【概述】 減蛋綜合征又稱產蛋下降綜合征,是由腺病毒引起,以產蛋高峰期產蛋量下降,產畸形蛋,軟殼蛋和無殼蛋為特征。在臨診上多表現明顯的癥狀。
本病于1976年發現并在世界各國流行,使產蛋量下降20%~40%,嚴重影響蛋雞業的發展,我國也存在此病。
其臨床特征為雞群產蛋突然下降,大量出現軟殼蛋和畸形蛋,蛋殼顏色變淺。
該病在許多養雞國家如法國、英國、德國、意大利、匈牙利、澳大利亞、美國、韓國、日本等相繼報道該病。我國是1992年證實有該病的存在。
【病因/病原】 引起本病的病原為一種腺病毒,對雞、火雞及鴨的紅細胞有凝集性,這與其他腺病毒只能凝集哺乳動物紅細胞不同。病毒存在于鴨體內及病雞的輸卵管、咽喉部及病雞糞便和蛋內。它不能使鴨、鵝發病,病毒對外界抵抗力較強。
1.病原特性 雞減蛋綜合征(EDS-76)病毒是腺病毒屬的病毒。病毒粒子大小為76—80納米,呈20面體對稱,是無囊膜的雙股DNA病毒,衣殼的結構,殼粒的數目等均具有典型腺病毒的特征。對乙醚不敏感,pH耐受范圍廣,如pH3時不死。加熱5612可存活3小時,60C30分鐘喪失致病性,70℃20分鐘完全滅活,室溫條件下,至少可存活6個月以上。0.1%甲醛48小時,0.3%甲醛24小時可使病毒滅活。
EDS-76病毒能凝集雞、鴨、鵝、鴿等禽類的紅細胞。目前世界各地所分離到的EDS-76病毒只有1個血清型。
EDS-76病毒能在鴨胚和鵝胚中增殖,也能在鴨腎細胞、鴨胚成纖維細胞、鴨胚肝細胞、雞胚肝細胞、雞腎細胞和鵝胚成纖維細胞培養物上良好生長。
2.病料的采取和處理 采取病雞的輸卵管、泄殖腔、鼻黏膜、變性卵泡、無殼軟蛋等作為被檢材料。把組織磨碎制成乳劑。凍融3次,離心,取上清液,加入青、鏈霉素各1000單位(微克)/毫升,置于4度作用2小時。對其他病料作無菌處理后,供病毒分離和攻毒用。
3.病原的分離培養
(1)雞胚接種 取處理過的病料接種9~12日齡鴨胚的尿囊腔,38℃繼續孵育,棄去24小時內死胚,收獲48~96小時存活的鴨胚尿囊液,將收獲的鴨胚尿囊液繼續接種10—12日齡鴨胚尿囊腔進行傳代培養。每代鴨胚尿囊液都用雞紅細胞做血凝試驗檢測尿囊液中的血凝素,即使對陰性尿囊液也應至少傳2—3代。王川慶(1994)應用平板紅細胞HA試驗對EDS-76病毒進行了快速定性檢驗,此法可用于種毒的篩選。
(2)細胞培養 將病料接種于已長成單層的鴨胚成纖維細胞,37℃繼續培養數日,觀察致細胞病變效應(CPE)和核內包涵體,然后收獲,反復凍融,做血凝試驗,如無CPE,則應至少盲傳2~3代。
4.病毒的鑒定
(1)人工感染試驗 用分離毒株接種無EDS-76抗體的產蛋雞,可觀察到與自然病例相同的癥狀及產蛋異常變化。
(2)用已知EDS-76陽性血清與收獲的HA陽性尿囊液做HI試驗,確定之。
此外,免疫熒光和病毒中和試驗也可用于病毒的鑒定。
【病因附圖】
【流行病學】 1.易感動物和發病日齡。各日齡的雞均可感染,產褐色殼蛋的肉用雞的種母雞最易感,產白色殼蛋的母雞患病率低。在產蛋高峰期和接近產蛋高峰期發病高潮,其自然宿主是鴨或野鴨。
