【摘要】 目的探討不同裝量的中性氧化鋁柱對紋股藍總皂苷含量測定結果的影響。方法分光
光度法。結果絞股藍總皂苷含量受不同氧化鋁柱的影響顯著,結果如下:裝5 g氧化鋁的層析柱裝10 g氧化鋁的層析柱>裝20 g氧化鋁的層析柱。結論確定了以5 g中性氧化鋁(100~120目)裝柱最佳,空白回收率可達97.8% ,相對標準偏差(RSD)為0.75%。
【關鍵詞】 中性氧化鋁柱;絞股藍總皂苷;人參皂苷Rbl;紫外分光光度法;含量測定
絞膠藍為葫蘆科植物絞股藍[Gynostemma pentaphynum(Thunb)Makino]的干燥地上部分或全草,具有清熱解毒、止咳祛痰的功效,用于治療喘咳、慢性支氣管炎、傳染性肝炎等疾病。由于絞股藍主要成分為皂苷,所以近年來人們從絞股藍中提取加工制成了絞股藍總皂苷,以方便人們使用。其含量測定方法,一般采用柱吸附(中性氧化鋁柱)——分光光度法 。但對于中性氧化鋁的量是否會影響絞股藍總皂苷的含量,作者尚未見報道。
本文通過改變裝柱所需中性氧化鋁的量來測定絞股藍總皂苷的含量,從而確定柱層析所需氧化鋁的最佳量。
1 儀器與試藥
7520型分光光度計(上海分析儀器廠);微量進樣器(上海高欣玻璃儀器廠);恒溫水浴器;玻璃層析柱(1.4cm×20 cm);AE240分析天平(瑞士Mettler);絞股藍總皂苷(陜西安康);人參皂苷RM(中國藥品生物制品檢定所,含量測定用);中性氧化鋁(100—120目,上海五四化學試劑廠);高氯酸、甲醇、冰醋酸均為分析純。
2 對照品溶液配制及標準曲線繪制
精密稱取人參皂苷Rbl 10.O0 mg置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,即得。分別精密吸取對照品溶液10、50、100、150與2OOuL,置具塞試管中60℃水浴揮干溶劑,各加5%香草醛冰醋酸溶液(新配)0.4ml,高氯酸1.6 ml,搖勻密塞,60℃水浴中加熱15 min,取出冷卻至室溫,各加冰醋酸10ml,搖勻,隨行試劑做空,于550 nm處1 h內測吸收度。求得回歸方程為Y=0.00339766X+0.00063865,r=0.99999,結果表明,人參皂苷Rbl在10~2OOug范圍內與吸收度呈良好的線性關系。
3 樣品溶液的制備及測定
精密稱取絞股藍總皂苷0.5050 g加甲醇溶解并定容至25ml容量瓶中。分別精密吸取1ml置不同量的中性氧化鋁的玻璃層析柱(內徑1.4cm,中性氧化鋁100~120目,20g、10 g,5 g,50%甲醇濕法裝柱),用50%甲醇60ml洗脫,收集洗脫液蒸干,殘留物用甲醇適量溶解并轉移至10ml量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,作為供試品溶液。分別精密吸取供試溶液100ul,按照對照品溶液配制(置具塞試管??)項下同法操作,測吸收度。根據標準曲線計算含量,結果見表1。
5 結論
本實驗考察了不同裝柱量的中性氧化鋁柱對絞股藍總皂苷的結果影響。結果表明,選用5 g中性氧化鋁裝柱,效果最佳(空白回收率達97.8%,RSD為0.75%),既能除去雜質的干擾,又能使絞股藍總皂苷完全洗脫,使測定結果準確可靠。該方法簡單,可用于含絞股藍總皂苷類的藥物的含量測定。
參考文獻
1 湖南省衛生廳.湖南省中藥材標準.1993年版.230.
2 山東省衛生廳.山東中藥材標準.1995年版.137.
3 廣西壯族自治區衛生廳.廣西中藥材標準.第2冊.1996年版.186.
4 王寶栗主編.中成藥質量標準與標準物質研究.中國醫藥科技出版社。1994.378.
5 絞肢藍總皂苷.中華人民共和國衛生部標準.1994年版.31.