本法系比較洋地黃標準品(S)與供試品(T)對鴿的最小公斤致死量，以測定供試品的效價。 標準品溶液的配制 迅速精密稱取洋地黃標準品適量，避免吸潮，置玻璃容器內，按標示效價計算，每1單位精密加入76％乙醇1ml，密塞，連續振搖1小時，靜置片刻,用干燥濾器迅速濾過，防止乙醇揮發，濾液即為每1ml中含1單位的溶液，4～8℃貯存，如無沉淀析出，可在1個月內使用。 標準品稀釋液的配制 試驗當日，精密量取標準品溶液適量,用0.9％氯化鈉溶液稀釋，稀釋液濃度(u/ml)應調節適當(一般可用1→30),使鴿的平均最小公斤致死量在25～34ml之間。 供試品溶液和稀釋液的配制 供試品如為粉末，精密稱取適量，按標示量或估計效價(A<[T]>)，照標準品溶液及其稀釋液的配制法配制；供試品如為片劑，取20片以上，精密稱重，求出平均片重，迅速研細，再精密稱取不少于20片的粉末，按稱重及標示量(A<[T]>)計算，照標準品溶液及其稀釋液配制法配制。供試品稀釋液和標準品稀釋液的鴿平均最小公斤致死量(ml)應相近。 檢定法 取健康無傷的鴿，試驗前16～24小時移去飼料，但仍給予飲水，臨試驗前準確稱重，選取體重在250～400g的鴿（每次試驗所用鴿的體重相差不得超過100g）,分成兩組，每組至少6只，一組為標準品組,一組為供試品組，兩組間鴿的情況應盡可能相近。 將鴿仰縛于適宜的固定板上，在一側翼靜脈處拔除羽毛少許，露出翼靜脈，插入與最小刻度不大于0.02ml的滴定管相連的注射針頭，緩緩注入標準品稀釋液或供試品稀釋液，開始時，一次注入0.5ml，然后以每分鐘0.2ml的等速連續注入，至鴿中毒死亡立即停止注入。一般死亡前有強烈顫抖、惡心嘔吐、排便等現象發生，至瞳孔迅速放大、呼吸停止為終點。記錄注入稀釋液的總量(ml),換算成每1kg體重致死量(ml)中所含單位數(u／Kg)，取其10倍量的對數值作為反應值，照生物檢定統計法(附錄Ⅹ Ⅳ)中的直接測定法計算效價及實驗誤差。 本法的可信限率(FL％)不得大于15％。