隨著我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)日益向規(guī)模化、集約化方向發(fā)展,雞病也呈現(xiàn)出新的特點(diǎn),如混合感染增多,病癥復(fù)雜化和非典型化。為了給疾病的預(yù)防、控制、凈化提供技術(shù)支持,必須執(zhí)行日常疫病監(jiān)測(cè)制度,在此過(guò)程中,雞的血液采集是一項(xiàng)重要的常規(guī)性和前提性工作,準(zhǔn)確快速的采血技術(shù)可以減少雞只應(yīng)激,避免造成雞只不必要的死亡,還可使監(jiān)測(cè)結(jié)果更為可靠。血樣的采集看似簡(jiǎn)單,但真正操作起來(lái),其難度和強(qiáng)度較大,集專業(yè)知識(shí)和操作技巧于一體。筆者結(jié)合長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐,主要針對(duì)與雞采血技術(shù)相關(guān)的問(wèn)題進(jìn)行介紹。
一、主要器材
5mL一次性塑料注射器、試管、試管架、5%碘酊棉球、75%酒精棉球、干棉球、標(biāo)簽紙、記號(hào)筆、相關(guān)表格等。
二、采血前的準(zhǔn)備工作
采血人員必須2人以上,需經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn),熟練掌握采樣技巧,并遵循嚴(yán)格的無(wú)菌操作規(guī)程。獸醫(yī)人員到雞場(chǎng)采樣時(shí),要嚴(yán)格遵守雞場(chǎng)消毒防疫等相關(guān)規(guī)定,口罩、乳膠手套、防護(hù)帽、防護(hù)服、防護(hù)鞋穿戴整齊后方可進(jìn)入現(xiàn)場(chǎng)。
采血的地點(diǎn)和時(shí)間應(yīng)符合要求。采血場(chǎng)所應(yīng)有充足的光線。夏季室溫最好保持在25℃~28℃,冬季則在1 4℃~20℃。如果雞處于產(chǎn)蛋期間,最好等到下午大部分雞產(chǎn)完蛋后采血,以免應(yīng)激反應(yīng)引起產(chǎn)蛋下降。
采血時(shí)用的注射器和試管保持清潔干燥,并且注射器要有足夠的強(qiáng)度、使用靈活且方便可靠、外包裝未破損、在有效期內(nèi)使用。
三、采血方法
采血方法的選擇,主要取決于采血的目的、所需血樣或血清的數(shù)量以及雞的日齡等,視實(shí)際情況而定。凡用血量較少的檢驗(yàn),如血涂片.可刺破雞冠取血;用中等量血時(shí),可以從靜脈血管采集,如檢測(cè)血清中禽流感、新城疫抗體效價(jià);當(dāng)需血量較多時(shí),可以從心臟采集,如配制雞紅細(xì)胞懸液。雛雞可采用跖骨內(nèi)側(cè)靜詠采血法、頸靜詠采血法;青年雞、育成雞比較多的應(yīng)用翼下靜脈采血法、心臟采血法。
1、雞冠采血法
多用于采血量較少的采血,用針頭刺破雞冠即可。吸取血液時(shí)用手?jǐn)D壓雞冠一次,毛細(xì)管可吸取30~80ul血液。此法操作簡(jiǎn)便,但采完血后要用濃碘酒涂抹傷口止血,既預(yù)防感染,又能制止因出血而引起的啄冠。
2、頸靜脈采血法
雞右側(cè)頸靜脈較左側(cè)粗,故常采用右側(cè)頸靜脈采血。左手以食指和中指夾住雞頭部,并使頭偏向左側(cè),無(wú)名指、小指和手掌握住軀干、拇指輕壓頸椎部以便靜脈充血怒張。常規(guī)消毒后,右手持注射器,針頭傾斜45。沿血管方向一側(cè)0.3~0.5cm刺人靜詠,再與血管平行進(jìn)針0.2~0.5cm抽取血液.采血完畢后,壓迫傷口處止血。
3、跖骨內(nèi)側(cè)靜脈采血法
雞跖骨內(nèi)側(cè)靜脈采血法適合于雛雞,其優(yōu)點(diǎn)是易于保定,血管位置明顯,并且血管游離性小。
助手一手固定兩翼根部,另一手固定一只腳,按住跖骨內(nèi)側(cè)的靜詠,此時(shí)腳部靜脈突起,常規(guī)消毒后,右手持注射器與跖骨皮膚呈10。順血管方向進(jìn)針取向。跖骨內(nèi)側(cè)靜脈采血是向心方向,采血時(shí)進(jìn)針角度不能太大,回抽活塞的速度要特別緩慢。
4、翼下靜脈采血法
翼下靜脈采血法是雞的采血方法中最常用的。采血時(shí),最好有助手保定雞。助手左手抓雞的兩只腳,右手抓雞的兩只翅膀,將雞側(cè)放于地面,并用大拇指壓迫翅膀根部靜脈,使靜詠充分充血,以方便采血操作。采血者用酒精棉球消毒翅靜脈窩區(qū)后即可進(jìn)針,稍稍將針頭輕插進(jìn)血管,輕拉話塞,注意觀察針筒內(nèi)有無(wú)血液被吸出,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有血液開(kāi)始被吸出時(shí),必須保持注射器位置不動(dòng),讓血液緩緩吸人注射器針筒內(nèi),達(dá)到所需的采血量后,助手用干棉球壓迫血管上的傷口約30秒止血。
