在養豬生產中,由于疾病的復雜和混合感染的普遍,經常運用實驗室診斷試驗評估豬群的健康狀況,監測豬群對免疫接種的血清學反應,監測疾病控制與凈化程序的進展和成效。
實驗室的診斷試驗結果在養豬生產中具有很重要的指導意義,但很多因素會對實驗室診斷試驗結果產生不同程度的影響,有時甚至產生與生產實際情況差距很大的情況,如不能正確運用實驗室診斷結果指導生產,將在養豬生產中造成損失,有時甚至是不可挽回和影響深遠的。
1 診斷試驗結果的差異
造成診斷試驗結果差異來自于實驗(試驗)和樣本兩個方面。
1.1 實驗(試驗)的差異
1.1.1 所有實驗室的建立都是根據當時的歷史條件及應用需要來建立的,實驗室之間的試驗條件并不是完全標準化,在不同的試驗條件下,針對同一樣本的檢測結果很可能存在著差異。
1.1.2 人員的操作的差異
由于不同技術人員之間存在著專業水平和操作技術的差異,或同一技術人員在不同時間對試驗結果的解釋差異,甚至在試驗中發生樣本混淆、記錄錯誤和樣本交叉污染等情況都有可能造成結果的差異。
1.1.3 試劑盒的差異
在實驗室診斷試驗中,很多疾病的檢測都是使用工業化生產的試劑盒,不同生產廠家所生產的試劑盒,由于在進行敏感性和特異性試驗時所確定的臨界值不是完全相同,故不同廠家生產的試劑盒所檢測的結果也可能有差異。
由于感染豬和非感染豬的試驗結果會有部分重疊,因此臨界值的確定會影響檢測結果。當降低臨界值會提高敏感性,其代價是降低了特異性,檢測結果中假陽性真陰性的豬只比例會增加,反之亦然。
作為SPF豬場因為需要保持SPF豬場的狀態,那么高敏感性的試驗是十分必要的。但若是陽性場為了凈化某一特定病原而采用了高敏感性試劑盒,被淘汰豬只中假陽性真陰性的比例會增高,付出的代價就會較大。
2 樣本的差異
感染豬的血清學反應情況取決于感染劑量,感染豬的臨床情況,持續時間及其它并發感染等。
2.1 采樣豬只狀況
一般來說,采樣進行實驗室檢測時,都是采取發生嚴重臨床癥狀的豬只,值得注意的是,抗體水平最高時,并不一定是感染劑量最高的時候,所以應科學地確定采樣的個體,采樣個體應該具有典型的臨床癥狀。
2.2 樣本的制作、運輸
2.2.1 采樣部位
2.2.1.1 血液
大部分豬場采血時都是采耳靜脈的血,這種方法的優點是簡單易行,技術要求不高,缺點是易污染,時間長,血量少,為了減少因采血的污染造成檢測結果的差異,建議使用真空采血管或一次性注射器進行前腔靜脈采血。
2.2.1.2 組織
采組織樣時,一定要根據準備檢測病原的要求采樣,部位要準確,而且要盡量做到無菌采樣,否則也會造成結果差異。
2.2.2 樣本的制作
不同的樣本很容易在制作時造成交叉污染,這樣也會造成結果差異,應使用一次性器具或經嚴格消毒的器具。
2.2.3 運輸
應根據樣本的防腐保存的具體要求分別使用甲醛、酒精、凍干或冷藏等方法進行保存,運輸時應根據路途長短而確定包裝方法、冰塊的多少,防止樣本變質。
3 綜合評估實驗室診斷試驗結果
在養豬生產中,幾乎所有的傳染病都是由多種病因引起的,這也是豬場暴發傳染病時比較難以控制,引起高死亡率的原因。在進行檢測時可能會發現很多感染病原體同時存在,其實環境和管理因素在顯露疾病的臨床表現及確定疾病對生產性能的影響方面起到核心作用,因此在送檢樣本時,應明確試驗的目的是為了證實或排除某種潛在的致病性病原,還是確定病原體在疾病過程中的作用。
在獲得檢測結果之后,應根據豬只臨床狀況和有關的傳染病原和其它因素在疾病發生中所處的相對重要性來綜合分析實驗室的結果。
4 建議
由于獲得的檢測結果有可能會受到以上那么多因素的影響,為了取得對豬場有實際指導意義的檢測結果,提出幾點建議:
4.1 選擇具有良好內、外部質量控制程序并具有豐富的做相關病原或試驗工作的實驗室,可一份樣本送多個實驗室,再在某一實驗室做重復性試驗,以期獲得較為準確的結果。
4.2 采樣之前與有關專家確定合適的樣本來源、數量、類型及正確的送檢方法。
