2002 年，美國基因治療公司偶然從 PER.C6 細胞（轉化的胎兒成視網膜細胞）培養基中首次發現并分離到一種新的病毒——塞尼卡谷病毒（SenecaValley virus，SVV，另稱 Seneca virus A，SVA）。2015 年，國際病毒分類委員會（ICTV）將該病毒劃分至新的病毒屬——塞尼卡病毒屬。目前，SVV 是該屬唯一成員。SVV 結構呈二十面體，直徑 30 nm，無囊膜。基因組為線性、不分節段、單股正鏈RNA，全長約 7.2~7.3 kb，5? 和 3? 有非編碼區，具有多聚腺苷酸尾。病毒基因含 1 個開放閱讀框（ORF），編碼含 2 181 個氨基酸的多聚蛋白前體，之后被裂解為 1 個前導蛋白和 3 個主要多聚蛋白（P1、P2 和 P3）。P1 基因區域主要編碼 4 個結構蛋白（VP4、VP2、VP3 和 VP1），形成病毒的核衣殼，而P2和P3基因區域編碼7個非結構蛋白（2A、2B、2C、3A、3B、3C 和 3D）。SVV 與同科的心肌炎病毒屬成員同源性最接近。2014 年以前，該病毒受關注度較低，僅有 SVV-001 等 3 個毒株全基因組序列被測定公布。同時研究發現 SVV-001有溶瘤特性，可專嗜性感染神經內分泌腫瘤細胞，而不感染正常人類細胞，并由此研發出了人用抗腫瘤藥物 NTX-010。目前該藥物尚處于臨床試驗研究階段。

1豬塞尼卡谷病毒病的發現與流行現狀

早在 20 世紀 80 年代，澳大利亞、新西蘭及美國就曾報道豬的一種水皰性疾病。其特征是患病豬鼻、口腔和蹄冠周圍出現小泡和潰瘍，但口蹄疫病毒（FMDV）、豬水泡病病毒（SVDV）等檢測結果為陰性，未能對病原做出確診。當時人們推測該病與豬飼料原料（感染真菌核盤菌的防風草、芹菜葉或海產品）和光照有關。2004 年，美國印第安納州豬群暴發水皰性疾病，但未能確診病因。根據臨床癥狀將其命名為豬原發性水皰病（PIVD）。英國（2007 年）和意大利（2010 年）也曾暴發過類似的水皰性疾病，但也未能確診病原。

2007 年，美國從加拿大進口的 187 頭豬出現水皰病癥狀，發病率高達 80%。在排除了 FMDV和 SVDV 等病毒后， 最終確診為 SVV 感染；2012 年，美國又在出現水皰癥狀的 6 月齡豬體內檢測到 SVV，進而推測 SVV 感染與水皰性疾病有關。2015 年，美國中西部多個地區暴發豬水皰性疾病，新生仔豬死亡率達 30%~70%。由于病原不明，該水皰病的出現一度給美國養豬業造成了很大恐慌。對于該病，美國在鑒別診斷、主動監測和病毒致病機制研究等方面投入很高，影響了整個行業的正常發展；通過 RT-PCR 方法對患水皰病豬進行檢測，證實該病與 SVV 感染有關。

2014 年伊始，全球多個國家確診了豬 SVV 疫情。除美國外，2014 年底至 2015 年初，巴西的 6個州成年豬及斷奶仔豬出現水皰性癥狀，1~4 日齡新生仔豬死亡率上升。經實驗室檢測，在糞便、血清和多個器官組織中檢測出 SVV 陽性。2015年3月和 7月，我國廣東省發現了 SVV 感染導致的豬水泡性疾病。2016年，加拿大、哥倫比亞和泰國發現了豬 SVV 感染。2016—2017 年，我國又從湖北、福建、河南和黑龍江等省的患病豬群中陸續分離到 SVV（圖 1）。

 

圖1 SVV 確診和疑似疫情分布（截至 2017年12月）

2臨床表現

豬感染后通常表現為急性、自限性水皰癥狀。臨床表現為采食量下降，之后鼻吻出現水皰性病變，可見 1 個或多個大小不一、充滿液體的囊泡；囊泡破裂后發展成潰瘍病變，在感染后 10~15 d 形成厚痂。水皰性及潰瘍性病變多出現于蹄冠部趾間裂和冠狀帶周圍，導致邊緣上皮疏松壞死，嚴重者跛行，站立困難（圖 2）。有些母豬腹部和乳房部出現紅色斑點，或伴有發熱和厭食癥狀，甚至發燒（39.5~40.5 ℃），部分跛行的母豬體溫可達 41.0 ℃。新生仔豬體態虛弱，嗜睡，不愿吸乳，并出現急性死亡，在蹄掌部可見部分化膿性小泡。

 

 

