雞白痢是由雞白痢沙門菌引起的急性敗血性傳染病，主要侵害雛雞，以白痢、衰竭和敗血癥過程為特征，常導(dǎo)致大批死亡…。成年雞感染后多呈慢性經(jīng)過或不顯癥狀，但帶菌可垂直傳播給下一代或通過生殖道污染禽蛋而造成種蛋的孵化率降低。目前，我國部分蛋雞場雞白痢沙門菌陽性率較高，蛋雞沙門菌凈化存在的主要問題有：缺乏快速、準(zhǔn)確的病原和抗體檢測技術(shù)；蛋種雞凈化不徹底，造成商品蛋雞中感染逐代放大；飼料、飲水、飼養(yǎng)環(huán)境中沙門菌污染。我國養(yǎng)禽業(yè)雞白痢沙門菌病的凈化已開展了幾十年，但由于工作的持續(xù)性、嚴(yán)格性均存在較大不足，國家也尚未制定相應(yīng)的凈化標(biāo)準(zhǔn)，迄今為止尚未有種禽公司(除從國外已凈化公司完全引進(jìn)祖代或者父母代的之外)宣布已達(dá)到完全凈化的標(biāo)準(zhǔn)。同時，韋平課題組在對養(yǎng)雞一條龍集團(tuán)公司的跟蹤檢測發(fā)現(xiàn)，病原一直在種雞群體內(nèi)循環(huán)感染。因此，種群凈化是防控該病的重要途徑。

針對這些產(chǎn)業(yè)問題，國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系進(jìn)行了蛋雞沙門菌凈化技術(shù)的研究和示范，并將6此列為國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系重點(diǎn)任務(wù)，其中包括蛋雞和蛋品中沙門菌抗原和抗體快速檢測平臺技術(shù)和蛋種雞群沙門菌的檢疫凈化控制技術(shù)，研制沙門菌快速檢測試劑盒，應(yīng)用建立的沙門菌病原和抗體快速檢測平臺，對蛋種雞、商品蛋雞進(jìn)行全面的檢疫，淘汰沙門菌陽性雞和陽性種蛋，每個雞群經(jīng)過2—4次檢疫凈化，培育無雞白痢和腸炎沙門菌感染的雞群。

1 雞白痢沙門菌的檢測方法

對種雞場采取定期檢疫、淘汰帶菌雞同時結(jié)合生物安全措施，是目前控制和凈化此病的最有效措施。從樣品中分離鑒定出雞白痢沙門菌是診斷雞白痢較為可靠的方法。除此以外，應(yīng)用較為廣泛的主要有血清學(xué)方法和分子生物學(xué)方法。

1．1血清學(xué)方法

血清學(xué)試驗(yàn)是確定雞群感染和流行情況的常規(guī)方法。全血平板凝集試驗(yàn)(PAT)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGPT)n3、間接血凝試驗(yàn)(PHA)[8 3等方法在國內(nèi)應(yīng)用較多。OIE認(rèn)為用脂多糖(LPS)作為包被抗原，是測定雞群中雞白痢、雞傷寒沙門菌感染最特異的方法。

蔣維維等提出，PAT效率較血清平板凝集試驗(yàn)(SAT)高，但檢出率不如后者。實(shí)踐中還要綜合考慮采血環(huán)節(jié)中技術(shù)人員的熟練程度、雞的生理、器械的好壞、組員間的配合等因素，選擇合適的檢測技術(shù)。

曹春梅等引用膠體金標(biāo)記雞傷寒沙門菌LPS抗原，建立了一種抗原夾心法快速檢測雞白痢、雞傷寒沙門菌抗體的斑點(diǎn)免疫金滲濾法(DIGFA)。與PAT相比，DIGFA具有靈敏度更高、早檢測到抗體、陽性樣品抗體滴度更高、準(zhǔn)確性更強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)。徐耀輝等…j以辣根過氧化物酶標(biāo)記的沙門菌O，單克隆抗體3—47—0與包被的雞白痢沙門菌脂多糖抗原，建立了一種抗體阻斷ELISA以檢測雞白痢和雞傷寒沙門菌感染。該方法具有很強(qiáng)的區(qū)分能力。在人工感染試驗(yàn)中，從第2周開始，該方法能從全部雞只中檢測到特異性抗體，比全血平板凝集試驗(yàn)(PAT)早1周時間，特異性和敏感性也更高。此外，該方法也能檢測出與雞白痢和雞傷寒沙門菌有共同抗原的沙門菌感染產(chǎn)生的抗體。

