國家三類新獸藥復合亞氯酸鈉粉

胡金花1   孫清蓮2王成龍3 馬振良4

新鄉市康大消毒劑有限公司1  新鄉動物衛生疾病預防控中心2

新鄉市畜產品質量監測檢驗中心3 獲嘉縣農牧局4

復合亞氯酸鈉粉為亞氯酸鈉、酸及穩定劑等配制而成，2015年通過農業部審批獲得國家三類新獸藥證書（2015新獸藥證字15號）。

本品屬強氧化劑。加水活化后產生二氧化氯，能殺滅細菌、真菌和病毒等微生物，并能氧化水體中的亞價態物質及有機質達到改善水質的目的。

一、主要成分及其作用

本品為亞氯酸鈉、酸及穩定劑等配制而成，在酸的活化作用下，亞氯酸鈉在水溶液中發生歧化反應釋放CLO2，含量按二氧化氯計算4.5%，由于在配方中添加了穩定劑，使產品在貯存過程中安全、穩定。

二、復合亞氯酸鈉粉的產品特點

1.穩定性

新鄉市康大消毒劑有限公司的固體二氧化氯屬于一元包裝，在有穩定劑的保護下在特定工藝下，將亞氯酸鈉和酸混合，存放和運輸中安全。

2.攜帶、使用方便

在使用時打開包裝即可直接使用，臨用時加水配制、活化，簡便快捷，便于隨身攜帶，有利于長途運輸與貯存，消除了二元包裝帶來的不安全因素及給用戶帶來的不便，給用戶帶來了更大的方便性、實用性。

3.獸藥質量新標準使復合亞氯酸鈉粉的檢測更科學

特別在質量標準的建立上，突破了復合亞氯酸鈉粉活化后產生二氧化氯含量控制標準難以建立的難題，該標準集國家發布的二氧化氯固體釋放劑的標準精髓，分析檢測時利用產品加水活化后產生的二氧化氯與碘化鉀和硫酸反應生成碘,根據其反應生成的碘與硫代硫酸鈉定量反應，來定量測定二氧化氯的含量，結合產品特點，經過反復驗證，得出了適合本產品的檢驗方法，檢測技術和質量控制手段在行業內具有先進性。該標準獲得中國獸藥監察所復核，成為該產品的國家法定標準。

三、作用研究

（一）復合亞氯酸鈉粉對H5N1亞型和H9N2亞型禽流感病毒的殺滅效果的臨床試驗

1.復合亞氯酸鈉粉消毒劑對雞胚的毒性試驗

將復合亞氯酸鈉粉按1:10的質量體積比，稱取消毒劑，加入無菌生理鹽水中，混勻后靜置30分鐘活化和稀釋，以質量體積比1:10、1:20、1:40、1:80、1:100、1:1000倍稀釋的復合亞氯酸鈉粉消毒液分別接種10日齡SPF雞胚，每個稀釋度接種5枚雞胚（0.1mL/胚），將接種的雞胚置37℃溫箱中培養96小時。24小時以內死亡的雞胚去掉，記錄雞胚死亡情況。

2.復合亞氯酸鈉粉消毒劑對病毒的殺滅率試驗

配制108.25EID50/0.1mL H5N1亞型禽流感病毒懸液和108.5EID50/0.1mL H9N2亞型禽流感病毒懸液，分別與質量體積比為1:200、1:400、1:500、1:600、1:700、1:800、1:1000、1:2000倍稀釋的復合亞氯酸鈉粉消毒劑，按病毒液與消毒劑體積1:9混合，在20±1℃條件下作用10分鐘后，與0.1M的硫代硫酸鈉－生理鹽水溶液作用，再用滅菌生理鹽水做10倍遞進稀釋，做8個稀釋度，每個稀釋度接種5枚雞胚（0.1mL/胚）。陰性對照組用滅菌生理鹽水代替復合亞氯酸鈉粉消毒液，同法處理；稀釋液接種10日齡SPF雞胚，每個稀釋度接種5枚雞胚（0.1mL/胚）。將接種的雞胚置37℃溫箱中培養，記錄雞胚死亡情況。24小時以內死亡的雞胚去掉，24小時以后的死胚及時取出，至96小時全部取出，逐個取尿囊液做血凝(HA)試驗，血凝陽性者判為雞胚感染。