圖2鼻吻部出現囊泡（充滿液體或潰破），蹄冠潰瘍性病變

實驗條件下，對 SVV 進行攻毒后，發現豬器官病理變化多生于扁桃體、脾、淋巴結和肺部，淋巴組織輕度至中度多灶性淋巴增生，肺擴張不全，偶見彌漫性充血，血管周圍多灶性輕度淋巴細胞、漿細胞和巨噬細胞聚集。在感染的急性期，肺、縱隔、腸系膜淋巴結、肝、脾、小腸、大腸和扁桃體中可檢測到病毒核酸或感染性病毒粒子。在康復期，肺、心臟和肝臟中檢測不到病毒核酸；在縱隔、腸系膜淋巴結、腎、脾、小腸、大腸和扁桃體中，雖可檢測到核酸，卻不能分離到感染性的病毒粒子 。對9 周齡及 4 月齡豬人工感染 SVV 流行毒株，發現潛伏期為 4~5 d。病毒首先在扁桃體復制，病毒血癥期約為 7 d；在接毒后第 3 天，血清中病毒基因拷貝數達到峰值（約 106.5 拷貝 /mL），隨后逐漸下降；至攻毒后第 10 天，血清中已檢不出病毒；SVV 感染后約 5 d，出現血清轉化，隨著抗體效價升高，組織中病毒含量、病毒血癥、臨床癥狀及排毒均隨之下降或減輕；產生的 SVV 特異性 IgM 高峰持續約10 d（感染后5~15 d），之后抗體水平下降，至感染后第 21 天無法檢測到；而 SVV 特異性 IgG水平在感染后 21 d 達到高峰。

SVV 的發病率和死亡率，受豬群年齡、來源和地理分布等因素影響。2017 年，美國母豬的發病率一度高達 70%~90%，但死亡率只有 0.2% 左右，10~15 d 后臨床癥狀得到緩解，病豬迅速康復。SVV 在新生仔豬中所致發病率和死亡率很高，特別是 1~4 日齡仔豬，發病率達 70%，死亡率達 15%~30%，在仔豬群中出現臨床癥狀和高死亡率的情況可持續 2~3 周。值得注意的是，在我國發現的情況是當母豬出現水皰性臨床癥狀后，新生仔豬才開始死亡。這與在美國發現的仔豬出現臨床癥狀先于母豬臨床癥狀的情況不同。

3未來我國防控應對思考

3.1 建立健全動物水皰性疫病診斷處置方案

SVV 所致豬水皰性臨床癥狀與口蹄疫（FMD）等水皰性疫病相似，難以區分。2015 年，巴西動物衛生部（DSA）公布了 018/2015/CGI/DIPOA/SDA指導方案，規范了發現豬水皰性臨床癥狀后應采取的措施及屠宰程序。2016 年，美國農業部頒布了確診及疑似動物水皰性疾病疫情處置建議和程序，明確了主體責任，確保在調查研究外來動物疫病的同時，防止病原擴散。鑒于 SVV、SDVD 和VSV 等可能會對 FMD 診斷造成影響，應建立健全我國動物水皰性疫病診斷處置方案，提高各級獸醫主管部門和動物疫病預防控制機構對水皰性疾病的認識和鑒別判斷能力。

3.2做好追溯研究，加強主動監測

美國經過 20 年（1988—2008 年）血清學追溯性研究發現，SVV 遍布美國多個州，且已存在數年。然而，在巴西經過 10 年（2007—2016 年）血清學追溯發現，2014 年之前 SVV 在巴西豬群中并不存在。在我國，出現 SVV 陽性的豬場以前從未發生過 SVV 感染，多年堅持自繁自養，未做引種，需進一步通過血清學追溯研究，摸清 SVV在我國的分布和存在的時間，為下一步制定防控及凈化策略提供參考。2015 年，美國暴發 SVV 疫情后，通過 RT-PCR 方法對來自 25 個州無癥狀豬群的 2 033 份口腔液樣品進行病原學檢測，發現病毒RNA 陽性率近 1.2%。這提示 SVV 可能在環境和豬群中持續存在，當豬群免疫低下或有抗體陰性仔豬混群后，就會引起 SVV 的暴發流行。因此，建議在開展口蹄疫主動監測時兼顧 SVV 監測。

3.3 分析病毒基因分子進化規律，關注 SVV 演變

目前主要根據 SVV VP1 基因和全基因做系統進化分析。Leme 等 根據 GenBank 公布的序列信息將 SVV 暫時劃分為 3 個譜系：I 系為標準毒株 SVV-001，II 系主要為 1988—1997 年美國分離株，III 系包括了 2001 年至今從巴西、加拿大、中國、泰國和美國分離的毒株。2017 年初，從福建和河南省分離到的 SVV 毒株基因序列之間同源性達 99.7%~99.8%，在親緣關系上與美國 KS15-01 株相近（98.8%~98.9%），而與廣東和湖北省分離到的毒株關系較遠（96.3%~97.6%），因而推測在我國出現了新 SVV 毒株。今后應在監測、診斷過程中持續追蹤 SVV 基因組遺傳變異情況，為病毒致病變化研究、實驗室檢測和疫苗開發提供參考。