壓迫翅膀根部靜脈血管時(shí),不能用力太大、壓得太緊,否則造成血管充血過(guò)分,針頭容易滑出血管。
進(jìn)針技巧要掌握好。為避免血液直接流出體外造成雞體失血過(guò)多,在距離靜脈窩大約0.3cm處,使針管與近心端血管的夾角為45。,進(jìn)針最好是將針頭的切口面向上,針頭輕挑起表皮,由表皮與肌肉之間的空隙,往血管的遠(yuǎn)心端方向推針前行至血管上面,再將針管與血管重疊成一條直線刺入血管。進(jìn)針不宜過(guò)深,如刺穿血管,皮下很快血腫,采血失敗。
要注意針頭方向。在采血中出血順暢,固定針頭不動(dòng),輕拉活塞抽血2mI左右。如果發(fā)現(xiàn)很快不出血,可將針頭左右旋轉(zhuǎn),同時(shí)輕拉活塞直到抽出血,防止血管壁吸住針頭,導(dǎo)致血流受阻。
翼下靜脈采血時(shí),抽血速度要保持緩慢,靜詠血管回血流速慢,內(nèi)壓突然降低易使血管壁接觸針尖而阻塞了針頭,影響采血。
若需要反復(fù)多次采血,應(yīng)自離心端開(kāi)始,以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。
翼下靜脈采血前一定要用酒精棉球消毒,酒精有擴(kuò)張血管作用。采血完畢,要用干棉球壓迫采血部位,不要用酒精棉球,因?yàn)榫凭珪?huì)引起溶血,造成血液凝固不良,不利于止血。
5、心臟采血法
雞心臟采血對(duì)心臟有損傷,也易傷及肺臟等其他臟器,引起內(nèi)臟出血,影響雞的生長(zhǎng)發(fā)育,甚至?xí)斐伤劳觯貏e是雛雞,常因針頭刺破心臟和肝臟導(dǎo)致出血過(guò)多而死。心臟采血雖然難度大,但是采血速度快、血量多、效率高,適宜于多量血液時(shí)使用。雞心臟采血有側(cè)臥法和仰臥法。
側(cè)臥采血法:助手右手抓住雞雙腿,左手握住兩翅膀,使雞右側(cè)臥,左側(cè)面向上,放在小桌子上。采血者自龍骨突起前緣引一直線到翅基,再由此中點(diǎn)向髓關(guān)節(jié)引一直線,此線前1/3和中1/3的交界出有一凹陷,即是心臟采血進(jìn)針部位。或者尋找由胸骨走向肩胛部的皮下大靜脈,心臟約在該靜脈的分支下側(cè),有時(shí)用食指觸摸可感覺(jué)到心臟跳動(dòng)。用酒精消毒后,以碘酊標(biāo)記采血部位。7#針頭刺入時(shí),如觸及胸骨可稍拔出,針頭向右偏一點(diǎn)避開(kāi)胸骨,再將針頭向里刺入,邊刺邊抽動(dòng)活塞,若剌人心臟,便有血液涌入注射器。術(shù)畢,局部消毒。
仰臥采血法:雞仰臥保定,雞頭部朝向采血者,并使頸部及兩腿伸展,拔去胸上部少許羽毛,用手指在胸骨上方,嗉囊下方摸得一凹窩,局部常規(guī)處理,右手持7#針,自胸骨上方凹窩斜向前下方心臟方向,與雞軀體成45。刺入,邊剌邊抽動(dòng)活塞,若刺入心臟,便有血液涌入注射器。術(shù)畢,局部消毒。雞仰臥采血應(yīng)在嗉囊空虛時(shí)進(jìn)行,較為方便。
四、雞采血時(shí)的注意事項(xiàng)
采血時(shí)做好現(xiàn)場(chǎng)記錄,規(guī)范填寫采血表格,包括雞場(chǎng)名稱、雞的品種、日齡、樣品數(shù)量、免疫情況等項(xiàng)目,每份樣品做好標(biāo)記,嚴(yán)防損失、混淆和污染。
采血量要根據(jù)檢測(cè)要求采取。樣品布點(diǎn)應(yīng)符合代表性、準(zhǔn)確性、合理性和科學(xué)性的原則,一般一個(gè)批次的雞群至少采集15份樣品。采集的樣品應(yīng)涉及不同的雞舍,同一雞舍的四個(gè)角落、中間位置都要采集血樣,這樣才具有說(shuō)服力。
采血留下的廢棄物,進(jìn)行集中焚燒或深埋等無(wú)害化處理。
五、血液樣品的保存與送檢
采集到血液后,應(yīng)立即將針頭拔掉,把注射器內(nèi)的血液沿著試管壁徐徐注入,不能有氣泡,也不能振蕩。逐一編號(hào),仔細(xì)核對(duì),傾斜放置。
血液樣品夏天在常溫下,冬天在25℃~37℃溫水中放置1h左Z右,即可析出血清,血清析出后需冷凍保存。
采集制作雞紅細(xì)胞懸液時(shí),5mI注射器里應(yīng)先放入2mL抗凝劑,抗凝劑用3.8g檸檬酸三鈉溶于100mL蒸餾水中即可。
血液樣品送檢時(shí),在保溫箱中加適量的冰塊防止血液變質(zhì),送檢過(guò)程中盡量防止劇烈振蕩。