按照雞胚感染的結果，按下列方程式計算試驗組和對照組雞胚感染的陽性率、樣本含EID50與殺滅率。陽性率=血凝陽性雞胚數/接種雞胚數；樣本含EID50量的對數=L-d(S-0.5)(L為最低稀釋倍數的對數；d為稀釋度間對數的差；S為各稀釋列陽性率之和。

病毒殺滅率=（對照樣本含EID50量-試驗樣本EID50量）/對照樣本含EID50量×100%

3. 結果

復合亞氯酸鈉粉消毒劑對雞胚的毒性試驗

由表1可知，將復合亞氯酸鈉粉按1:10的質量體積比，稱取消毒劑，加入無菌生理鹽水中，混勻后靜置30分鐘活化、稀釋，按照質量體積比1:10、1:20、1:40、1:80、1:100、1:1000倍稀釋的復合亞氯酸鈉粉消毒劑分別接種10日齡雞胚，每個稀釋度5枚雞胚（0.1mL/胚），試驗結果顯示該消毒劑1:40以上稀釋時對雞胚無致病性。

表1 復合亞氯酸鈉粉消毒劑對雞胚的毒性試驗

復合亞氯酸鈉粉消毒劑的不同稀釋倍數

1:10     1:20     1:40     1:80     1:100     1:1000

雞胚死亡情況(枚)    5/5       1/5      0/5      0/5      0/5        0/5

注：分子為死亡胚數，分母為接胚數

復合亞氯酸鈉粉消毒劑對禽流感病毒的殺滅作用

將質量體積比1:200、1:400、1:500、1:600、1:700、1:800、1:1000、1:2000倍稀釋的復合亞氯酸鈉粉消毒劑，分別與108.25EID50/0.1mL的H5亞型禽流感病毒懸液和108.5EID50/0.1mL H9亞型禽流感病毒(9:1)作用10分鐘，不同稀釋濃度的復合亞氯酸鈉粉消毒劑殺滅病毒率結果見表2。

表2. 復合亞氯酸鈉粉消毒劑對H5N1亞型和H9N2亞型禽流感病毒的殺滅率

不同濃度的復合亞氯酸鈉粉消毒劑

1:200    1:400    1:500    1:600    1:700   1:800   1:1000   1:2000

對H5亞型病毒殺滅率  100%     100%     100%     100%     99.9%   99.99%  96.84%   82.22%

對H9亞型病毒殺滅率  100%      100%    100%     100%     100%    99.99%  99.99%   99.90%

4. 結論

采用Klein-Defors懸浮殺滅與感染試驗方法，將復合亞氯酸鈉粉消毒劑在不同稀釋度下，分別與H5N1亞型禽流感病毒和H9N2亞型禽流感病毒（9:1）體外直接作用，以此檢測復合亞氯酸鈉粉消毒劑體外對禽流感病毒的殺滅效果。檢測結果表明，與禽流感病毒作用10分鐘后，1:200倍（即1升水中含有5克固體粉末狀消毒劑）至1:600倍（即6升水中含有10克固體粉末狀消毒劑）稀釋的復合亞氯酸鈉粉消毒劑對禽流感病毒的殺滅率為100%，有完全的殺滅病毒作用。

（二）復合亞氯酸鈉粉消毒劑對口蹄疫病毒的殺滅效果的臨床試驗

1.病毒的制備和稀釋

O型口蹄疫乳鼠組織毒（LD=10-8.0），用滅菌0.04mol/l的磷酸鹽緩沖液（PH7.6）稀釋成1：500倍病毒懸液，備用。

2.試驗動物

日齡吮乳小白鼠（乳鼠），由中國農業科學院蘭州獸醫研究所實驗動物場提供。

3.試驗方法

安全性試驗   用去離子水將復合亞氯酸鈉粉消毒劑1：50、1：100、1：200倍稀釋，分別注射4日齡乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml消毒液稀釋液，每組注射5只；設陰性對照，陰性對照每組5只乳豬，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml滅菌去離子水。注射后連續觀察72小時。每組試驗重復4次。

