仔豬黃白痢又稱新生仔豬腹瀉，是仔豬黃痢和白痢的總稱，很大一部分是由致病性大腸桿菌引起的一種高致病性的傳染病，以排出白色或黃色稀糞和迅速死亡為特征。由于大腸桿菌血清型眾多，且不同年齡的豬感染大腸埃希菌的主要血清型不同，因而疫苗的使用保護性差，且由于耐藥性的產生，都給本病的防治造成一定的難度。本試驗對某豬場發生仔豬黃白痢的病原菌進行分離鑒定，旨在為該養豬場制定有效的防制措施提供依據。

1材料與方法1．1病料與試劑來源于鎮江地區某規模化豬場11窩30日齡內發生黃白痢的仔豬，用滅菌棉拭子從腹瀉仔豬直腸采集糞便55份，進行細菌的分離鑒定。營養肉湯、營養瓊脂、麥康凱瓊脂、SS培養基、三糖鐵培養基；生化鑒定培養基購自杭州天和微生物試劑公司；藥敏紙片購自杭州天和微生物試劑公司；大腸桿菌O抗原定型血清購自中國獸醫藥品衛生監察所。1．2試驗動物體重20-25 g健康小白鼠90只，雌雄各半，由南京市江寧區青龍山動物繁殖場提供。1．3細菌分離用棉拭子采集發生黃白痢的仔豬的肛門糞便，混懸于裝有滅菌生理鹽水的滅菌離心管中，搖動離心管徹底洗滌拭子糞便于管中，并靠壁旋動拭子，擠出液體。用接種環取上述大便懸液1—3環，接種于麥康凱瓊脂培養基平板，置37℃培養24 h后觀察培養特性。將以上麥康凱培養基中的紅色菌落，再接種于SS培養基、麥康凱培養基中，置37℃培養24 h后進行純化培養，觀察菌落的生長情況，并取麥康凱培養基上的單個菌落進行涂片，革蘭氏染色、鏡檢。1．4生化特性試驗按文獻方法進行。取純培養細菌接種于營養肉湯中，37℃培養24 h后，接種到各微量發酵管及種生化培養基中，置37℃培養24 h后，觀察記錄結果。1．5致病性試驗將接種細菌后的營養肉湯37℃培養24 h后，分別腹腔接種體重20 g左右的小白鼠，每株接種10只，每只0．2 mL(含菌量約為8．0×108CFU／mL)，同時用10只小白鼠接種無菌肉湯作對照。飼養觀察、記錄死亡數，并從死亡小白鼠的心血中分離細菌。1．6血清型鑒定經分離及初步鑒定的細菌送揚州大學進行血清型鑒定。1．7藥敏試驗按K—B法，選取上述致病性的大腸桿菌菌株做藥敏試驗。置37℃培養24 h后觀察，根據抑菌圈直徑大小來判定其對藥物的耐受性。

2 結果2．1細菌分離從病料中分離到8株細菌，在營養肉湯中呈均勻一致的混濁，管底形成灰白色沉淀，液面管壁有菌環；在營養瓊脂上長成圓形、隆起較濕潤的中等大小的灰白色菌落；麥康凱瓊脂上形成中等大小磚紅色、圓形凸起的菌落；在SS瓊脂上呈紅色小菌落。鏡檢為兩端鈍圓并多以單個存在的革蘭氏陰性粗短桿菌，具有典型大腸桿菌培養特性和形態特征。2．2細菌的生化特性經生化試驗鑒定為大腸桿菌。該8株細菌均能發酵棉籽糖等，枸椽酸鹽利用、尿素分解絕大部分呈陰性，均不產生硫化氫，吲哚、M．R陽性，結果符合大腸桿菌生化特征，見表1。2．3致病性試驗接種24 h后，觀察小白鼠出現死亡情況，而對照組小白鼠均健活。從死亡小白鼠心血中分離到與接種菌株形態、培養特性相同的細菌，因此基本確定小白鼠死亡是由接種菌引起的，說明從病料中分離到的8株菌均為致病性大腸桿菌。2．4血清型鑒定經血清型鑒定，該8株大腸桿菌有3種血清型，其余的未定型，結果見表3。2．5藥敏試驗選用臨床常用的10種抗生素藥敏片，進行的耐藥性試驗結果見表4。從表4可以看出抑菌作用最強的是丁胺卡那霉素、頭孢孟多、復達欣等，高敏菌株達88％；慶大霉素、洛美沙星和頭孢噻吩敏感性居中；氨芐西林、氯霉素和環丙沙星的抑菌作用較低。

3討論從腹瀉仔豬糞便棉拭子中分離得到8株細菌，經形態學觀察、革蘭氏染色、生化特性及培養特性鑒定為大腸桿菌，而且其對小白鼠表現出較強的致病性，由此可以初步推測該豬場仔豬黃白痢的發生與大腸桿菌相關。藥敏試驗的結果說明，從本豬場分離的大腸桿菌出現了較廣的耐藥性。從本次藥敏試驗看出本場的大腸桿菌對丁胺卡那、復達欣和頭孢孟高敏，但也出現了向中敏區和低敏區過渡以及低敏區比例增加的明顯趨勢，如不注意臨床合理用藥，隨時都會有產生耐藥株的可能。因此在臨床上用藥應引起高度重視，最好根據藥敏試驗結果進行合理選擇。在分離的8株致病性大腸桿菌中只有3株鑒定出抗原血清型，有5株尚未鑒定出血清型，顯示了該豬場致病性大腸桿菌血清型的復雜性。由于樣品為部分病料，本場是否存在其他類型的致病性大腸桿菌還需要進一步的分離鑒定。