2.傳播途徑 雞體內的病毒可經種蛋傳染給下代雛雞,這是本病傳播的重要方式,病毒在體內長期潛伏,一直到產蛋高峰期才發病,另一種傳播方式是污染飼料、飲水,經消化道感染健康雞,傳播緩慢,同時有些弱毒疫苗是由非特異性病原的雞胚制作的,其中含有EDS-76,注射或飲水且易于傳播本病。雞鴨混養,注射針頭也可以傳播此病。
各種年齡的雞對EDS-76病毒都易感。鴨、鵝是自然宿主。有報道珍珠雞可被自然感染,并可產生軟殼蛋,未見鳥骨雞、火雞、雉雞在自然條件下被感染。從某些野禽(白鷺、鯡魚鷗、貓頭鷹、鸛等)的血清血檢出了EDS-76病毒抗體。
病毒經受精卵垂直傳播是EDS-76病毒的主要傳播方式。雞與雞之間接觸以及被病毒污染的飲水、飼料和器具,帶毒的鴨、鸛和某些野禽,也起到傳播的作用。
EDS-76病毒水平傳播的速度較慢,且有時呈間斷性,有資料介紹,經11周的時間,在籠養雞舍才引起全群感染,在墊草上雞與雞之間的傳播通常較快。
母雞經口腔途徑感染后,病毒先在鼻黏膜進行復制,形成病毒血癥。被感染后3—4天,病毒在全身淋巴組織,尤其是脾和胸腺中復制。在感染后7~20天,病毒侵入生殖系統,在輸卵管狹部蛋殼分泌腺大量復制。在性未成熟前不致使雞發病,至性成熟前、后,可能是由于激素和應激因素的作用,使病毒活化,在蛋雞進入產蛋高峰期前后(一般在26—45周齡)出現蛋殼異常、蛋體畸形,產蛋量突然下降(一般達20%~5096),持續期一般達6—10周。有的被感染雞群出現產蛋期推遲,產蛋率上升緩慢,不能達到產蛋高峰期應出現的產蛋率等流行特點。
雞被EDS-76病毒人工感染第5—6天,用血凝抑制試驗或間接免疫熒光試驗可測出抗體的存在,4~5周時抗體效價達到高峰。感染雞在出現高HI抗體效價時仍能排毒,而有些排毒雞則不出現抗體。有些雞群含有經卵而受感染的雞,在生長期間并不顯示出抗體,而只是隨著出現臨床癥狀才顯示出抗體。因此,在存在本病的地區的一個雞群,即便在20周齡時,所有的雞經血清學檢驗為陰性,也不能保證沒有受到感染。抗體可通過卵黃傳遞,這種經被動免疫而獲得的抗體的半衰期為3天。雛雞所獲得的母源抗體近于不能測出的時候,才能誘發主動抗體的形成。
【病理學】 通常變化不明顯,在產無殼蛋和異常蛋的雞可見輸卵管子宮粘膜肥厚,且有白色滲出物和干酪樣物,有時可見輸卵管萎縮,粘膜有炎癥,這些變化無診斷意義。 1.臨床病理學 本病大體病變不明顯,有時可見卵巢靜止不發育和輸卵管萎縮,少數病例可見子宮水腫,腔內有白色滲出物或干酪樣物,卵泡有變性和出血現象。人工感染時可見脾充血、腫大,偶見子宮內有薄膜包裹的卵黃和少量水樣蛋清。2。病理組織學 主要表現為輸卵管和子宮黏膜明顯水腫,腺體萎縮,并有淋巴細胞、漿細胞和異嗜性白細胞浸潤,在血管周圍形成管套現象,上皮細胞變性壞死,在上皮細胞中可見嗜伊紅的核內包涵體,子宮腔內滲出物中混有大量變性壞死的上皮細胞和異嗜性白細胞。少數病例可見卵巢間質中有淋巴細胞浸潤,淋巴濾泡數量增多,體積增大,脾臟紅、白髓不同程度增生。