殺滅口蹄疫病毒效果的試驗   用滅菌去離子水將復合亞氯酸鈉粉消毒劑做1：150、1：200、1：300、1：400、1：500稀釋，分別與1：500倍稀釋的口蹄疫病毒等量混合，室溫作用30min后，注射4日齡乳鼠，每組注射5只，每只乳鼠背部皮下注射病毒-消毒液混合液0.2ml；設病毒對照（陽性對照），病毒對照每組5只乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml1：1000倍稀釋的病毒液；設健康對照（空白），健康對照每組5只乳鼠，每只乳鼠背部皮下注射0.2ml去離子水。注射后連續觀察7天。每組試驗重復5次。

4.判定標準

安全性判定標準：乳鼠不死亡或無不良反應，判為安全，反之為不安全。

殺滅病毒效果判定標準    病毒對照組乳鼠在接種病毒后發病死亡，并從乳鼠體內檢測到口蹄疫病毒，試驗成立；試驗組乳鼠在觀察期間無異常表現，全部健活，判定消毒劑有效；試驗組有乳鼠死亡，并從乳鼠體內檢測到口蹄疫病毒，判定該濃度下消毒劑無效。

5.試驗結果

復合亞氯酸鈉粉消毒劑在1：50倍及以上稀釋時，對實驗動物安全。結果見表3。

表3：消毒劑對動物的安全性測定

消毒劑           接種乳鼠數（只）             死亡比例                   結果判定

濃  度                                 （死亡數/試驗動物總數）

1：50                20                        0/20                        安全

1：100               20                        0/20                        安全

1：200               20                        0/20                        安全

陰性對照             20                        0/20                        對照成立

復合亞氯酸鈉粉消毒劑對口蹄疫病毒殺滅效果測定，結果見表4。

表4：消毒劑對口蹄疫病毒殺滅效果的測定

消毒溫度        消毒劑       接種乳鼠數（只）          死亡比例           效果判定

作用時間        終濃度                          （死亡數/試驗動物總數）

1：300           25                      0/25               有效

1：400           25                      0/25               有效

1：600           25                      0/25               有效

16-25℃        1：800           25                      20/25              無效

1：1000          25                      25/25              無效

陽性對照         25                      25/25             對照成立

健康對照         25                      0/25              對照成立

6.試驗結論

由此得出，復合亞氯酸鈉粉消毒劑能殺滅口蹄疫病毒。復合亞氯酸鈉粉消毒劑100%殺滅口蹄疫病毒最高稀釋度為1：600。

（三）復合亞氯酸鈉粉現場消毒試驗

自然菌表面現場消毒試驗

1.驗場地要求   消毒試驗需分別在一個月內未使用過任何消毒劑的兩個畜禽飼養場的兩個以上動物圈舍進行，圈舍面積平均不小于50m2。消毒前對畜禽圈舍地面以自來水進行沖洗，1小時后進入正式試驗階段。

2.試驗分組    消毒劑試驗組：設高、中(最低有效殺菌濃度)、低三個濃度試驗組。 消毒劑對照組：選擇二氯異氰脲酸鈉為對照消毒劑，按推薦使用濃度消毒，同時進行殺菌效力對比試驗。空白試驗組：不施消毒劑試驗組。

3.采樣方法

消毒前與消毒后一小時內的三個時相點分別在畜禽圈舍地面、墻壁、飲水器、食槽等不同部位采樣，取樣時將棉拭子用中和劑浸潤后，在面積為5×5cm2的地面或其他物體表面橫直各用力擦拭10次，并不斷轉換拭子擦拭面，將拭子棉花端剪入采樣液內用力振搖100次，將菌洗脫，洗液以生理鹽水稀釋，在瓊脂平皿中培養作活菌計數。

4.結果分析

殺菌率計算：殺菌率=（消毒前活菌數－消毒后活菌數）/消毒前活菌數 ×100%

5. 結果

復合亞氯酸鈉粉對圈舍不同部位細菌的殺菌率   當作用時間為60min，使用濃度為1:1000的復合亞氯酸鈉粉的對飲水器、食槽、地面、墻壁的殺菌率分別為51.43%、87.74%、95.73%；使用濃度為1：500、1：250時的復合亞氯酸鈉粉消毒劑對圈舍現場消毒的殺菌效果以及二氯異氰脲酸鈉的現場消毒效果見表5和表6。

