīng)激的耐受性。許多具有免疫增強(qiáng)作用的中草藥或植物提取物不僅能顯著提高養(yǎng)殖魚類的非特異性免疫功能，還能誘導(dǎo)HSP70在各種免疫組織中表達(dá)。據(jù)報(bào)道，中藥抗應(yīng)激沖劑可通過增加豬肝臟HSP70含量水平來提高機(jī)體細(xì)胞熱耐受。清熱復(fù)方中草藥可誘導(dǎo)熱應(yīng)激大鼠肝臟組織中HSP70表達(dá)量的增加，提高組織細(xì)胞的耐受性。雷愛瑩等報(bào)道，用含1%的中草藥飼料喂養(yǎng)凡納濱對蝦10d后，凡納濱對蝦肝組織中HSP70基因的mRNA表達(dá)量顯著高于對照組。Ellen等給鯉魚腹腔注射1ml(2 mg/ml尾)酵母多糖，在注射后24 h時，HSP70基因表達(dá)量在頭腎中顯著上調(diào)，之后表達(dá)量迅速降低。湯菊芬等研究了植物多糖對羅非魚熱應(yīng)激蛋白基因表達(dá)的影響，表明注射一定劑量的植物多糖能顯著提高HSP70基因在鰓、頭腎、肝臟和脾臟組織中的表達(dá)量，可見植物多糖可通過誘導(dǎo)HSP70基因在鰓、頭腎、肝臟和脾臟組織中表達(dá)，使羅非魚提早達(dá)到熱適應(yīng)狀態(tài)。
有報(bào)道指出，植物提取物由于兼具營養(yǎng)和藥物的雙重作用，特別是清熱解暑、補(bǔ)氣解毒等類可以通過提高水產(chǎn)動物免疫力和促進(jìn)其血液循環(huán)，維持內(nèi)分泌系統(tǒng)的穩(wěn)定，使機(jī)體的新陳代謝正常進(jìn)行，為機(jī)體抵抗高溫提供物質(zhì)基礎(chǔ)，從而緩解高溫對水產(chǎn)動物的不良影響。杜仲葉提取物在熱刺激情況下，同樣能有效地促進(jìn)養(yǎng)殖魚類肝臟內(nèi)HSP70的高水平表達(dá)，是一種可以用于緩解魚類熱應(yīng)激的有效添加劑。
由此可見，杜仲葉提取物主要通過清除熱應(yīng)激引起的自由基的增加，提高HSP 70基因在肝臟中的表達(dá)量，以達(dá)到緩解熱應(yīng)激帶來的各種問題。
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