【病理學圖】
【癥狀】 初產雞群產蛋率上升到50%以后即開始出現癥狀,大多數發生在26~32周齡(此時正值產蛋高峰期),病雞食欲、精神、糞便均正常,但輸卵管中蛋殼分泌腺受病毒破壞,卵泡發育排卵受影響,出現產蛋減少和蛋殼變劣,蛋的破損率高。開始發病時出現殼色變白,產蛋量減少,逐漸下降20%~40%,同時出現大量薄殼、軟殼、無殼和畸形蛋。蛋殼表面粗糙呈砂紙樣,正常蛋僅占70%左右,有些雞還將所產的蛋吃掉,病程一般持續4~6周,隨后逐漸恢復,經10周恢復正常,有此病的雞蛋不宜作種蛋孵化。
EDS-76最初癥狀是有色蛋殼的色澤消失。緊接著產生薄殼、軟殼或無殼蛋。薄殼蛋的殼質經常是粗糙的。病雞群生產的外觀正常的蛋受精率和孵化率不呈現顯著異常。但也有報道,種雞群發生EDS-76時,種蛋的孵化率降低,同時出現弱雛。發病雞群的產蛋量突然下降。產蛋量下降通常發生于產蛋高峰期前后,產蛋量下降可達20%~50%,持續期為4—10周左右,產蛋量的恢復十分緩慢。有的早期感染EDS-76的雞群出現產蛋期推遲,產蛋率上升緩慢,且達不到產蛋高峰應有的產蛋率。褪色的薄殼蛋、脆殼蛋往往出現在產蛋減少前24~48小時,這一特征癥狀有助于將本病區別于其他病因引起的產蛋減少癥。
【癥狀圖】
【診斷】 凡有產無殼蛋、軟皮蛋、破蛋及褐殼蛋褪色等異常蛋的產蛋下降,即可懷疑本病,確診需經實驗室診斷。由于該病癥有關方面與維生素缺乏、微量元素缺乏及傳染性支氣管炎、新城疫癥狀相似,必須作鑒別診斷。
傳染性支氣管炎引起產蛋下降的同時有呼吸道癥狀,產畸形小蛋,而減蛋綜合征產薄殼蛋、軟殼蛋和無殼蛋,易于區別;而非典型新城疫則在產蛋減少的同時有消化道癥狀,如下痢、全群采食減少,有個別死亡現象,剖檢死雞,消化道出血,產出的蛋蒼白,而元軟殼和無殼蛋;而維生素礦物質缺乏時,產蛋減少和蛋殼變劣為逐漸發生,改善飼料5~7天后即可恢復正常,而減蛋綜合征則持續4~6周。有產蛋下降的疾病還有傳染性腦脊髓炎、雞敗血支原體病及包涵體性肝炎等。但患病雞所產的蛋基本正常。
[血清學診斷要點]
1.血凝(HA)試驗和血凝抑制(HI)試驗
(1)HA試驗 一般采用微量法,在微量凝集反應板上,從第2孔至11孔,用微量移液器每孔加人生理鹽水0.05毫升,第1、2孔分別加10倍稀釋的病毒0.05毫升,從第2孔起,依次作倍數稀釋,至第10孑L,最后棄0.05毫升。每孔加人1%雞紅細胞懸液0.05毫升,設不加病毒的紅細胞對照孔,立即在微量振蕩器上搖勻,置室溫(18~2513)30分鐘左右觀察結果。以
使紅細胞發生100%凝集的最高稀釋度作為血凝價。
(2)HI試驗 常采用微量法,血清直接在抗原中作倍數稀釋。操作時先取4單位抗原依次加入2—11孔,最后孔(12孔)加生理鹽水或PBS。第1孔加8單位的抗原。然后吸取待檢血清0.05毫升最后孔中(血清對照),混合后吸0.05毫升于第1孔,依次倍比稀釋至11孔,棄去0.05毫升,置室溫(18~25℃)下作用10分鐘,再每孔加入1%雞紅細胞懸液0.05毫升,振蕩混合靜置30分鐘,判定結果。以完全抑制凝集的血清最大稀釋度為該血清的HI滴度,每次測定應設已知滴度的標準陽性血清對照和4單位病毒對照。待檢血清的抑制價在8倍以上為陽性。