表5不同濃度復合亞氯酸鈉粉對圈舍不同部位細菌的殺菌率（單位：%）

表6 不同濃度二氯異氰脲酸鈉對圈舍不同部位細菌的殺菌率（單位：%）

當復合亞氯酸鈉粉消毒劑使用濃度為1：500，作用時間為60min時，復合亞氯酸鈉粉消毒劑對圈舍的飲水器、食槽、地面、墻壁的細菌殺滅率達到70%以上。復合亞氯酸鈉粉消毒劑使用濃度為1:250，作用時間為60min時，復合亞氯酸鈉粉消毒劑對圈舍的飲水器、食槽、地面、墻壁的細菌殺滅率達到80%以上。二氯異氰脲酸鈉消毒劑也有類似的殺菌效果。

新鄉市康大消毒劑有限公司還研究了復合亞氯酸鈉粉消毒劑對幾種病原菌的殺滅效果試驗，結果顯示：當室溫20℃，復合亞氯酸鈉粉消毒劑實際使用濃度為1:500，消毒劑作用時間為20min時，該消毒劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌四種測試致病菌，殺菌率達到100%。

（四）在水產養殖方面的應用研究

1.復合亞氯酸鈉粉對水產養殖動物幾種主要病原菌：柱狀嗜纖維菌、嗜水氣單胞菌、遲緩愛德華氏菌、鰻弧菌的殺滅效果是很好的。當水溫20℃、消毒作用時間為20min時，0.2mg/L的復合亞氯酸鈉粉即可殺滅80%的嗜水氣單胞菌、柱狀黃桿菌、遲緩愛德華氏菌和鰻弧菌，全部殺滅細菌的濃度在1.6mg/L-3.13mg/L；在水溫20℃，水體PH6.5-8.5、色度0-50度的范圍內，2.0mg/L的復合亞氯酸鈉粉作用10min即可全部殺滅水中的嗜水氣單胞菌、柱狀黃桿菌、遲緩愛德華氏菌和鰻弧菌。在10-30℃水溫條件下時，2.0mg/L的復合亞氯酸鈉粉作用10min即可全部殺滅水中的嗜水氣單胞菌、柱狀黃桿菌、遲緩愛德華氏菌和鰻弧菌。

2.毒理研究

在水產養殖中進行水體消毒時, 復合亞氯酸鈉粉的使用濃度0.2mg/L會引起水體枝角類（裸腹溞、隆線溞，蚤狀溞和大型溞）的死亡。草魚、鰱、鳙、鯽魚苗，克氏原螯蝦、日本沼蝦蝦苗對復合亞氯酸

鈉粉的安全濃度在2.93mg/L -7.42mg/L、魚苗、魚種進行浸泡消毒時，使用濃度為0.8g-1.6g/m3，各種魚類、蝦的使用濃度為0.20g-0.30g/m3，魚苗和蝦苗是安全的。

四、復合亞氯酸鈉粉的正確應用

按照下表中用途計算用量，配制溶液時，先將10倍藥品重量的水稱量于容器中，再將藥品緩緩倒入水中，攪拌溶解均勻，靜置活化30分鐘，待溶液變成深黃色，加水稀釋至使用濃度。用于養殖水體和魚蝦時將活化后溶液加水稀釋2000倍后全池均勻潑灑；用于畜禽圈舍及器具時將活化后溶液按下表中說明加水至稀釋濃度即可（表中用量均以本品計）。

*根據魚體的反應靈活掌控浸泡時間。

五、注意事項

1.禁止將藥品先放入容器中，再將水倒入容器內。

2. 避免與強還原劑和酸接觸；不得使用金屬器具配制或盛放溶液。

3.包裝破損嚴禁貯運。勿與酸性物共貯共運，勿受潮。

4.本品應現配現用，開啟后的包裝應安全存放，以免造成人、畜誤服。

5.使用后的廢棄包裝勿亂扔，要妥善處理。

6.在水產養殖中進行水體消毒時,本品對水環境有一定影響，應嚴格按說明書中用法用量使用。

7.不可與其他消毒劑混合使用。