為了弄清豬瘟免疫失敗的原因,以制定科學(xué)的免疫程序,達(dá)到預(yù)防豬瘟的目的,筆者對豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)對豬瘟免疫效果的影響進(jìn)行了試驗研究,現(xiàn)報告如下。
1、方法與步驟
1.l 試驗豬場豬瘟的免疫程序 仔豬出生后吮吸母乳之前用豬瘟兔化弱毒疫苗進(jìn)行超前免疫一次,每豬1頭份,60日齡加強(qiáng)免疫一次,每豬2-3頭份;種公豬、種母豬每年春秋各免疫一次,每豬2-3頭份。
1.2 豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)的測定從浙江省金華、江山選擇有代表性的豬場三個,每個豬場抽樣采血100頭,用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)對豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)進(jìn)行血清學(xué)測定。判斷標(biāo)準(zhǔn),用分光光度計法,以O(shè)PD作供氫體,用490nm波長檢測樣品的OD值,并與陰性對照的OD值 (P/N)比較,如OD值≥2時判為陽性,否則為陰性。
1.3 豬瘟抗體水平的測定 先對不同豬場的各類豬利用正向血凝診斷液(產(chǎn)于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所綜防技術(shù)研究組)進(jìn)行正向間接血凝試驗,以測定豬瘟抗體水平;對豬瘟抗體陰性的豬只用豬瘟兔化弱毒疫苗加強(qiáng)免疫—次,每豬2-3頭份;加強(qiáng)免疫1周左右,同樣用正向間接血凝試驗測定豬瘟抗體水平。判斷標(biāo)準(zhǔn),將血凝板放在白紙上,先觀察陰性對照血清1∶16孔,稀釋須對照孔均應(yīng)無凝集(血球全部沉入孔底形成邊緣整齊的小圓點)或僅出現(xiàn)“+”凝集(血球大部沉于孔底,邊緣稍有少量血球懸浮);陽性血清對照1∶2-1∶256,各孔應(yīng)出現(xiàn)“+ + -+ + + +”凝集為合格(少量血球沉入孔底,大部血球懸浮于孔內(nèi));在對照孔合格的前提下,再觀察待檢血清各孔,以出現(xiàn)“+ +”凝集的最大稀釋倍數(shù)為該份血清的抗體效價;若豬瘟抗體效價達(dá)到1∶16以上為陽性,1∶8為弱陽性,1∶8以下為陰性。
2、結(jié)果與討論
2.1 不同豬場繁殖呼吸綜合征血清學(xué)測定結(jié)果見表1。從表1可以看出,三個豬場繁殖呼吸綜合征的陽性率分別是72%、58%、88%。近年來浙江省很多豬場傳染了豬繁殖與呼吸綜合征,給豬場造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失,應(yīng)引起有關(guān)部門的高度重視。為了預(yù)防和控制PRRS的傳播,各規(guī)模豬場都應(yīng)進(jìn)行PRRS的免疫接種,以提高豬群的免疫力。
2.2 從表2可以看出,三個豬場PRRS陽性豬中,豬瘟抗體陽性(滴度在1∶16以上)的比率分別是8%、12.2%、14.3%,而PRRS陰性豬其豬瘟抗體陽性率較高(分別是82.1%、66.7%、58.3%)。結(jié)果表明豬繁殖與呼吸綜合征可能對機(jī)體抗豬瘟免疫細(xì)胞的增殖有一定的抑制作用,會導(dǎo)致機(jī)體抗豬瘟免疫細(xì)胞減少,從而影響機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng),這可能是造成免疫豬群豬瘟抗體陽性率低的主要原因(有待于今后進(jìn)一步證實)。
2.3 從表3可以看出,在三個豬場PRRS陽性豬中,對豬瘟抗體陰性的豬加強(qiáng)免疫后,其陽性率(1∶16以上抗體滴度)分別為81.8%、76.2%、55.9%,說明對已知PRRS為陽性的豬群加強(qiáng)免疫可明顯提高豬瘟抗體水平。
3、小結(jié)
根據(jù)本次研究結(jié)果,筆者認(rèn)為豬繁殖與呼吸綜合征會干擾豬瘟的免疫效果,因此對規(guī)模豬場有必要定期進(jìn)行抗體水平監(jiān)測,及時調(diào)整免疫程序,特別是PRRS陽性豬應(yīng)用豬瘟兔化弱毒疫苗加強(qiáng)免疫一次,以確保豬群有較高的抗體水平。