豬感染某些傳染性疾病且耐過(guò)康復(fù)后,由于強(qiáng)烈的特異性免疫反應(yīng),使得血清中存在高水平的特異性抗體。將這些豬只采血并制備血清,對(duì)于某些以體液免疫為主的傳染性疾病的預(yù)防和治療是非常有效和經(jīng)濟(jì)的方法,尤其在一些重大疫病的緊急防控中具有不可替代的價(jià)值。
豬康復(fù)血清、高免血清療法均是在豬只接觸或暴露于病原后,利用其血清中的特異性抗體來(lái)防控同一疾病的方法。一般而言,康復(fù)血清多指豬只自然感染強(qiáng)毒且耐過(guò)后制得的血清,而高免血清則更多是用人工方法反復(fù)接種抗原而得到的血清。本文介紹了豬場(chǎng)內(nèi)部制備和使用康復(fù)血清的方法。作者認(rèn)為,在國(guó)家法規(guī)允許的情況之下,豬場(chǎng)使用內(nèi)部康復(fù)血清進(jìn)行疾病防控是正當(dāng)且必要的。
1. 準(zhǔn)備。在制備康復(fù)血清之前,應(yīng)按以下各項(xiàng)要求準(zhǔn)備:
1.1 豬只:選擇發(fā)病28天-2個(gè)月的母豬或肥豬,臨床檢查應(yīng)無(wú)其它疾病。
1.2 場(chǎng)地:清潔、通風(fēng)、通行便利的室內(nèi)或室外。面積不小于10平方米。場(chǎng)地應(yīng)布置一高度為60cm左右的平臺(tái),平臺(tái)以平放一頭200-300kg豬只為宜。平臺(tái)使用前1小時(shí),消毒藥噴灑。
1.3 人工:4-5名工人保定豬只、采血操作者2名。要求工人另外準(zhǔn)備一套干凈的工作服靴,待采血操作完畢后應(yīng)及時(shí)更換。
1.4 殺豬刀,保定器械(繩子、手套等)。事先皆經(jīng)過(guò)消毒處理。
1.5 容器:帶蓋的干凈塑料桶(或搪瓷容器)1-2個(gè),,用于盛放血液。要求容積不小于10L,使用前經(jīng)消毒處理,且使用生理鹽水洗刷3次。
1.6 生理鹽水:100ml、500ml各10-20瓶。要求在使用前將瓶蓋撬開(kāi),方便拔出橡膠塞。
1.7 干凈的漏斗(塑料或玻璃)2-3個(gè)。用前經(jīng)清洗消毒處理。
1.8 注射器(50ml、100ml)2-3支。用前經(jīng)清洗消毒處理。
1.9 恒溫水浴鍋。豬場(chǎng)做人工授精的水浴鍋即可。
1.10 其它:如毛剪、消毒水等。如果豬場(chǎng)采用頸動(dòng)脈放血,或還應(yīng)準(zhǔn)備離心機(jī)等。
2. 放血。
豬只可經(jīng)自然放血或頸動(dòng)脈放血(右圖),本文只介紹自然放血。
2.1 將合乎要求的康復(fù)豬放置在操作臺(tái)上,捆住四肢保定牢固。
2.2 頸部作剪毛和消毒處理(酒精棉球擦拭);殺豬刀消毒。
2.3 生理鹽水洗刷盛血容器一次,控干,蓋好蓋子。注意:少量剩余生理鹽水在容器內(nèi)無(wú)大礙,且有利于血清析出。
2.4 殺豬、放血至容器。
自然放血最大的問(wèn)題就是放血是否徹底。在實(shí)踐中,經(jīng)常出現(xiàn)豬只已死,血還沒(méi)有放完的情況,加之自然放血也很易收到污染,因此作者建議,有條件的應(yīng)盡量采取頸動(dòng)脈放血術(shù)實(shí)行放血。
3. 血清析出。
3.1 將盛血的容器靜置于室內(nèi),讓其自然凝固,析出血清。不可搖晃,以免溶血。
3.2 一般在秋冬季10-20℃環(huán)境下,3-4小時(shí)即可析出血清。
3.3 在血清析出過(guò)程中,可在中間檢查一次,若見(jiàn)血清上漂浮大塊血凝塊,則可用消毒手術(shù)刀輕輕劃動(dòng),讓血塊分散,以利血清更好析出。
3.4 不同情況下,豬只采血量和制得的血清量有差異。若放血完全,可參考表1得出血清量。
表1 不同豬只采血量和血清量參考值
4. 血清分裝。
4.1 血清完全析出后,將血凝塊撈出丟棄并妥善處理。
4.2 將容器內(nèi)的血清用注射器抽取后,或用漏斗直接分裝至空的生理鹽水瓶中。注意裝量不可太滿,一般以容量的80%為宜,即標(biāo)稱(chēng)500ml的實(shí)際裝400ml。
4.3 剩余血清若混有較多血細(xì)胞,仍可收集使用。如有離心機(jī),也可經(jīng)3000轉(zhuǎn)/分,經(jīng)3分鐘離心取上清液。
5. 血清水浴滅活;加入“雙抗”。
5.1 將水浴鍋加水調(diào)至56℃。水線以淹沒(méi)血清的最高水平線為宜。
5.2 血清置水浴鍋,經(jīng)30分鐘水浴。
5.3 將血清冷卻,加入“雙抗”。建議按照每400ml血清添加青霉素1,000萬(wàn)單位、鏈霉素300萬(wàn)單位。現(xiàn)在也有按照100ml血清添加2.5ml的5%恩諾沙星注射液的。二者皆可。
6. 血清保存。
血清可短暫存放于室內(nèi)或冷藏,也可較長(zhǎng)時(shí)間存放于冷凍環(huán)境下,在凍干條件下,甚至可長(zhǎng)期保存數(shù)年之久。豬場(chǎng)應(yīng)根據(jù)使用時(shí)機(jī),制定血清保存方案。
6.1 若在1-2日內(nèi)使用完,可直接放置于室溫下10-20℃遮光保存。
6.2 若在5-7日內(nèi)使用完,可在4℃條件下冷藏保存;
6.3 若在-21℃條件冷凍保存,則可保存數(shù)月甚至1年。注意冷凍后的血清解凍后需迅速用完,不可反復(fù)凍融。另血清凍結(jié)時(shí)要防止玻璃瓶?jī)隽选?/p>
7. 血清使用。
7.1 血清一般采用肌內(nèi)注射或皮下注射,按0.5-1.0ml/kg體重,每7-10日重復(fù)使用1次。
7.2 豬場(chǎng)可根據(jù)生產(chǎn)安排,在仔豬出生、1周齡、2周齡、斷奶、轉(zhuǎn)群等時(shí)機(jī)注射。
特別說(shuō)明:因個(gè)體差異等原因,不同批次血清的效果可能存在一定差異!