1．2分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)診斷技術(shù)以其更高的特異性和靈敏性在雞白痢沙門菌病診斷上的應(yīng)用越來越多。根據(jù)雞白痢沙門菌與雞傷寒沙門菌的帕5基因在第237和598位堿基的不同，耿士忠等設(shè)計和合成了等位基因特異性PCR引物，建立了快速檢測雞白痢沙門菌的PCR方法，該P(yáng)CR方法能夠特異性地鑒定雞白痢沙門菌，檢測靈敏度達(dá)100Pg DNA，與常規(guī)檢測方法符合率為94．3％。薛俊龍等[1引用雞白痢沙門菌／tic基因序列建立特異性PCR診斷方法，此PCR體系能檢出50 pg以上的細(xì)菌DNA，陽性檢出率和敏感性均高于常規(guī)檢測方法。李求春[141從雞白痢沙門菌中克隆了大小為840 bp的ipaJ基因序列，并獲得了體外原核表達(dá)的大小為37 ku融合蛋白，該蛋白可與雞白痢沙門菌陽性血清反應(yīng)。對105株雞白痢沙門菌菌株的PCR檢測結(jié)果顯示，所有的菌株都能擴(kuò)增出ipaJ基因，該基因廣泛存在于雞白痢沙門菌菌株中，具有免疫原性。

同時，近兩年王紅寧課題組建立了多重PCR技術(shù)檢測腸炎沙門菌、雞白痢沙門菌和傷寒沙門菌的方法，沙門菌LAMP快速檢測方法和一種沙門菌特異性免疫磁珠一多重PCR快速檢測方法等。其中多重PCR檢測技術(shù)重點(diǎn)優(yōu)化擴(kuò)增所用的Extag酶，降低了PCR的檢測限，提高反應(yīng)的靈敏度，比其他Tag酶具備更高的穩(wěn)定性。該方法的建立，縮短了樣品檢測時間(8～16 h)，可重復(fù)性強(qiáng)(4次試驗(yàn)重復(fù)率大99％)，準(zhǔn)確率高。沙門菌LAMP快速檢測方法主要是在反應(yīng)前體系中加人優(yōu)化配置的鈣黃綠素——MnCl：溶液作為指示劑，反應(yīng)后可根據(jù)顏色變化肉眼判定結(jié)果，避免了反應(yīng)后開蓋判定帶來的假陽性干擾。

沙門菌特異性免疫磁珠——多重PCR通過針對沙門菌外膜蛋白基因OmpC設(shè)計引物，進(jìn)行該基因的擴(kuò)增、克隆和表達(dá)，之后將純化的蛋白作為抗原免疫新西蘭兔，制備沙門菌特異性抗體并包被磁珠載體，構(gòu)建沙門菌特異性免疫磁珠，將免疫磁珠同多重PCR相結(jié)合，并對方法進(jìn)行靈敏性試驗(yàn)、特異性試驗(yàn)，建立了一種快速檢測方法。這一方法的靈敏度比普通PCR方法高10倍，而且免疫磁珠能夠?qū)悠分械纳抽T菌進(jìn)行濃縮富集，能夠代替沙門菌繁瑣的增菌過程，節(jié)約檢測時間42—48 h。

