摘要：為探索豬群免疫豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對豬瘟免疫抗體水平的影響，本試驗(yàn)通過對某規(guī)模豬場進(jìn)行了為期1年的藍(lán)耳病抗體與豬瘟抗體水平監(jiān)測。試驗(yàn)結(jié)果表明豬藍(lán)耳病弱毒疫苗免疫后藍(lán)耳野毒感染率平均達(dá)到64%，藍(lán)耳抗體S/P平均值均已超過2.5，豬藍(lán)耳病弱毒疫苗免疫之后，豬瘟抗體陽性率平均值僅為77%，且抗體離散度平均值僅達(dá)到39，兩項(xiàng)指標(biāo)均較差，豬瘟抗體不合格。說明豬藍(lán)耳病弱毒苗不能對該場的藍(lán)耳病起到保護(hù)作用，不能有效的控制藍(lán)耳野毒感染;同時(shí)由于豬藍(lán)耳病弱毒苗的使用反而造成了豬瘟抗體水平的偏低。

關(guān)鍵詞：豬藍(lán)耳病弱毒疫苗 豬瘟 抗體 影響

豬藍(lán)耳病與豬瘟仍是我們養(yǎng)豬業(yè)最常見的2種病毒性疾病，在生產(chǎn)實(shí)踐中，豬藍(lán)耳病、豬瘟混合感染的情況也越來越多，同時(shí)2種疾病都有可能引起“豬高熱病綜合癥”，現(xiàn)已成為危害我國養(yǎng)豬業(yè)的最重要疾病，是疫病防控的重點(diǎn)。當(dāng)前，針對這2種疾病的防治主要是以疫苗免疫為主，但這2種疾病免疫時(shí)間較接近，且藍(lán)耳病病毒的感染可引起機(jī)體的免疫抑制。為探索豬藍(lán)耳病弱毒苗對豬瘟抗體水平的影響，對廣東某1600頭基礎(chǔ)母豬規(guī)模豬場進(jìn)行了為期1年的抗體水平監(jiān)測。了解其在免疫了豬藍(lán)耳病弱毒株JXA1-R后對豬瘟抗體水平的影響。

1試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)動物

廣東某1600頭基礎(chǔ)母豬群規(guī)模豬場，每次隨機(jī)抽取100份血清樣品檢測。

1.1.2檢測試劑

豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒、藍(lán)耳病抗體檢測ELISA試劑盒(均為美國IDEXX公司產(chǎn)品)。

1.1.3 主要試驗(yàn)儀器

微量加樣器;Elx800型酶標(biāo)儀。

1.1.4試驗(yàn)用疫苗 豬瘟弱毒疫苗(傳代細(xì)胞源);高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗(JXA1-R株)

1.2 試驗(yàn)方法

藍(lán)耳與豬瘟疫苗采用普免的方式：3個(gè)月1次，一年4次。全場公、母豬1月份、4月份、7月份和10月份的第一周免疫豬瘟弱毒疫苗2頭份，全場公、母豬2月份、5月份、8月份和11月份的第一周免疫藍(lán)耳弱毒疫苗JXA1-R株2頭份。小豬2周齡免疫藍(lán)耳弱毒苗1頭份，4周齡與9周齡分別免疫豬瘟疫苗1 頭份與2頭份。本試驗(yàn)從2012年的11月份首次全場免疫了藍(lán)耳弱毒疫苗后，2013年的1月份、4月份、7月份和10月份的25號檢測藍(lán)耳與豬瘟抗體水平，對豬場內(nèi)的30頭公豬全部進(jìn)行采血檢測，經(jīng)產(chǎn)母豬隨機(jī)抽取100頭進(jìn)行檢測，7周齡與12周齡小豬隨機(jī)抽取50頭進(jìn)行檢測。2013年該豬場重胎母豬出現(xiàn)流產(chǎn)比例達(dá)到8%，產(chǎn)出的胎兒中死胎比例達(dá)到12%，保育豬消瘦，咳嗽，死亡率達(dá)到15%。

1.3 ELISA試驗(yàn)方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)

ELISA試驗(yàn)方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)，參照IDEXX公司試劑盒的說明和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。豬瘟抗體ELISA試驗(yàn)成立條件是：陰性對照的平均OD450值>0.5，陽性對照的阻斷率>50%。判斷標(biāo)準(zhǔn)：阻斷率<40 40="" 50="">50%為陽性值。藍(lán)耳抗體檢測(IDEXX)ELISA 的S/P比例：S/P < 0.4 陰性;0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 弱毒疫苗感染，產(chǎn)生抗體;S/P>2.5 野毒感染，產(chǎn)生抗體。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，將統(tǒng)計(jì)結(jié)果以“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，并進(jìn)行方差分析和采用LSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果

