雞慢性呼吸道病(Chronicrespiratorydisease,CRD)是經呼吸道感染的接觸性傳染病，可水平和垂直傳播，高度集約化、密集型的生產方式可加速本病的擴散，給養禽業造成巨大經濟損失。CRD的預防目前尚無效果確實的疫苗，利用抗菌藥物防治是目前國內外采取的主要措施，目前常用的藥物有大環內酯類、四環素類、林可胺類抗生素及氟喹諾酮類等，其中許多藥物由于價格或耐藥性方面的問題，在生產上應用受到一定限制，而且使用單一的抗菌藥不利于防治MG的混合感染及預防耐藥性產生，合理的聯合用藥可以降低成本、提高療效、減少耐藥性。紅霉素具有一定的抗支原體作用，磺胺嘧啶鈉具廣譜抗菌活性，甲氧芐啶對二者的抗菌作用均有增效作用，且價格低廉。本研究將其進行聯合用藥，對實驗性雞敗血支原體病進行治療試驗，進一步驗證這些藥物在治療雞敗血支原體感染中的協同作用。
1 材料與方法
1.1 藥品與試劑 復方紅霉素，內含活性成分紅霉素(10%)、磺胺嘧啶(16%)及甲氧芐啶(3.2%)，批號：D.015，對照藥物硫氰酸紅霉素、磺胺嘧啶鈉及甲氧芐啶，均由印度尼西亞PT.SumberMultivita藥 廠提供。胰蛋白胨為美國Difco公司產品；酵母浸出物為英國OXOID公司產品。其它試劑均為國產分析純。
1.2 試驗動物 7日齡新揚州雞210只，購于揚州市區某雞場。雞試驗前經血清學檢測為陰性。用不含其他任何抗菌藥物的全價飼料飼喂至21日齡。
1.3 菌種 禽敗血支原體為S6株，由華南農業大學惠贈；禽大腸桿菌O78株，由揚州大學傳染病學教研室提供。
1.4 培養基 FM-4改良培養基，參考Frey等的方法配制，用于禽敗血支原體培養。
1.5 試驗動物分組 將21日齡210只新揚州雞，試驗前單羽稱重，隨機分組，共7組，每組30只，即分別為高、中、低劑量治療組、紅霉素對照組、磺胺嘧啶(SD)/甲氧芐啶(TMP)對照組、健康對照組、感染對照組。各試驗組雞的平均體重和處理見表1。
表1 各組試驗雞處理及體重
1.6 雞敗血支原體與大腸桿菌人工混合感染 雞敗血支原體接種液為MGS6株第3次傳代培養物，生長濁度為1×108CCU(顏色變化單位)/ml。另外，將保存的雞大腸桿菌(O78)的強毒菌接種于普通平板，培養24 h后挑取典型菌落接種于營養肉湯中，37 ℃培養18 h后取出，肉湯培養物經接種雞復壯后，從雞肝臟分離出大腸桿菌并接種于平板培養，最后挑選典型菌落用營養肉湯培養制備染毒菌液。21日齡時各治療組及感染對照組每只雞經左右胸腹氣囊接種雞敗血支原體液體培養物(105 CCU/ml)，0.2 ml/100 g。接種后48 h，每只雞通過皮下注射接種大腸桿菌液體培養物(2.8×105CFU/ml)，劑量為0.08 ml/100 g。健康對照組注射無菌生理鹽水。
1.7 給藥方法 各治療組雞于接種大腸桿菌后即以飲水途徑給予藥物治療(如表1)，每天配換藥液一次，連續用藥5天。健康及感染對照組給予常水。
1.8 臨床觀察 停藥后觀察期15天，每天觀察各組雞的臨床癥狀，記錄死亡情況。病死雞剖檢并進行細菌學分離。
1.9 療效評價指標
1.9.1 死亡率 凡在試驗期間，雞出現敗血支原體和大腸桿菌混合感染的典型癥狀并死亡，剖檢氣囊、肺臟、心臟、肝臟有典型的病理變化特征，肝臟、心臟分離出大腸桿菌，判定感染死亡。根據死亡雞數計算死亡率。
1.9.2 治愈率 凡在試驗期間，經飲水給藥后精神狀況及食欲恢復正常，不再出現咳嗽、呼吸羅音、打噴嚏、張口呼吸、流鼻涕等臨床癥狀均屬治愈。根據治愈雞數計算治愈率。
1.9.3 有效率 用藥后，試驗雞的精神、食欲、呼吸有明顯好轉，體重較用藥前增加者，均判為有效，據此計算有效率。
