(哈爾濱中科 韓小米)
隨著今年家兔及賴兔毛皮價格的持續上漲,兔子的養殖即將進入另一個新的高峰期。養殖的規模越大,兔病的爆發率就會越高,疾病危害也會日益增大。如何保證兔業的健康發展,我們一直在不斷地探索和實踐。
腹瀉是危害肉兔養殖業的主要疾病,養殖場肉兔死亡有30%以上系腹瀉病所致,一些技術儲備不足的兔場,幼兔死亡率高達50%~70%,其中腹瀉占到80%以上。肉兔腹瀉不僅僅是中國養兔業的棘手問題,也是世界養兔業的技術難題之一。斷奶幼兔腹瀉死亡給企業造成了巨大的經濟損失,也嚴重阻礙了養兔業的健康發展,是一個亟待解決的技術問題。肉兔腸道菌群紊亂是腹瀉發生的主要原因,肉兔腹瀉病主要表現為糞呈粥狀或水樣便,混有氣泡、粘液及未消化物,肛周及后肢污染,病兔最終衰竭脫水死亡。
本研究使用活菌中藥微生態微生態制劑“腸速康”調理肉兔腸道微生物菌群,采用“以菌制菌”的原則,試圖發現一種新的行之有效的可完全替代抗生素的綠色添加劑,來預防養殖過程中的肉兔的腹瀉。
1【實驗方法】取斷奶獺兔1000只(體重g),隨機分為實驗組和對照組,每組500只,每組4個重復;實驗組四組日糧中分別添加0.1%、0.2%、0.25%、0.15%的中藥微生態制劑“腸速康”,對照組不添加;兩組飲水、免疫、日常管理無差異;每天記錄各組動物死淘、腹瀉發生情況;30d分別取實驗與對照肉兔各12只(每個重復3只),剖檢取腸道分別檢測大腸桿菌總數、乳酸菌總數;小腸雙糖酶含量;盲腸內容物氨態氮;腸道組織切片。其中活菌中藥微生態制劑由哈爾濱中科生物工程有限公司提供。
1.1 腹瀉率每天記錄腹瀉發生肉兔數量,腹瀉判定標準為糞便松軟不成球、牛糞樣、水樣;每只記為1頭次;腹瀉率=試驗期腹瀉肉兔頭次數/(試驗肉兔頭數×試驗天數)×100%。
1.2 腸道菌群總數取肉兔盲腸內容物,檢測其中大腸桿菌總菌群數、乳酸菌涂板計數。
1.3 盲腸內容物氨態氮使用Weathburn方法
1.4 盲腸內容物微生物蛋白使用Zinn和Owens方法
1.5 小腸雙糖酶麥芽糖酶/蔗糖酶法試劑盒
1.6 組織切片取十二指腸、小腸、盲腸各4~5cm,福爾馬林固定48h,經復水、脫水、浸蠟、包埋制作石蠟切片,8μm連續切片,隔六取一,HE染色;顯微鏡觀察腸絨毛變化。
2試驗結果
2.1 腹瀉率實驗組平均死淘低于對照組9.4個百分點;腹瀉肉兔數量顯著少于對照組;腹瀉率也顯著低于對照;實驗組在飼喂一周以后舍內氨氣濃度顯著低于對照;實驗組吃軟糞的次數顯著減少,在兔舍內很難發現不成形糞便。對照組在一周以后腹瀉情況明顯上升。
表1 肉兔腹瀉頭次數及腹瀉率
實驗組 |
對照組 |
|
成活率(%) |
97.4 |
88.2 |
腹泄頭次數 |
217 |
1027 |
飼養總日數 |
14941 |
14133 |
腹瀉率(%) |
1.45 |
7.27 |
2.2 盲腸菌群總數實驗組大腸桿菌總數量明顯低于對照組,差異極顯著(P<0.01);實驗組乳酸桿菌含量極顯著低于對照組(P<0.01)
表2 肉兔盲腸大腸桿菌及乳酸桿菌數量
實驗組 |
對照組 |
|||||||
大腸桿菌(億/克) |
1.53+0.31 |
0..93+1.53 |
0.70+0.50 |
1.33+1.99 |
3.03+1.79 |
3.73+0.85 |
3.30+0.90 |
3.53+0.49 |
乳酸桿菌(億/克) |
1.61+0.89 |
2.32+0.01 |
2.52+0.27 |
2.05+0.04 |
0.06+0.03 |
0.09+0.11 |
0.07+0.04 |
0.13+0.05 |
2.3 盲腸內容物氨態氮實驗組盲腸內氨態氮含量極顯著低于對照組(P<0.01)
表3 肉兔盲腸內容物氨態氮含量
實驗組 |
對照組 |
|||||||
氨態氮含量(g/g) |
0.054+0.010 |
0.023+0.006 |