2.瓊脂擴散試驗 抗原的制備可將種毒經尿囊腔接種于13—14日齡鴨胚,接種后96小時收集鴨胚尿液,經3000轉/分離心30分鐘,取上清,加入甲醛使終濃度為0.2%。置37度溫
箱中作用48小時后,經40 000轉/分離心2小時,棄上清,沉淀物按原液量的1/20加入滅菌生理鹽水,用注射器充分吹打溶解,再經3 000轉/分離心20分鐘,取上清。將沉淀物再加少量
滅菌生理鹽水充分吹打離心。將每次離心的上清液混合在一起,用滅菌生理鹽水補充到尿液的1/10量,作為瓊擴抗原。瓊脂板的制備,是在100毫升pH5。6~6.4的PBS中加入氯化鈉8克、瓊脂糖1克、10%的硫柳汞0.1毫升,充分煮沸后,每個平皿注入18毫升,待瓊脂自然凝固后,置普通冰箱中保存備用。試驗時打孔經4毫米、孔間距3毫米的7孔梅花孔,中心孔加抗原,周圍孔加待檢血清、陰性血清和陽性血清,置3713溫箱中,保持一定濕度,經24—48小時觀察結果。:抗原與待檢血清間出現特異性沉淀線者,判為陽性。
3.其他血清學診斷方法 病毒中和試驗也是比較敏感、特異的方法。EDS-76病毒能致CPE,并產生核內包涵體,這種作用可被特異性抗血清所中和,因此,本法也用于檢驗EDS-76病毒抗原或血清抗體。免疫熒光試驗與HI試驗一樣敏感,操作方法同I型腺病毒的熒光診斷法。至今國內外學者已建立了常規ELISA競爭性EILSA和斑點ELISA用于EDS-76的診斷。
【治療】
【防治措施】 本病無特異性治療方法,只能對癥治療,可適當添加微量元素和維生素,可促進其產蛋恢復。預防接種是防制本病的根本措施,可用減蛋綜合癥油乳劑苗在120日齡與傳染性支氣管炎苗、新城疫苗同時注射免疫,如為種雞,為確保其免疫效果:可在70日齡先免疫一次減蛋綜合癥油乳劑苗,再在120日齡免疫一次。在進行其他弱毒苗免疫時,應選用無其他特殊病原(SPF)尤其是不含減蛋綜合征病毒的疫苗,飼養管理上應注意雞、鴨、鵝不能混養,搞好平時的衛生消毒工作。
1.衛生管理措施 對該病尚無特效藥物進行治療,所以必須加強衛生管理措施。
(1)由于EDS-76是垂直傳播,因此,因注意不能使用來自感染雞群的種蛋。
(2)病毒能在糞便中存活,具有抵抗力,因此要有合理有效的衛生管理措施。嚴格控制外人及野鳥進入雞舍,以防疾病傳播。
(3)對肉用雞采取“全進、全出”的飼養方式,對空雞舍全面清潔及消毒后,空置一段時間方可進雞。對種雞采取雞群凈化措施,即將40周齡以上的雞所產蛋孵化成雛后,分成若干小組,隔開飼養,每隔6周用HI驗測定抗體,一般測定10%~25%的雞,淘汰陽性雞。直到40周齡時,100%陰性小雞繼續養殖。
2.免疫預防 已研制出EDS-76油乳劑滅活苗、雞減蛋綜合征蜂膠苗等,于雞群開產前2—4周注射0.5毫升,由于本病毒的免疫原性較好,對預防減蛋綜合征的發生具有良好的效果。可保護一個產蛋周期。