2.1 從圖1可知，0.4 ≤ S/P ≤ 2.5 為藍(lán)耳弱毒疫苗感染所產(chǎn)生的抗體;S/P>2.5為藍(lán)耳野毒感染所產(chǎn)生的抗體。公豬藍(lán)耳抗體陽性率達(dá)到94%，野毒感染比例達(dá)到63%;經(jīng)產(chǎn)母豬藍(lán)耳抗體陽性率達(dá)到95%，野毒感染比例達(dá)到61%;7周齡與12周齡小豬藍(lán)耳抗體陽性率達(dá)到99%，野毒感染比例達(dá)到70%。由圖2可知，公豬藍(lán)耳抗體離散度為52%，抗體平均值為2.82;經(jīng)產(chǎn)母豬藍(lán)耳抗體離散度為47%，抗體平均值為2.85;7周齡與12周齡小豬藍(lán)耳抗體離散度為43%，抗體平均值為2.99。結(jié)果表明，所有豬均藍(lán)耳野毒感染明顯，藍(lán)耳弱毒苗對該豬場的藍(lán)耳病不能起到保護(hù)作用。

2.2 由圖3可知，豬瘟抗體阻斷率>50%為陽性值。公豬豬瘟抗體陽性率達(dá)到44%;經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體陽性率達(dá)到52.7%;7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體陽性率達(dá)到57.5%。由圖4可知，公豬豬瘟抗體離散度為37%，抗體平均值為53.2%;經(jīng)產(chǎn)母豬豬瘟抗體離散度為37%，抗體平均值為51.8%;7周齡與12周齡小豬豬瘟抗體離散度為42.5%，抗體平均值為55.2%。結(jié)果表明，整個(gè)豬場的豬瘟抗體水平偏低，離散度不夠理想，對整個(gè)豬群的豬瘟保護(hù)率不高。

3 討論

豬藍(lán)耳病弱毒疫苗對豬瘟免疫抗體的影響通過對本試驗(yàn)的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫后藍(lán)耳野毒感染率高達(dá)64%，藍(lán)耳抗體S/P平均值均已超過2.5 ，表明該豬場藍(lán)耳病病毒較活躍，已經(jīng)感染了藍(lán)耳野毒，說明該疫苗不能有效的控制藍(lán)耳病。豬瘟抗體陽性率平均值僅為77%，且抗體離散度平均值僅達(dá)到 39%，2項(xiàng)指標(biāo)均較差，說明豬瘟抗體不合格。因此，我們可以得知高致病性豬藍(lán)耳病弱毒疫苗(JX-A1-R株)免疫對豬瘟細(xì)胞苗免疫產(chǎn)生明顯的干擾或抑制作用。這與張鳳華等[1]報(bào)道免疫豬藍(lán)耳病弱毒苗對豬瘟免疫效果產(chǎn)生明顯的干擾作用基本一致。這很有可能與藍(lán)耳病病毒的發(fā)病機(jī)理有較大關(guān)系，藍(lán)耳病病毒在復(fù)制時(shí)與肺泡巨噬細(xì)胞的受體結(jié)合，直接導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞的碎裂溶解，延緩了肺泡巨噬細(xì)胞對抗原處理和遞呈作用，從而導(dǎo)致宿主發(fā)生免疫調(diào)節(jié)紊亂[2]。同時(shí)藍(lán)耳病病毒作用于免疫系統(tǒng)的T淋巴細(xì)胞，造成T淋巴細(xì)胞各亞群的比例下降[3]，從而抑制了機(jī)體對其他病原體的免疫反應(yīng)。同時(shí)藍(lán)耳病病毒還具有“抗體依賴性增強(qiáng)作用”，又對豬瘟弱毒疫苗的免疫抗體產(chǎn)生有抑制作用，由此可見藍(lán)耳病弱毒疫苗免疫是一把雙刃劍，有利有弊。據(jù)杜喜忠等[4]報(bào)道，2種疫苗免疫間隔時(shí)間7d，仍然有明顯干擾作用。因此，豬場應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)際情況來決定是否免疫藍(lán)耳弱毒苗。在2013年的李曼世界養(yǎng)豬大會上，工程院院士楊漢春教授就明確指出我們應(yīng)少用藍(lán)耳弱毒苗，更加不能使用不同毒株的藍(lán)耳弱毒苗(藍(lán)耳病病毒易發(fā)生變異重組)，而應(yīng)采用凈化的方式來控制藍(lán)耳病。現(xiàn)在這一觀點(diǎn)已得到絕大多數(shù)專家、學(xué)者以及規(guī)模養(yǎng)豬場管理者的認(rèn)可。