1.9.4 增重 根據試驗初和試驗結束(感染后23天)時各組雞的體重，計算每只雞增重，據此計算每組試驗雞平均增重及標準差。
1.9.5 病理剖檢和病原分離 試驗結束后將所有存活雞捕殺，并進行大腸桿菌分離培養。據此計算各組大腸桿菌分離率。
1.9.6 數據的分析處理 用生物統計學方法進行數據的顯著性檢驗，其中死亡率、治愈率及有效率均用卡方檢驗，增重采用t檢驗。
2 結果 結果見表2。統計學分析表明，除高劑量組死亡率與中劑量組死亡率比較差異不顯著外，高、中劑量組與其他用藥組及感染對照組差異均顯著(P＜0.05)。
表2 各藥物對雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染療效(略）
復方紅霉素高、中劑量組治愈率最高，達83.3%以上；紅霉素組最低，僅為46.7%，其次為磺胺嘧啶/甲氧芐啶組，為63.3%。統計學分析表明，前兩者的治愈率顯著高于紅霉素組與磺胺嘧啶/甲氧芐啶對照組(P＜0.05)。復方紅霉素高劑量組有效率與紅霉素組及磺胺嘧啶/甲氧芐啶組比較差異極顯著(P＜0. 01)，與低劑量組相比，差異顯著(P＜0.05)。但高、中劑量組間比較差異不顯著(P＜0.05)。試驗雞增重以健康對照組最高，其次為高劑量組。統計學分析表明，除高劑量組外，各用藥組與健康對照組的增重差異均顯著(P＜0.05)。各用藥組增重顯著高于感染對照組(P＜0.05)。
3 討論 治療試驗結果表明，復方紅霉素以1 000 mg/l飲水給藥組的死亡率顯著低于藥物對照組，治愈率、有效率均顯著高于藥物對照組。復方紅霉素以500 mg/l飲水給藥組的各項療效指標與 1 000 mg/l組比較無統計學意義上的差異，混合感染后的大腸桿菌分離率亦明顯下降。綜合本實驗各項結果可以看出，復方紅霉素中的紅霉素、磺胺嘧啶、甲氧芐啶合用在治療雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染方面有明顯的協同作用，以500～1 000 mg/l飲水連續5天飲水給藥療效較好，其作用明顯優于對照物紅霉素組及磺胺嘧啶/甲氧芐啶組。同時，復方紅霉素可溶性粉飲水給藥使用方便，溶解迅速，對雞無不良作用，飲、食欲正常，適口性良好，可作為雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染時治療的有效藥物。
1 材料與方法
1.1 藥品與試劑 復方紅霉素，內含活性成分紅霉素(10%)、磺胺嘧啶(16%)及甲氧芐啶(3.2%)，批號：D.015，對照藥物硫氰酸紅霉素、磺胺嘧啶鈉及甲氧芐啶，均由印度尼西亞PT.SumberMultivita藥 廠提供。胰蛋白胨為美國Difco公司產品；酵母浸出物為英國OXOID公司產品。其它試劑均為國產分析純。
1.2 試驗動物 7日齡新揚州雞210只，購于揚州市區某雞場。雞試驗前經血清學檢測為陰性。用不含其他任何抗菌藥物的全價飼料飼喂至21日齡。
1.3 菌種 禽敗血支原體為S6株，由華南農業大學惠贈；禽大腸桿菌O78株，由揚州大學傳染病學教研室提供。
1.4 培養基 FM-4改良培養基，參考Frey等的方法配制，用于禽敗血支原體培養。
1.5 試驗動物分組 將21日齡210只新揚州雞，試驗前單羽稱重，隨機分組，共7組，每組30只，即分別為高、中、低劑量治療組、紅霉素對照組、磺胺嘧啶(SD)/甲氧芐啶(TMP)對照組、健康對照組、感染對照組。各試驗組雞的平均體重和處理見表1。
表1 各組試驗雞處理及體重