3.4 繼續進行病毒致病機制及宿主抗感染免疫機制等基礎研究

目前已通過結晶并進行 X 射線衍射，研究了SVV 的形態結構，為 SVV 5?UTR 內部核糖體進入位點（IRES）元件的研究提供了借鑒。病毒3Cpro 可以通過直接裂解 MAVS、TRIF 和 TANK 抑制 I 型干擾素的產生，促進病毒復制。SVV 通過結合炭疽毒素受體 1（ANTXR1）感染細胞，提示未來可設計抗病毒藥物來干擾病毒與 ANTXR1的結合，進而抑制病毒復制。下一步，應通過建立 SVV 反向遺傳操作系統，研究病毒入侵及致病分子機制；分析 SVV 在細胞內完成復制的周期調控機制，篩選和確定影響自噬活性和細胞凋亡的關鍵病毒因子、靶分子及小分子化合物；在 SVV感染宿主后，篩選和鑒定宿主抗病毒先天性免疫信號通路的關鍵調節蛋白、宿主細胞蛋白修飾（如磷酸化、泛素化修飾），以及發揮抗病毒作用的宿主非編碼 RNA 及其作用機制。

3.5 制定 SVV 診斷國家標準，同時開發快速、靈敏、方便的現場診斷方法及高通量鑒別診斷方法

目前，在實驗室病原學檢測方面，國內外多家研究機構針對SVV基因3D、5?UTR和VP1等保守區域建立了普通RT-PCR、熒光定量RT-PCR和原位雜交ISH-RNA方法。中國動物衛生與流行病學中心外來病研究中心利用重組酶聚合酶擴增技術（RPA）建立了實時熒光檢測方法，在40 ℃、10 min內可檢測的核酸最低濃度為28 拷貝/?L[26]。在血清學檢測方面，通過表達SVV VP1重組蛋白或利用二乙烯酰胺（BEI）滅活SVV免疫小鼠制備抗SVV單抗[28]，分別建立了間接和競爭ELISA等方法。加拿大Bio-vet公司已開發了商品化的SVV抗體cELISA診斷試劑盒。除了ELISA方法外，間接免疫熒光試驗與病毒中和試驗檢測方法也用于流行病學監測及調查。針對目前SVV流行情況，應盡快制定SVV國家診斷標準，此外可利用RPA恒溫擴增技術和膠體金等技術，開發適于基層獸醫和豬場使用的病原和抗體快速檢測試紙條；利用液相芯片和α-ELISA等技術，開發高通量多重檢測方法，對可導致豬出現水皰性臨床癥狀的FMDV、SVV、SVDV、VSV和VESV等病原做出病原學和血清學鑒別診斷。

3.6 研制新型安全有效的 SVV 疫苗

目前尚無商品化的 SVV 疫苗問世。美國以當地SVV流行株KS15-01為骨架，利用反向遺傳技術，構建了感染性克隆 vKS15-01-EGFP，為下一步通過定點突變，研發高效、無致病性且具備標記（DIVA，區分感染和免疫動物）的重組病毒活疫苗提供了依據。此外，可將口蹄疫合成肽疫苗作為參照，利用計算機輔助進行抗原位點分析預測，對主要抗原位點進行變異情況研究，對可能的抗原位點肽段進行化學合成，通過動物試驗對候選 SVV 多肽抗原進行篩選，根據篩選結果對抗原位點進行優化，確保有效囊括 T 細胞表位和 B 細胞表位，以增強多肽抗原的免疫效果。

3.7 加強飼養管理，提高生物安全水平

由于目前沒有疫苗或有效的治療方法來防治SVV，因此豬場的飼養管理和生物安全防范至關重要。哺乳母豬和仔豬的圈舍環境應舒適，并確保 1周齡內仔豬攝取足量優質初乳。豬舍應遠離公路等車輛流通區域，最好做到運輸生豬車輛專車專用，出入場舍做好消毒，且應避免該車與 SVV 陽性豬場車輛、人員和動物接觸。飼養人員進出豬舍應沐浴并更換工作服和靴子，接觸不同豬群時應有間隔觀察期。應從豬群健康、無疫病發生的豬場引種，有條件的可在引種前對待引豬進行抽樣檢測，混群前隔離觀察。避免老鼠、蒼蠅等生物媒介與豬群接觸。對于 SVV 陽性豬場，除了提高管理水平外，應嚴格執行全進全出制度，對豬舍、設備和工具嚴格清潔和消毒。

4小結

豬 SVV 作為近兩年在全球多地出現的一種跨境動物疫病病毒，已對多國養豬業造成了不同程度的影響，但其受到的關注還遠遠不夠。SVV 的致病機制和傳播方式如何，未來流行態勢將怎樣演變，不得而知，但可以明確的是各國應對 SVV 高度重視。我國是養豬大國，生豬養殖總量約為全球的50%，是最大的生豬生產基地和豬肉需求市場。根據 2017年2月28日國家統計局發布的《2016 年國民經濟和社會發展統計公報》數據顯示，2016 年末我國生豬存欄43 504萬頭，生豬出欄68 502萬頭，生豬養殖業在國計民生中占有重要地位。因此，有必要提高認識，緊密把握 SVV 的流行態勢，研究病毒宿主相互作用機制，盡快做好診斷和疫苗技術儲備，提高對 SVV 的綜合防控能力。