本病于1976年發現并在世界各國流行,使產蛋量下降20%~40%,嚴重影響蛋雞業的發展,我國也存在此病。
其臨床特征為雞群產蛋突然下降,大量出現軟殼蛋和畸形蛋,蛋殼顏色變淺。
該病在許多養雞國家如法國、英國、德國、意大利、匈牙利、澳大利亞、美國、韓國、日本等相繼報道該病。我國是1992年證實有該病的存在。
【病因/病原】 引起本病的病原為一種腺病毒,對雞、火雞及鴨的紅細胞有凝集性,這與其他腺病毒只能凝集哺乳動物紅細胞不同。病毒存在于鴨體內及病雞的輸卵管、咽喉部及病雞糞便和蛋內。它不能使鴨、鵝發病,病毒對外界抵抗力較強。
1.病原特性 雞減蛋綜合征(EDS-76)病毒是腺病毒屬的病毒。病毒粒子大小為76—80納米,呈20面體對稱,是無囊膜的雙股DNA病毒,衣殼的結構,殼粒的數目等均具有典型腺病毒的特征。對乙醚不敏感,pH耐受范圍廣,如pH3時不死。加熱5612可存活3小時,60C30分鐘喪失致病性,70℃20分鐘完全滅活,室溫條件下,至少可存活6個月以上。0.1%甲醛48小時,0.3%甲醛24小時可使病毒滅活。
EDS-76病毒能凝集雞、鴨、鵝、鴿等禽類的紅細胞。目前世界各地所分離到的EDS-76病毒只有1個血清型。
EDS-76病毒能在鴨胚和鵝胚中增殖,也能在鴨腎細胞、鴨胚成纖維細胞、鴨胚肝細胞、雞胚肝細胞、雞腎細胞和鵝胚成纖維細胞培養物上良好生長。
2.病料的采取和處理 采取病雞的輸卵管、泄殖腔、鼻黏膜、變性卵泡、無殼軟蛋等作為被檢材料。把組織磨碎制成乳劑。凍融3次,離心,取上清液,加入青、鏈霉素各1000單位(微克)/毫升,置于4度作用2小時。對其他病料作無菌處理后,供病毒分離和攻毒用。
3.病原的分離培養
(1)雞胚接種 取處理過的病料接種9~12日齡鴨胚的尿囊腔,38℃繼續孵育,棄去24小時內死胚,收獲48~96小時存活的鴨胚尿囊液,將收獲的鴨胚尿囊液繼續接種10—12日齡鴨胚尿囊腔進行傳代培養。每代鴨胚尿囊液都用雞紅細胞做血凝試驗檢測尿囊液中的血凝素,即使對陰性尿囊液也應至少傳2—3代。王川慶(1994)應用平板紅細胞HA試驗對EDS-76病毒進行了快速定性檢驗,此法可用于種毒的篩選。
(2)細胞培養 將病料接種于已長成單層的鴨胚成纖維細胞,37℃繼續培養數日,觀察致細胞病變效應(CPE)和核內包涵體,然后收獲,反復凍融,做血凝試驗,如無CPE,則應至少盲傳2~3代。
4.病毒的鑒定
(1)人工感染試驗 用分離毒株接種無EDS-76抗體的產蛋雞,可觀察到與自然病例相同的癥狀及產蛋異常變化。
(2)用已知EDS-76陽性血清與收獲的HA陽性尿囊液做HI試驗,確定之。
此外,免疫熒光和病毒中和試驗也可用于病毒的鑒定。
【病因附圖】
【流行病學】 1.易感動物和發病日齡。各日齡的雞均可感染,產褐色殼蛋的肉用雞的種母雞最易感,產白色殼蛋的母雞患病率低。在產蛋高峰期和接近產蛋高峰期發病高潮,其自然宿主是鴨或野鴨。