1.6 雞敗血支原體與大腸桿菌人工混合感染 雞敗血支原體接種液為MGS6株第3次傳代培養物，生長濁度為1×108CCU(顏色變化單位)/ml。另外，將保存的雞大腸桿菌(O78)的強毒菌接種于普通平板，培養24 h后挑取典型菌落接種于營養肉湯中，37 ℃培養18 h后取出，肉湯培養物經接種雞復壯后，從雞肝臟分離出大腸桿菌并接種于平板培養，最后挑選典型菌落用營養肉湯培養制備染毒菌液。21日齡時各治療組及感染對照組每只雞經左右胸腹氣囊接種雞敗血支原體液體培養物(105 CCU/ml)，0.2 ml/100 g。接種后48 h，每只雞通過皮下注射接種大腸桿菌液體培養物(2.8×105CFU/ml)，劑量為0.08 ml/100 g。健康對照組注射無菌生理鹽水。
1.7 給藥方法 各治療組雞于接種大腸桿菌后即以飲水途徑給予藥物治療(如表1)，每天配換藥液一次，連續用藥5天。健康及感染對照組給予常水。
1.8 臨床觀察 停藥后觀察期15天，每天觀察各組雞的臨床癥狀，記錄死亡情況。病死雞剖檢并進行細菌學分離。
1.9 療效評價指標
1.9.1 死亡率 凡在試驗期間，雞出現敗血支原體和大腸桿菌混合感染的典型癥狀并死亡，剖檢氣囊、肺臟、心臟、肝臟有典型的病理變化特征，肝臟、心臟分離出大腸桿菌，判定感染死亡。根據死亡雞數計算死亡率。
1.9.2 治愈率 凡在試驗期間，經飲水給藥后精神狀況及食欲恢復正常，不再出現咳嗽、呼吸羅音、打噴嚏、張口呼吸、流鼻涕等臨床癥狀均屬治愈。根據治愈雞數計算治愈率。
1.9.3 有效率 用藥后，試驗雞的精神、食欲、呼吸有明顯好轉，體重較用藥前增加者，均判為有效，據此計算有效率。
1.9.4 增重 根據試驗初和試驗結束(感染后23天)時各組雞的體重，計算每只雞增重，據此計算每組試驗雞平均增重及標準差。
1.9.5 病理剖檢和病原分離 試驗結束后將所有存活雞捕殺，并進行大腸桿菌分離培養。據此計算各組大腸桿菌分離率。
1.9.6 數據的分析處理 用生物統計學方法進行數據的顯著性檢驗，其中死亡率、治愈率及有效率均用卡方檢驗，增重采用t檢驗。
2 結果 結果見表2。統計學分析表明，除高劑量組死亡率與中劑量組死亡率比較差異不顯著外，高、中劑量組與其他用藥組及感染對照組差異均顯著(P＜0.05)。
表2 各藥物對雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染療效(略）
復方紅霉素高、中劑量組治愈率最高，達83.3%以上；紅霉素組最低，僅為46.7%，其次為磺胺嘧啶/甲氧芐啶組，為63.3%。統計學分析表明，前兩者的治愈率顯著高于紅霉素組與磺胺嘧啶/甲氧芐啶對照組(P＜0.05)。復方紅霉素高劑量組有效率與紅霉素組及磺胺嘧啶/甲氧芐啶組比較差異極顯著(P＜0. 01)，與低劑量組相比，差異顯著(P＜0.05)。但高、中劑量組間比較差異不顯著(P＜0.05)。試驗雞增重以健康對照組最高，其次為高劑量組。統計學分析表明，除高劑量組外，各用藥組與健康對照組的增重差異均顯著(P＜0.05)。各用藥組增重顯著高于感染對照組(P＜0.05)。
3 討論 治療試驗結果表明，復方紅霉素以1 000 mg/l飲水給藥組的死亡率顯著低于藥物對照組，治愈率、有效率均顯著高于藥物對照組。復方紅霉素以500 mg/l飲水給藥組的各項療效指標與 1 000 mg/l組比較無統計學意義上的差異，混合感染后的大腸桿菌分離率亦明顯下降。綜合本實驗各項結果可以看出，復方紅霉素中的紅霉素、磺胺嘧啶、甲氧芐啶合用在治療雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染方面有明顯的協同作用，以500～1 000 mg/l飲水連續5天飲水給藥療效較好，其作用明顯優于對照物紅霉素組及磺胺嘧啶/甲氧芐啶組。同時，復方紅霉素可溶性粉飲水給藥使用方便，溶解迅速，對雞無不良作用，飲、食欲正常，適口性良好，可作為雞敗血支原體和大腸桿菌混合感染時治療的有效藥物。
