在規?;s化豬場內,副豬嗜血桿菌病時有發生,表現為多發性漿膜炎和關節炎,主要感染斷奶前后和保育階段豬,發病率一般在10%-15%,嚴重時死亡率可達50%。我們實驗室對湖南地區某豬場疑似病例進行了病原的分離鑒定和藥敏試驗,得到良好的治療效果?,F將結果報告如下:
一、材料
1、病料:在無菌操作條件下取疑似病豬的肺臟、胸膜、胸腹腔積水、心包積液、心血、關節液等。
2、培養基:巧克力瓊脂平板或胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)。
3、生化試驗試劑:氧化酶、甘露醇、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、糖、脲酶和伯膠糖等,均購自長沙金標生物有限公司。
4、藥敏試紙:氟苯尼考、泰妙菌素、頭孢菌素、丁胺卡那霉素、氟甲砜霉素、頭孢噻肟、紅霉素、克林霉素、慶大霉素、環丙沙星、恩諾沙星、鏈霉素、土霉素, 均購自長沙金標生物有限公司。
二、方法及結果
1、病理變化觀察
剖檢病死豬,發現胸腔內有大量淡紅色液體、纖維性滲出物。肺臟呈纖維素性胸膜肺炎, 肺腫大暗紫紅色,表面覆有纖維素性滲出物。支氣管內有淡紅色泡沫樣滲出物。心包積液。腹腔內有大量透明黃褐色滲出液, 有的呈膠胨狀凝塊。全身淋巴結腫大,暗紅色。
2、觸片鏡檢
取發病豬的肺組織、心血、胸水和腹膜面涂片,革蘭氏染色,鏡檢可見革蘭氏陰性的細小桿菌,個別兩極球桿狀革蘭氏陰性菌。
3、細菌分離培養
無菌取發病豬的肺臟、腹膜、胸水和心血劃線接種TSA平板,置37℃,5%CO2培養箱培養48h,出現無色、透明、濕潤、光滑、邊緣整齊的針頭大小菌落,鏡檢可見大小不一、形態有細長、絲狀的革蘭氏陰性桿菌。接種無NAD的TSA不生長。而后挑取單個菌落,再進行純培養。
4、生化試驗
挑取純化菌落接種于氧化酶、甘露醇、吲哚、葡萄糖、半乳糖、果糖、蔗糖、核糖、脲酶和伯膠糖等生化鑒定管中,同時加入0.01%的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)5微升,置于37℃5%的CO2 培養箱培養48h,觀察結果如下:
項目
氧化酶
甘露醇
吲哚
葡萄糖
半乳糖
果糖
蔗糖
核糖
脲酶
伯膠糖
結果
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5、藥敏試驗
將細菌TSA純培養物,吸取200微升均勻涂布于TSA平板上,紙片法進行藥敏試驗,置37℃5%的CO2培養箱中培養48h,測量抑菌環直徑并判定結果。該菌對氟苯尼考、泰妙菌素、氟甲砜霉素、頭孢菌素、丁胺卡那霉素、頭孢噻肟高敏,對紅霉素、克林霉素、慶大霉素、環丙沙星、恩諾沙星、鏈霉素、土霉素低敏。
三、討論與防治建議:
當前豬場普遍濫用抗生素使得副豬嗜血桿菌在病料中分離率比較低,要求患豬未使用抗生素治療并且在剖殺后6小時內進行細菌分離。而且該菌對營養要求苛刻,在巧克力培養基上培養48h生長也較差。一般該菌的分離應采用含NAD、酵母浸出液和10%馬血清的TSA培養基。
1、 保健措施:
仔豬在斷奶前一周和斷奶后三周的每噸飲水中混入九鼎鼎諸康0.25公斤。生長肥育豬每噸配合飼料中使用0.125公斤九鼎泰妙凈。鼎諸康和泰妙凈的主要成分就是我們實驗結果得出的兩種高敏藥物分別是氟苯尼考和泰妙菌素。
2、 加強日常管理、必要時做好免疫:
加強日常管理,做好環境衛生的消毒工作對預防細菌病有重要意義。一般豬場無本病發生時,要做好藥物保健措施,不建議免苗。在本病常發場,建議使用正規廠家的疫苗做好免疫程序。
3、治療:發病豬只用氟苯尼考注射液肌注2mg/kg一天一次。