豬寄生蟲病診斷方法

(一)糞便蟲卵檢查法

1.直接涂片檢查法 是簡便和常用的方法，但檢查時所用的糞便數量少，故檢出率較低。本法是先在載玻片上滴一滴甘油與水的混合液，再用牙簽或火柴棍挑起少量糞便加入其中，混勻，夾去較大的糞渣，最后使玻片上留有一層均勻的糞液，其濃度的要求是將此玻片放于書上，能通過糞便液膜模糊地看出其下的字為合適。在糞便上覆以蓋玻片，置顯微鏡下檢查。檢查時應順序地查遍蓋玻片下所有部分。

2.水洗沉淀法 取糞便5克，加清水100毫升以上，攪勻成糞液，通過40~60目銅篩過濾，濾液收集于燒杯中，靜置沉淀20分鐘，傾去上清液，保留沉渣，再加清水混勻，再沉淀，如此反復操作直到上層液體透明后，吸取沉渣檢查。

3.漂浮法 先往青霉素空瓶中加入適量飽和鹽水，再往瓶內加入糞便1克，混勻，篩濾，濾液注入另一瓶中，補加飽和鹽水溶液使瓶口充滿，上覆以蓋玻片，并使液面與蓋玻片接觸，其間不留氣泡，直立20分鐘后，取下蓋玻片檢查。此法適用于檢查比重比飽鹽水溶液輕的蟲卵，如一般線蟲卵和球蟲卵囊等。

(二)常見蟲卵的一般特征

1.豬蛔蟲卵 蟲卵短橢圓，棕黃色，大小為56~87微米×46~57微米，殼厚，外表有凹凸不平的蛋白質膜，剛排出的蟲卵含一未分裂的卵黃細胞，未受精卵呈現長橢圓形，殼較薄。

2.結節(jié)線蟲卵 橢圓形，淡灰色，卵殼薄而光滑，內含8~16個球形的胚細胞。大小為45~55微米×26~36微米。

3.豬鞭蟲卵 呈淡褐色，具有厚而光滑的外膜，兩極呈栓塞狀，形如腰臌，內有一胚細胞。蟲卵大小為52~61微米×27~30微米。

4.蘭氏類圓線蟲卵 呈橢圓形，淡灰色，卵殼薄而光滑，卵內含有成形的幼蟲，幼蟲呈U字形。大小為45~55微米×26~30微米。

5.布氏姜片蟲卵 呈淡黃色，卵殼薄，其一端有不明顯的卵蓋，卵黃均勻地散布于卵殼內。大小為130~140微米×80~85微米。

6.球蟲卵囊 呈卵園或橢圓形，淡灰色，殼薄而光滑，內有顆粒狀的原生質團塊。其大小因種類不同而不同，大的為24.6~31.9微米×23.2~24.0微米，小的為11.2~16.0微米×9.6~12.8微米。

(三)豬疥螨的實驗室檢查方法

1.病料的采取

疥螨寄生于豬的皮內，因此應刮取皮屑，置于顯微鏡下，尋找蟲體。刮取皮屑的方法很重要，應選擇患病皮膚與健康皮膚交界處，這里的螨較多，往往在耳殼內容易尋找。先在要刮取的皮膚處滴加少許50%的甘油水溶液，然后用將邊緣磨銳的不銹鋼小勺耒刮取皮屑，直到皮膚輕微出血。將刮下的皮屑置入試管或塑料袋內，帶回供檢查。

2.檢查方法

(1)顯微鏡下直接檢查法 將刮下的皮屑置載玻片上，加入少量50%甘油水溶液，覆以另一張載玻片。搓壓載玻片使病料散開，分開載玻片，置顯微鏡下檢查。此法適合于檢查皮屑中蟲體較多的病料。

(2)蟲體濃集法 為了在較多的病料中，檢出其中較少的蟲體，提高檢出率，可采用濃集法。此法先取較多的病料，置于試管中，加入10%NaOH溶液，在灑精燈上煮沸數分鐘，使皮屑溶解，蟲體自皮屑中分離出來。然后其自然沉淀或以每分鐘2 000轉/分鐘的速度離心20分鐘，吸取沉渣鏡檢。