2.傳播途徑 雞體內的病毒可經種蛋傳染給下代雛雞,這是本病傳播的重要方式,病毒在體內長期潛伏,一直到產蛋高峰期才發病,另一種傳播方式是污染飼料、飲水,經消化道感染健康雞,傳播緩慢,同時有些弱毒疫苗是由非特異性病原的雞胚制作的,其中含有EDS-76,注射或飲水且易于傳播本病。雞鴨混養,注射針頭也可以傳播此病。
各種年齡的雞對EDS-76病毒都易感。鴨、鵝是自然宿主。有報道珍珠雞可被自然感染,并可產生軟殼蛋,未見鳥骨雞、火雞、雉雞在自然條件下被感染。從某些野禽(白鷺、鯡魚鷗、貓頭鷹、鸛等)的血清血檢出了EDS-76病毒抗體。
病毒經受精卵垂直傳播是EDS-76病毒的主要傳播方式。雞與雞之間接觸以及被病毒污染的飲水、飼料和器具,帶毒的鴨、鸛和某些野禽,也起到傳播的作用。
EDS-76病毒水平傳播的速度較慢,且有時呈間斷性,有資料介紹,經11周的時間,在籠養雞舍才引起全群感染,在墊草上雞與雞之間的傳播通常較快。
母雞經口腔途徑感染后,病毒先在鼻黏膜進行復制,形成病毒血癥。被感染后3—4天,病毒在全身淋巴組織,尤其是脾和胸腺中復制。在感染后7~20天,病毒侵入生殖系統,在輸卵管狹部蛋殼分泌腺大量復制。在性未成熟前不致使雞發病,至性成熟前、后,可能是由于激素和應激因素的作用,使病毒活化,在蛋雞進入產蛋高峰期前后(一般在26—45周齡)出現蛋殼異常、蛋體畸形,產蛋量突然下降(一般達20%~5096),持續期一般達6—10周。有的被感染雞群出現產蛋期推遲,產蛋率上升緩慢,不能達到產蛋高峰期應出現的產蛋率等流行特點。
雞被EDS-76病毒人工感染第5—6天,用血凝抑制試驗或間接免疫熒光試驗可測出抗體的存在,4~5周時抗體效價達到高峰。感染雞在出現高HI抗體效價時仍能排毒,而有些排毒雞則不出現抗體。有些雞群含有經卵而受感染的雞,在生長期間并不顯示出抗體,而只是隨著出現臨床癥狀才顯示出抗體。因此,在存在本病的地區的一個雞群,即便在20周齡時,所有的雞經血清學檢驗為陰性,也不能保證沒有受到感染。抗體可通過卵黃傳遞,這種經被動免疫而獲得的抗體的半衰期為3天。雛雞所獲得的母源抗體近于不能測出的時候,才能誘發主動抗體的形成。
【病理學】 通常變化不明顯,在產無殼蛋和異常蛋的雞可見輸卵管子宮粘膜肥厚,且有白色滲出物和干酪樣物,有時可見輸卵管萎縮,粘膜有炎癥,這些變化無診斷意義。 1.臨床病理學 本病大體病變不明顯,有時可見卵巢靜止不發育和輸卵管萎縮,少數病例可見子宮水腫,腔內有白色滲出物或干酪樣物,卵泡有變性和出血現象。人工感染時可見脾充血、腫大,偶見子宮內有薄膜包裹的卵黃和少量水樣蛋清。2。病理組織學 主要表現為輸卵管和子宮黏膜明顯水腫,腺體萎縮,并有淋巴細胞、漿細胞和異嗜性白細胞浸潤,在血管周圍形成管套現象,上皮細胞變性壞死,在上皮細胞中可見嗜伊紅的核內包涵體,子宮腔內滲出物中混有大量變性壞死的上皮細胞和異嗜性白細胞。少數病例可見卵巢間質中有淋巴細胞浸潤,淋巴濾泡數量增多,體積增大,脾臟紅、白髓不同程度增生。
【病理學圖】
