無菌檢查法系指檢查藥品與敷料是否無菌的一種方法。 無菌檢查的全部過程應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止微生物的污染。 生物制品應(yīng)按衛(wèi)生部《生物制品制造及檢定規(guī)程》中有關(guān)無菌檢查的規(guī)定辦理。

培養(yǎng)基及其制備方法

1.需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基(硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基) 酪胨（胰酶水解） 15g 氯化鈉 2.5g 葡萄糖 5g 新鮮配制的0.1％刃天青溶液 1.0ml L－胱氨酸 0.5g (或新鮮配制的0.2％亞甲藍(lán)溶液0.5ml) 硫乙醇酸鈉 0.5g 瓊脂 0.5～0.7g (或硫乙醇酸0.3ml) 水 1000ml 酵母浸出粉 5g 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水內(nèi)，微溫溶解后，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，按量加入葡萄糖和刃天青溶液，搖勻，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.1±0.2，分裝，115℃滅菌30分鐘。 在無菌檢查接種前, 培養(yǎng)基指示劑氧化層的顏色不得超過培養(yǎng)基深度約1/5。否則,須經(jīng)水浴煮沸加熱, 只限加熱一次。

2.霉菌培養(yǎng)基 胨 5g 磷酸氫二鉀（K2HPO4) 1g 酵母浸出粉 2g 硫酸鎂（MgSO4·7H2O） 0.5g 葡萄糖 20g 蒸餾水 1000ml 除葡萄糖外，取上述成分加入水內(nèi)，微溫溶解后，調(diào)節(jié)pH約6.8，煮沸,加葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為6.4±0.2，分裝，115℃滅菌20分鐘。

３.選擇性培養(yǎng)基 (1) 對氨基苯甲酸培養(yǎng)基（用于磺胺類藥物的無菌檢查） 照上述需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基及霉菌培養(yǎng)基的處方及制法，各加對氨基苯甲酸0.125g，溶解后搖勻，分裝，115℃滅菌30分鐘。

(2) 吐溫培養(yǎng)基（用于油劑藥品的無菌檢查） 照上述需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基及霉菌培養(yǎng)基的處方及制法，各加10ml的吐溫80，搖勻后，分裝， 115℃滅菌30分鐘。

4.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 胨 10g 肉浸液 1000ml 氯化鈉 5g 取胨與氯化鈉，加入肉浸液內(nèi)，微溫溶解后，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，濾清，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2，分裝，115℃滅菌30分鐘。

5.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 照上述營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的處方及制法，加入15～20g瓊脂，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2，分裝，115℃滅菌30分鐘。

6.0.5％葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 胨 10g 葡萄糖 5g 氯化鈉 5g 肉浸液 1000ml 取胨與氯化鈉加入肉浸液內(nèi)，微溫溶解后，調(diào)節(jié)pH為弱堿性，煮沸，加葡萄糖溶解后，搖勻，濾清，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為7.2±0.2， 分裝，115℃滅菌30分鐘。　　

7.霉菌瓊脂培養(yǎng)基 照霉菌培養(yǎng)基的處方及制法，加入15～20g瓊脂，調(diào)節(jié)pH值使滅菌后為6.4±0.2,分裝, 115℃滅菌20分鐘，趁熱斜放使凝固成斜面。 上述培養(yǎng)基分別按15ml與40ml分裝于試管中，裝量約為試管高度的2/5，在115℃滅菌30分鐘。細(xì)菌培養(yǎng)基經(jīng)30～35℃培養(yǎng)48小時，霉菌培養(yǎng)基經(jīng)20～25℃培養(yǎng)72小時后，應(yīng)無菌生長。 培養(yǎng)基的質(zhì)量應(yīng)通過靈敏度檢查。

培養(yǎng)基靈敏度檢查法

1.菌種 (1)藤黃微球菌[CMCC(B)28001] (2)生孢梭菌[CMCC(B)64941] (3)白色念珠菌[CMCC(F)98001]　　　　　　　　　　　　

2.操作 取藤黃微球菌的營養(yǎng)瓊脂斜面和白色念珠菌的霉菌瓊脂斜面的新鮮培養(yǎng)物分別用0.9％滅菌氯化鈉溶液制成均勻的菌懸液；將生孢梭菌的不含瓊脂需氣菌、厭 氣菌培養(yǎng)基的新鮮培養(yǎng)物，吸入滅菌離心管，離心，棄去上清液,菌體用0.9％滅菌氯化鈉溶液制成均勻菌懸液。分別取上述菌懸液用0.9％滅菌氯化鈉溶液稀釋至與細(xì)菌濁度 標(biāo)準(zhǔn)管相同的濃度, 然后, 作10倍系列稀釋并計數(shù)。