(四)豬附紅細胞體的實驗室檢查方法

可用來作為診斷的最重要的臨床癥狀是：貧血，對外界反應遲鈍，發(fā)熱高達40℃或更高。其它示病癥狀是：耳廓邊緣變色，皮膚變態(tài)反應。

查找病原是確認該病的主要方法，新鮮血液加等量生理鹽水稀釋后置顯微鏡下觀察，可見蟲體呈球形，逗點形，桿狀或顆粒狀。由于蟲體附著在紅細胞表面有張力作用，紅細胞在視野內上下震動或左右運動，紅細胞形態(tài)也發(fā)生了變化，呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。血液姬姆薩染色后，蟲體可染成紫紅色，但該種染色方法的缺點是姬姆薩色素沉著，容易形成假像。血清經吖啶橙染色在熒光顯微鏡下可見各種形狀的附紅細胞體單體。但這一技術的復雜性使其只適宜實驗室診斷。該染色情況下，附紅細胞體呈淺至深桔黃色。

血清診斷方法包括IHA試驗、補體結合試驗或ELISA方法，但抗體的產生與病原數量的增多(而不是與感染發(fā)生的時間)有暫時的相關性。這意味著抗體的產生呈波浪形。即使數次急性發(fā)作后，抗體滴度也只能在2-3個月內維持較高水平，之后便會下降到閾值以下，這表明假陰性是常見的。所有血清學方法只適合于群體診斷。

PCR診斷已經成功地用于豬附紅細胞體病。不過，該方法不能區(qū)別帶蟲豬和發(fā)病豬。

動物試驗也是確認豬附紅細胞體病的方法之一。常用的試驗動物是小白鼠，用小豬作試驗動物時則需摘除脾臟。懷疑為豬附紅細胞體病的豬在切除脾臟后觀察3-20天，若是帶蟲豬則會出現急性附紅細胞體的癥狀，此時可通過查找血涂片中的蟲體進行

豬寄生蟲病診斷

豬附紅細胞體病的診斷方法

豬附紅細胞體病的診斷方法主要有以下幾種：

1、懸滴法

新鮮血液加等量生理鹽水稀釋后吸取數滴置載玻片上，加蓋蓋玻片，置顯微鏡下觀察，可見蟲體呈球形，逗點形，桿狀或顆粒狀。由于蟲體附著在紅細胞表面有張力作用，紅細胞在視野內上下震動或左右運動，紅細胞形態(tài)也發(fā)生了變化，呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。

該方法也適用于抗凝血液。抗凝血液存放1-2天一般并不影響檢測結果。

2、直接涂片法

取新鮮或抗凝血少許置載玻片上推成薄層，然后在顯微鏡下直接觀察。可看到附紅細胞體呈球形，逗點形，桿狀或顆粒狀。寄生有附紅細胞體的紅細胞呈菠蘿狀、鋸齒狀、星狀等不規(guī)則形狀。該方法的優(yōu)點是簡單、快速。不足之處一是對推片的技術有一定要求，紅細胞必需推成薄層;二是容易和其他導致紅細胞變形的情況混淆。

3、染色檢查

血液涂片經姬姆薩染色后，蟲體可染成紫紅色，但該種染色方法的缺點是姬姆薩色素沉著，容易形成假像。血清經吖啶橙染色在熒光顯微鏡下可見各種形狀的附紅細胞體單體。但這一技術的復雜性使其只適宜實驗室診斷。該染色情況下，附紅細胞體呈淺至深桔黃色。

4、血清學診斷

包括IHA試驗、補體結合試驗或ELISA方法，但抗體的產生與病原數量的增多(而不是與感染發(fā)生的時間)有暫時的相關性。這意味著抗體的產生呈波浪形。即使數次急性發(fā)作后，抗體滴度也只能在2-3個月內維持較高水平，之后便會下降到閾值以下，這表明假陰性是常見的。所有血清學方法只適合于群體診斷。

5、PCR診斷

國外已有PCR技術用于豬附紅細胞體病診斷的報道。不過，該方法不能區(qū)分帶蟲豬和發(fā)病豬。

6、動物試驗

常用的試驗動物是小白鼠，用小豬作試驗動物時則需摘除脾臟。懷疑為豬附紅細胞體病的豬在切除脾臟后觀察3-20天，若是帶蟲豬則會出現急性附紅細胞體的癥狀，此時可通過查找血涂片中的蟲體進行診斷。