羊胚胎移植是將良種母羊的早期胚胎取出,移植到同種的生理狀態相同的母羊體內,使之繼續發育成為新的個體。羊胚胎移植可極大地提高優秀種母羊的利用率,減少引種的外匯支出,同時可使種羊實現批量生產,便于飼養管理,提高成活率,降低生產成本。胚胎移植是系統復雜的生物工程,任何一個環節都直接影響胚胎移植效果。羊只進行胚胎移植的生理基礎是母羊發情后的生殖器官發育利于妊娠,無論配種與否,都為妊娠做好了準備。同時,早期胚胎處于游離狀態,加之受體對胚胎沒有排斥作用,可使移植的胚胎繼續發育。進行胚胎移植時,要遵循嚴格的技術原則,按照操作程序規范來進行。
胚胎移植原則
供體受體生殖環境的一致性
胚胎移植中必須要保證供體和受體環境相同或者相似,主要包括三個方面:第一,供體和受體屬于同一物種。一般來說,在分類學上親緣關系較遠的物種,由于胚胎結構、發育條件、發育進程等存在差異較大,這樣的兩個物種進行胚胎移植,大多數情況不能存活,或者是能夠存活很短時間。但是,可以利用這短暫的存活時間來臨時保存一下胚胎,比如,可將豬、牛、羊的早期胚胎移植到兔輸卵管內進行幾天的臨時保存。第二,供體受體生理同期化。這里所說的生理同期化是指供體受體羊的發情時間要保持一致,或者說兩者之間相差不超過24小時,否則移植難以成功。第三,供體和受體羊只胚胎移植的部位要一致,也就是說前后移植要遵循同一性的原則。換句話說,就是從供體子宮內收集到的月胚胎必須移植到受體子宮內,從供體輸卵管內收集到的胚胎必須移植到受體輸卵管內。這主要是因為發育中的胚胎對環境非常敏感。子宮在卵巢類固醇激素作用下,處于時刻變化的動態之中。
胚胎移植時間的適宜性
胚胎移植時間的選擇有著嚴格規定,一般要在黃體期早期以及胚胎移植之前進行,所以,對于胚胎的收集要嚴格控制在發情配種期后1周內的時間里,最好是在發情配種期后3天-4天進行收集。
胚胎本身正常性
在進行胚胎移植的時候,要對其進行仔細檢查,只有確保其發育正常,才可以進行移植。此外,在胚胎收集保存過程中,要盡量讓其免受物理、化學、生物等各方面影響,保證其完好性。
操作要點
選擇適宜的時間
要綜合考慮供體受體發情情況以及子宮與胚胎發育情況,選擇胚胎移植時間,只有這兩方面達到一致化,才可進行胚胎移植。因為供體羊只所提供的是超排卵,這樣單個卵細胞排出時間就存在較大的差異性。要綜合考慮上述兩方面因素。有經驗者完全可以根據黃體的表征來鑒定子宮發育情況。移植前,檢查受體羊只,詳細了解黃體發育情況,進而判斷是否可以進行胚胎移植。
受體羊只術前處理
胚胎移植之前,應該詳細檢查并確定受體羊只卵巢上的黃體是否發育良好。條件允許時,可組織受體羊進行腹腔鏡檢查,進一步確定黃體的數量、質量以及所處的位置,以保證移植開始后,不用再拉出卵巢進行檢查。此外,為了保證手術順利進行,在術前要讓受體羊只饑餓20小時左右,并于手術前將其毛發剃光,為接下來的手術做準備。
胚胎移植操作
目前,常用的胚胎移植方法主要有子宮移植和輸卵管移植兩種,子宮移植應先將胚胎移植到子宮角前1/3處,輸卵管移植應由傘部植入。在吸胚胎時,為了避免吸管在移動時丟失胚胎,可按照用吸管“吸入一段培養液、吸入一段小氣泡、吸取胚胎、吸入一段小氣泡、吸入一段培養液”的順序進行。
輸卵管法移植前使傘部的輸卵管處于較直的狀態,以便于移卵者能見到牽出的輸卵管部分處于輸管系膜的正上面,并能見到喇叭口的一側。此時,移卵者將移卵管前端插入輸卵管,然后緩緩加大移卵管內的壓力,把帶有胚胎的保存液輸入輸卵管內。移卵后要保持輸卵管內的指壓,抽出移卵管。若在輸卵管內放松指壓,移卵管內的負壓就會將輸卵管內的胚胎再吸出來。輸卵后還要再鏡檢移卵管,觀察是否還有胚胎的存在,若沒有,說明已移入。及時將器官復位,并做腹壁縫合。子宮移卵時,可以使用自制的移卵管。移卵時,將要移的胚胎吸入移卵管后,直接用鈍性導管插入母羊的子宮角腔,當移卵管進入子宮腔內時,會有插空的手感。此時,稍向移卵管內加壓,若移卵管已插入子官腔,移卵管內的液體會發生移動。若不能移動,需調整鈍性導管或移卵管的方向或深淺度,再行加壓,直至順利擠入液體為止。
注意事項
在胚胎移植的前期和后期,無論是供體羊還是受體羊都要保持均衡的營養水平和良好的體況,蛋白質飼料、能量飼料、礦物質飼料、維生素等要合理搭配,不要隨意提高或降低,防止飼喂腐敗變質的飼草飼料。還要注意防疫滅病和驅蟲。在胚胎移植進入日程后,不要隨意使用藥物(如抗菌藥物、抗寄生蟲類藥物、疫苗等),避免一些藥物對胚胎形成和發育造成影響。加強后期受體羊的飼養管理是提高受胎率的重要手段,特別是在舍飼的條件下,應滿足各階段營養,加強運動,嚴防擠壓碰撞。