4.3 明確送檢目的。
4.4 獲得檢測結果時應考慮陽性試驗結果和陰性試驗結果的預測值。
實驗室的診斷試驗結果在養豬生產中具有很重要的指導意義,但很多因素會對實驗室診斷試驗結果產生不同程度的影響,有時甚至產生與生產實際情況差距很大的情況,如不能正確運用實驗室診斷結果指導生產,將在養豬生產中造成損失,有時甚至是不可挽回和影響深遠的。
1 診斷試驗結果的差異
造成診斷試驗結果差異來自于實驗(試驗)和樣本兩個方面。
1.1 實驗(試驗)的差異
1.1.1 所有實驗室的建立都是根據當時的歷史條件及應用需要來建立的,實驗室之間的試驗條件并不是完全標準化,在不同的試驗條件下,針對同一樣本的檢測結果很可能存在著差異。
1.1.2 人員的操作的差異
由于不同技術人員之間存在著專業水平和操作技術的差異,或同一技術人員在不同時間對試驗結果的解釋差異,甚至在試驗中發生樣本混淆、記錄錯誤和樣本交叉污染等情況都有可能造成結果的差異。
1.1.3 試劑盒的差異
在實驗室診斷試驗中,很多疾病的檢測都是使用工業化生產的試劑盒,不同生產廠家所生產的試劑盒,由于在進行敏感性和特異性試驗時所確定的臨界值不是完全相同,故不同廠家生產的試劑盒所檢測的結果也可能有差異。
由于感染豬和非感染豬的試驗結果會有部分重疊,因此臨界值的確定會影響檢測結果。當降低臨界值會提高敏感性,其代價是降低了特異性,檢測結果中假陽性真陰性的豬只比例會增加,反之亦然。
作為SPF豬場因為需要保持SPF豬場的狀態,那么高敏感性的試驗是十分必要的。但若是陽性場為了凈化某一特定病原而采用了高敏感性試劑盒,被淘汰豬只中假陽性真陰性的比例會增高,付出的代價就會較大。
2 樣本的差異
感染豬的血清學反應情況取決于感染劑量,感染豬的臨床情況,持續時間及其它并發感染等。
2.1 采樣豬只狀況
一般來說,采樣進行實驗室檢測時,都是采取發生嚴重臨床癥狀的豬只,值得注意的是,抗體水平最高時,并不一定是感染劑量最高的時候,所以應科學地確定采樣的個體,采樣個體應該具有典型的臨床癥狀。
2.2 樣本的制作、運輸
2.2.1 采樣部位
2.2.1.1 血液
大部分豬場采血時都是采耳靜脈的血,這種方法的優點是簡單易行,技術要求不高,缺點是易污染,時間長,血量少,為了減少因采血的污染造成檢測結果的差異,建議使用真空采血管或一次性注射器進行前腔靜脈采血。
2.2.1.2 組織
采組織樣時,一定要根據準備檢測病原的要求采樣,部位要準確,而且要盡量做到無菌采樣,否則也會造成結果差異。
2.2.2 樣本的制作
不同的樣本很容易在制作時造成交叉污染,這樣也會造成結果差異,應使用一次性器具或經嚴格消毒的器具。
2.2.3 運輸
應根據樣本的防腐保存的具體要求分別使用甲醛、酒精、凍干或冷藏等方法進行保存,運輸時應根據路途長短而確定包裝方法、冰塊的多少,防止樣本變質。
3 綜合評估實驗室診斷試驗結果
在養豬生產中,幾乎所有的傳染病都是由多種病因引起的,這也是豬場暴發傳染病時比較難以控制,引起高死亡率的原因。在進行檢測時可能會發現很多感染病原體同時存在,其實環境和管理因素在顯露疾病的臨床表現及確定疾病對生產性能的影響方面起到核心作用,因此在送檢樣本時,應明確試驗的目的是為了證實或排除某種潛在的致病性病原,還是確定病原體在疾病過程中的作用。
在獲得檢測結果之后,應根據豬只臨床狀況和有關的傳染病原和其它因素在疾病發生中所處的相對重要性來綜合分析實驗室的結果。
4 建議
由于獲得的檢測結果有可能會受到以上那么多因素的影響,為了取得對豬場有實際指導意義的檢測結果,提出幾點建議:
4.1 選擇具有良好內、外部質量控制程序并具有豐富的做相關病原或試驗工作的實驗室,可一份樣本送多個實驗室,再在某一實驗室做重復性試驗,以期獲得較為準確的結果。
4.2 采樣之前與有關專家確定合適的樣本來源、數量、類型及正確的送檢方法。
4.3 明確送檢目的。
4.4 獲得檢測結果時應考慮陽性試驗結果和陰性試驗結果的預測值。