【癥狀】 初產雞群產蛋率上升到50%以后即開始出現癥狀,大多數發生在26~32周齡(此時正值產蛋高峰期),病雞食欲、精神、糞便均正常,但輸卵管中蛋殼分泌腺受病毒破壞,卵泡發育排卵受影響,出現產蛋減少和蛋殼變劣,蛋的破損率高。開始發病時出現殼色變白,產蛋量減少,逐漸下降20%~40%,同時出現大量薄殼、軟殼、無殼和畸形蛋。蛋殼表面粗糙呈砂紙樣,正常蛋僅占70%左右,有些雞還將所產的蛋吃掉,病程一般持續4~6周,隨后逐漸恢復,經10周恢復正常,有此病的雞蛋不宜作種蛋孵化。
EDS-76最初癥狀是有色蛋殼的色澤消失。緊接著產生薄殼、軟殼或無殼蛋。薄殼蛋的殼質經常是粗糙的。病雞群生產的外觀正常的蛋受精率和孵化率不呈現顯著異常。但也有報道,種雞群發生EDS-76時,種蛋的孵化率降低,同時出現弱雛。發病雞群的產蛋量突然下降。產蛋量下降通常發生于產蛋高峰期前后,產蛋量下降可達20%~50%,持續期為4—10周左右,產蛋量的恢復十分緩慢。有的早期感染EDS-76的雞群出現產蛋期推遲,產蛋率上升緩慢,且達不到產蛋高峰應有的產蛋率。褪色的薄殼蛋、脆殼蛋往往出現在產蛋減少前24~48小時,這一特征癥狀有助于將本病區別于其他病因引起的產蛋減少癥。
【癥狀圖】
【診斷】 凡有產無殼蛋、軟皮蛋、破蛋及褐殼蛋褪色等異常蛋的產蛋下降,即可懷疑本病,確診需經實驗室診斷。由于該病癥有關方面與維生素缺乏、微量元素缺乏及傳染性支氣管炎、新城疫癥狀相似,必須作鑒別診斷。
傳染性支氣管炎引起產蛋下降的同時有呼吸道癥狀,產畸形小蛋,而減蛋綜合征產薄殼蛋、軟殼蛋和無殼蛋,易于區別;而非典型新城疫則在產蛋減少的同時有消化道癥狀,如下痢、全群采食減少,有個別死亡現象,剖檢死雞,消化道出血,產出的蛋蒼白,而元軟殼和無殼蛋;而維生素礦物質缺乏時,產蛋減少和蛋殼變劣為逐漸發生,改善飼料5~7天后即可恢復正常,而減蛋綜合征則持續4~6周。有產蛋下降的疾病還有傳染性腦脊髓炎、雞敗血支原體病及包涵體性肝炎等。但患病雞所產的蛋基本正常。
[血清學診斷要點]
1.血凝(HA)試驗和血凝抑制(HI)試驗
(1)HA試驗 一般采用微量法,在微量凝集反應板上,從第2孔至11孔,用微量移液器每孔加人生理鹽水0.05毫升,第1、2孔分別加10倍稀釋的病毒0.05毫升,從第2孔起,依次作倍數稀釋,至第10孑L,最后棄0.05毫升。每孔加人1%雞紅細胞懸液0.05毫升,設不加病毒的紅細胞對照孔,立即在微量振蕩器上搖勻,置室溫(18~2513)30分鐘左右觀察結果。以
使紅細胞發生100%凝集的最高稀釋度作為血凝價。
(2)HI試驗 常采用微量法,血清直接在抗原中作倍數稀釋。操作時先取4單位抗原依次加入2—11孔,最后孔(12孔)加生理鹽水或PBS。第1孔加8單位的抗原。然后吸取待檢血清0.05毫升最后孔中(血清對照),混合后吸0.05毫升于第1孔,依次倍比稀釋至11孔,棄去0.05毫升,置室溫(18~25℃)下作用10分鐘,再每孔加入1%雞紅細胞懸液0.05毫升,振蕩混合靜置30分鐘,判定結果。以完全抑制凝集的血清最大稀釋度為該血清的HI滴度,每次測定應設已知滴度的標準陽性血清對照和4單位病毒對照。待檢血清的抑制價在8倍以上為陽性。