2雞白痢的傳播方式和主要污染源

雞白痢的傳播方式較多，病雞、帶菌雞是主要的傳染源，通過帶菌蛋傳播是最常見的傳播途徑。帶菌蛋有的是從帶菌雞所產(chǎn)的蛋而來，有的是健康蛋殼污染病菌而成為感染蛋。染菌蛋孵化會形成死胚或孵出病雛雞。病雛雞含有的大量病菌通過污染飼料、飲水、孵化器、育雛器等再次進(jìn)行傳播。與病雛雞共同飼養(yǎng)的健康雛雞可通過消化道，有時經(jīng)呼吸道或眼結(jié)膜而受感染，被感染的雛雞大部分死亡。耐過的雞長期帶菌，成為傳染源，可周而復(fù)始地代代相傳。

飼料和飲水沙門菌污染也是引起雞白痢的重要原因。韓志輝¨51通過常規(guī)分離培養(yǎng)鑒定技術(shù)，對某飼料廠102份成品飼料、97份魚粉、98份肉骨粉進(jìn)行了沙門菌的分離與鑒定，結(jié)果從297份樣品中分離到沙門菌45株，分離率15．2％。成品飼料陽性率17．6％(13／102)，魚粉陽性率為14．4％(14／97)，肉骨粉陽性率為13．3％(13／98)。

鼠害、貓、狗、鳥和昆蟲等帶菌動物可直接感染易感雞群或間接污染飼料原料、飼料成品或水源來感染雞群。同時，病雞糞便含有大量細(xì)菌，飼料、飲水和用具被污染后，是傳播的重要因素。當(dāng)飼養(yǎng)管理差，雛雞擁擠，通風(fēng)不良，溫度過高或過低，以及發(fā)生其他疫病時，都可以成為雞白痢的誘因。

3父母代蛋種雞場雞白痢的凈化和防控

3．1雞場選址建設(shè)要科學(xué)

雞場的選址和布局決定了雞場的生物安全體系是否健全，這是對疫病有效隔離及防控的重要一環(huán)。首先，充分考慮好雞場的地理位置和外部環(huán)境。從雞場的位置、占地面積、地形地勢、土質(zhì)、水源等方面進(jìn)行全面的考慮。第二，在內(nèi)部建設(shè)時，劃分功能單元、合理布局，昆合種雞場的育雛育成與商品代養(yǎng)殖舍要分區(qū)布局，區(qū)與區(qū)之間拉開距離，同時要滿足各區(qū)全進(jìn)全出的要求引。具備防鼠、鳥和昆蟲等設(shè)施。生產(chǎn)區(qū)和生活區(qū)嚴(yán)格分開，生產(chǎn)區(qū)凈道和污道分開，防止交叉感染。有一定距離的緩沖防疫隔離帶，四周砌圍墻或綠色隔離帶與外界隔離。

3．2引種要規(guī)范

要選擇一家管理規(guī)范、品種來源純正、遺傳性狀比較穩(wěn)定、種源干凈且無垂直傳播疫病或無主要垂直傳播病的祖代種雞場引種，要求祖代陽性率不超過0．1％，防止雞沙門菌隨種源帶入。

3．3檢疫凈化雞群

通過全血平板凝集試驗(yàn)，檢出并淘汰陽性種雞。種母雞13～18周齡進(jìn)行第一次抽檢，抽檢數(shù)量為10％，種公雞全檢，淘汰陽性雞，之后每月全檢；種母雞40周齡起進(jìn)行第二次抽檢，抽檢數(shù)量為10％，方法同上。如雞白痢沙門菌陽性率超過0．3％，對種雞群全檢，淘汰陽性雞，保證種雞群白痢沙門菌陽性率低于0．3％。

3．4加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

在養(yǎng)雞生產(chǎn)中，育雛始終是關(guān)鍵，也是重點(diǎn)。溫度、濕度、通風(fēng)、光照應(yīng)嚴(yán)格控制。雛雞應(yīng)給予顆粒化飼料，并少喂勤添。育雛的飲用水要定期檢測，確保菌落總數(shù)達(dá)標(biāo)且無沙門菌，育雛的第1周要飲用溫開水，在飲水中適量添加高敏抗生素，預(yù)防雞白痢沙門菌早期感染。