0.011+0.016 |
0.027+0.014 |
0.13+0.18 |
0.154+0.006 |
0.097+0.018 |
0.160+0.009 |
2.4盲腸內容物微生物蛋白實驗組盲腸內容物中微生物蛋白含量極顯著高于對照組(P<0.01)
表4 肉兔盲腸內容物微生物蛋白含量
實驗組 |
對照組 |
||||||||
盲腸內容物氮(mg/g) |
31.136+10.061 |
37.322+20.516 |
39.392+19.810 |
36.499+10.014 |
27.397+12.216 |
12.005+8.050 |
15.047+9.337 |
14.996+6.565 |
2.5 小腸雙糖酶實驗組小腸內麥芽糖酶和蔗糖酶酶活均極顯著高于對照組。
表5 肉兔小腸雙糖酶的酶活
實驗組 |
對照組 |
|||||||
麥芽糖酶(U/g) |
479+28.4 |
502+19.8 |
529+20 |
483+99 |
203+50 |
186+46 |
232+90 |
253+48 |
蔗糖酶(U/g) |
78+18 |
98.5+14.7 |
108.5+17 |
96+29 |
29.1+38.6 |
19.6+11 |
19.7+3.94 |
29.13+4.05 |
2.6 組織切片實驗組盲腸絨毛中細胞核數量顯著多于對照組;小腸皺褶數目顯著多于對照;十二指腸溝回深度大于對照。
1對照組盲腸微絨毛;2實驗組盲腸微絨毛 HE ×100
3對照組小腸絨毛;4實驗組小腸絨毛 HE ×40
5 對照組十二指腸;6實驗組十二指腸 HE ×4
3討論
從實驗和對照組的腹瀉率來看活菌中藥微生態制劑能有效的預防肉兔斷奶后的腹瀉,且能將腹瀉率控制在一個理想的數值內,同時也在一定的程度上減少了肉兔因腹瀉帶來的死亡。
腸道內大腸桿菌的過量繁殖是腹瀉發生的一個主要原因,由表2我們可以看出使用活菌中藥微生態制劑能將肉兔盲腸中大腸桿菌的數量控制在一個合適的范圍,最重要的是能顯著提高盲腸中乳酸桿菌的含量。
當氮源缺乏時,微生物降解氨基酸供能,食糜中的氨態氮水平升高,同時氨基酸的代謝產物如:氨、硫化氫、酚類物質影響家禽健康,增加應激水平,氨態氮的下降說明實驗組的肉兔抗應激能力顯著高于對照(表3)。
盲腸內容物的微生物蛋白水平高于對照說明實驗組微生物總菌群的數量高與對照組,同時由表2可以得知腸道中大腸桿菌的數量低于對照,由此可知腸道中無害菌的含量明顯高于對照,有利于腸道多種菌群之間的平衡,對生物多樣性朝有益的方向發展提供前提。
小腸中麥芽糖酶和蔗糖酶酶活均高于對照組說明實驗組肉兔腸道對非淀粉多糖的吸收和利用顯著好于對照,非淀粉多糖是日糧中的主要抗營養因子之一,很難被內源酶降解,同時增加腸道內食糜的黏度,降低飼料養分的消化吸收,易引起營養性腹瀉,添加活菌中藥微生態制劑可以顯著提高動物對非淀粉多糖的消化吸收,從而減少腹瀉的發生。
從腸道的組織切片可以看出,活菌中藥微生態制劑能顯著刺激肉兔腸道的發育,腸絨毛中的細胞核數量顯著多于對照組,且細胞核染色較深,說明細胞正處于活躍狀態(圖1、2);從小腸絨毛的總體情況來看單位面積中實驗組的小腸絨毛數量顯著多于對照,且實驗組絨毛的發育狀況優于對照,有利于增加小腸和食糜的接觸面積;實驗組十二指腸的溝回明顯多于對照組,可以顯著提高對食糜的消化吸收能力。
由此可見,活菌中藥微生態制劑“腸速康”可以改善肉兔腸道菌群、減少大腸桿菌的含量、提高乳酸桿菌的含量、維護腸道生物多樣性、提高腸道的非淀粉多糖酶的酶活、刺激腸絨毛的發育、改善腸絨毛結構,從菌群、分泌物、組織結構三個方面調理腸道對食糜的吸收從而減少腹瀉的發生,且這些功能在養殖現場得到驗證,說明活菌中藥微生態制劑是肉兔養殖中控制腹瀉的一個非常有效的途徑。
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