2.瓊脂擴散試驗 抗原的制備可將種毒經尿囊腔接種于13—14日齡鴨胚,接種后96小時收集鴨胚尿液,經3000轉/分離心30分鐘,取上清,加入甲醛使終濃度為0.2%。置37度溫
箱中作用48小時后,經40 000轉/分離心2小時,棄上清,沉淀物按原液量的1/20加入滅菌生理鹽水,用注射器充分吹打溶解,再經3 000轉/分離心20分鐘,取上清。將沉淀物再加少量
滅菌生理鹽水充分吹打離心。將每次離心的上清液混合在一起,用滅菌生理鹽水補充到尿液的1/10量,作為瓊擴抗原。瓊脂板的制備,是在100毫升pH5。6~6.4的PBS中加入氯化鈉8克、瓊脂糖1克、10%的硫柳汞0.1毫升,充分煮沸后,每個平皿注入18毫升,待瓊脂自然凝固后,置普通冰箱中保存備用。試驗時打孔經4毫米、孔間距3毫米的7孔梅花孔,中心孔加抗原,周圍孔加待檢血清、陰性血清和陽性血清,置3713溫箱中,保持一定濕度,經24—48小時觀察結果。:抗原與待檢血清間出現特異性沉淀線者,判為陽性。
3.其他血清學診斷方法 病毒中和試驗也是比較敏感、特異的方法。EDS-76病毒能致CPE,并產生核內包涵體,這種作用可被特異性抗血清所中和,因此,本法也用于檢驗EDS-76病毒抗原或血清抗體。免疫熒光試驗與HI試驗一樣敏感,操作方法同I型腺病毒的熒光診斷法。至今國內外學者已建立了常規ELISA競爭性EILSA和斑點ELISA用于EDS-76的診斷。
【治療】
【防治措施】 本病無特異性治療方法,只能對癥治療,可適當添加微量元素和維生素,可促進其產蛋恢復。預防接種是防制本病的根本措施,可用減蛋綜合癥油乳劑苗在120日齡與傳染性支氣管炎苗、新城疫苗同時注射免疫,如為種雞,為確保其免疫效果:可在70日齡先免疫一次減蛋綜合癥油乳劑苗,再在120日齡免疫一次。在進行其他弱毒苗免疫時,應選用無其他特殊病原(SPF)尤其是不含減蛋綜合征病毒的疫苗,飼養管理上應注意雞、鴨、鵝不能混養,搞好平時的衛生消毒工作。
1.衛生管理措施 對該病尚無特效藥物進行治療,所以必須加強衛生管理措施。
(1)由于EDS-76是垂直傳播,因此,因注意不能使用來自感染雞群的種蛋。
(2)病毒能在糞便中存活,具有抵抗力,因此要有合理有效的衛生管理措施。嚴格控制外人及野鳥進入雞舍,以防疾病傳播。
(3)對肉用雞采取“全進、全出”的飼養方式,對空雞舍全面清潔及消毒后,空置一段時間方可進雞。對種雞采取雞群凈化措施,即將40周齡以上的雞所產蛋孵化成雛后,分成若干小組,隔開飼養,每隔6周用HI驗測定抗體,一般測定10%~25%的雞,淘汰陽性雞。直到40周齡時,100%陰性小雞繼續養殖。
2.免疫預防 已研制出EDS-76油乳劑滅活苗、雞減蛋綜合征蜂膠苗等,于雞群開產前2—4周注射0.5毫升,由于本病毒的免疫原性較好,對預防減蛋綜合征的發生具有良好的效果。可保護一個產蛋周期。