加強(qiáng)雞舍的通風(fēng)換氣，保持雞舍環(huán)境溫度適宜，空氣干燥，降低沙門菌生存和感染的可能性。在加強(qiáng)日常衛(wèi)生管理和消毒措施及提高飼養(yǎng)管理水平的同時，尤其是雞籠的滾蛋網(wǎng)要每天清掃干凈，防止種蛋污染。對健康雞群進(jìn)行定期預(yù)防性用藥，所使用的藥物都具有高敏性。對采用人工受精的父母代蛋種雞場，要采用一雞一管人工授精方法，減少沙門菌的橫向傳播。

采取合理的通風(fēng)模式。李保明口副建議采用能使風(fēng)由側(cè)墻直接進(jìn)到天花板的模式。國外采用的纖維壓制板，風(fēng)的滲透能力強(qiáng)，通過這種板可以均勻輸送冷空氣，結(jié)合籠中間的管道通風(fēng)效果較好。另外，對排出的空氣進(jìn)行過濾消毒處理，有利于持續(xù)保障場區(qū)環(huán)境。

優(yōu)化免疫程序。部分階段用聯(lián)苗替代單苗，在減少油乳劑疫苗次數(shù)、減少應(yīng)激的同時，確保種雞群不發(fā)生疫情，減少繼發(fā)沙門菌的幾率。

3．5嚴(yán)格消毒

種雞場要對雞舍、種蛋、孵化場和用具等進(jìn)行嚴(yán)格消毒。雞舍要定期使用高效低毒的消毒液帶雞消毒，消毒液的品種每周要更換，循環(huán)使用。進(jìn)入雞舍的蛋托都要經(jīng)過沖洗消毒處理；每2 h揀1次種蛋，立即熏蒸消毒，減少蛋殼表面的細(xì)菌侵入蛋內(nèi)。每隔2周對雞舍內(nèi)的空氣、塵埃及糞便采樣，進(jìn)行沙門菌檢測，保證檢測結(jié)果均為陰性。種蛋挑選要嚴(yán)格，臟蛋、次蛋都要剔除；種蛋選好人孵前再進(jìn)行一次熏蒸消毒；要確保孵化廳和疫苗注射室正壓送風(fēng)、出雛廳和存雛廳是負(fù)壓通風(fēng)；孵化廳要定期全面消毒。每次出雛后，要對出雛廳、孵化器及用具進(jìn)行徹底地清掃消毒。疫苗注射室要潔凈，連續(xù)注射器、針頭等用具要經(jīng)高溫消毒后使用，稀釋疫苗最好采用一次性注射器。每小時更換1次連續(xù)注射器，每100只雛雞更換1個針頭。定期對孵化廳進(jìn)行消毒內(nèi)的空氣和塵埃進(jìn)行沙門菌檢測，檢測結(jié)果應(yīng)為陰性。

在消毒液研發(fā)方面，鄭煒超等n鍆研制的新型微酸性電解水機(jī)，可連續(xù)穩(wěn)定生產(chǎn)適用于畜禽場消毒的高濃度微酸性電解水，可快速殺滅各種病原菌和病毒，對于發(fā)展無害化綠色健康養(yǎng)殖具有重要的意義。微酸性電解水消毒對蛋雞舍內(nèi)沙門菌的凈化效果，表明微酸性電解水對不同種類沙門菌的殺菌效果與作用時間、有效氯濃度和溫度呈正比關(guān)系，對車輛表面的沙門菌的消毒效果顯著高于復(fù)合酚。

3．6杜絕飼料、飲水污染雞白痢沙門菌嚴(yán)把飼料進(jìn)貨渠道，倉庫門口設(shè)擋鼠板，不使用易遭沙門菌污染的飼料原料，做到混合飼料當(dāng)天生產(chǎn)，當(dāng)天用完，避免污染。袋裝飼料不應(yīng)直接堆放在地板上，應(yīng)堆放在木制托板上，以利通風(fēng)。