2004年2～3月份，某豬場出現(xiàn)有陰唇紅腫、乳房隆起等癥狀的育肥豬和屢配不孕的種豬，經(jīng)綜合診斷為豬玉米赤霉烯酮中毒，現(xiàn)報告如下。
1、發(fā)病情況調(diào)查該豬場有2～3月齡的杜×長×大三元雜交育肥豬165頭，20～25日齡的未斷奶三元雜交仔豬81頭，長×大二元雜交后備母豬5頭、斷乳母豬12頭、哺乳母豬10頭，杜洛克公豬2頭。從2月～3月中旬，約55%的育肥豬（90頭)出現(xiàn)陰唇紅腫、乳房隆起的癥狀；后備母豬頻現(xiàn)發(fā)情癥狀，但只有2頭配上種，其余3頭1個多月仍未配上；斷乳母豬發(fā)情延遲，1個多月僅配上5頭，其余7頭1個多月仍未配上；屢配不孕的母豬占可配種母豬總數(shù)的58.8%（10/17).據(jù)畜主估算，與往年同期相比，這至少導(dǎo)致少產(chǎn)50頭仔豬。發(fā)病后，在育肥豬飼料中加過抗菌素、多種維生素和制霉菌素，但療效不明顯。種豬在配種前1～2月內(nèi)、仔豬在斷奶后均注射過正規(guī)生物藥廠生產(chǎn)的豬偽狂犬病、豬細小病毒病、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗和豬瘟弱毒疫苗等。起初懷疑疫苗質(zhì)量問題，電話詢問使用同批疫苗的另一個養(yǎng)豬專業(yè)戶，該專業(yè)戶反應(yīng)其養(yǎng)的大小豬外觀均正常，主要差別是使用的飼料來源不同。經(jīng)查，由于當(dāng)時玉米價高且收購緊張，鄭州某豬場自1月20日以來轉(zhuǎn)用了來自某飼料廠的玉米及其濃縮豬料，換用該廠飼料前，該場所有豬均未見類似異常情況。與飼料廠商聯(lián)系后，隨訪附近使用該廠混合料的一個養(yǎng)豬戶，其飼養(yǎng)的育肥豬也發(fā)生上述同類癥狀，因而懷疑飼料問題。
2、 臨床癥狀所有病豬體況、體溫未見明顯變化，沒有死亡。育肥豬除精神輕度興奮、食欲輕度下降外，主要表現(xiàn)泌尿生殖器官的發(fā)情樣癥狀。性未成熟的中、小母豬陰唇紅腫，色鮮紅，外翻；乳房隆起，乳頭腫大、發(fā)紅；少數(shù)豬的紅腫陰唇擦破，使豬圈墻上和豬體上留有血跡。部分未斷奶的小母豬也出現(xiàn)陰唇紅腫。去勢中、小公豬包皮腫大，乳房隆起，乳頭腫大；未去勢小公豬陰莖包皮腫大明顯，還常爬跨其它豬。有8頭后備母豬頻現(xiàn)發(fā)情癥狀，卻多次配種不孕；10頭斷乳母豬發(fā)情期延遲或發(fā)情不明顯，其中7頭多次配種不孕，3頭出現(xiàn)假孕，給這些母豬注射雌性激素療效不明顯；有2頭妊娠1個月的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎。哺乳母豬外觀、泌乳基本正常。2頭種公豬性欲降低，多次自然交配前注射過丙酸睪酮雄性激素。
3 、飼料檢驗3.1 感觀檢查畜主和作者均懷疑飼料問題，先檢查飼料。該豬場購買的玉米直接堆放在新蓋平房的水泥地面上，開包檢查，聞有霉味，發(fā)現(xiàn)有的玉米粒表面長有白色綿絲狀物；粉碎的剩余玉米也有霉味。
3.2 病原分離培養(yǎng)取玉米粒和混合飼料樣，0.1%升汞消毒1min，無菌蒸餾水沖洗，然后將樣品分別無菌接種于加有抗菌素的卡貝克（czapek)瓊脂培養(yǎng)基平皿各5個，另設(shè)3個無菌蒸餾水對照培養(yǎng)基平皿，25～28℃培養(yǎng)72h.接樣培養(yǎng)基都長有白色絨絲狀物，取培養(yǎng)物涂片，乳酸酚棉藍染色鏡檢，見有分隔菌絲和孢子，大分生孢子呈鐮刀狀、中間有2～5個隔，小分生孢子多為卵圓形細胞；而對照培養(yǎng)基平皿均未見類似菌落。
3.3 毒素檢測隨機抽取玉米樣和混合飼料樣，玉米赤霉烯酮毒素提取和氣相色譜測定參考文獻（陳必芳等，1994)的方法進行。測得玉米樣和混合飼料樣中玉米赤霉烯酮的含量分別為2.51mg/kg和1.85mg/kg.挑取上述病原分離培養(yǎng)物，以pH8.0的PBS液稀釋，用0.3μm濾膜過濾除菌，將少量過濾液接種到長成單層的PK15細胞上，36h后，細胞質(zhì)濃縮、顆粒化，核濃縮、碎裂、液化，細胞呈中毒樣病變；而未接種過濾液的細胞生長正常。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、實驗室檢查，初步診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。
4 、處理措施立即停用有問題的玉米及其混合料，換用優(yōu)質(zhì)玉米配制的新鮮飼料，在飼料中多加1倍的VC、VE、VA，并補喂一些青綠飼料，如此連續(xù)7d，癥狀顯著減輕。15d后隨訪，育肥豬痊愈，種豬繁殖性能恢復(fù)正常，沒有出現(xiàn)新的病例。
5、 小結(jié)與討論綜合發(fā)病情況調(diào)查、臨床癥狀、實驗室檢查和處理結(jié)果，診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。鐮刀菌是一種所謂的“田間真菌”，它的適宜生長溫度一般在20～22℃、相對濕度在80%～90%，另有些鐮刀菌在10℃低溫及低水分條件下仍可生長。玉米、小麥等糧食與飼料在田間和儲存過程中均容易受到鐮刀菌的污染，并產(chǎn)生玉米赤霉烯酮（ZEN)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON)和T-2毒素等；據(jù)調(diào)查，我國約1/3的玉米受到鐮刀菌及其DON、ZEN毒素的嚴重污染（王若軍等，2003).2003年秋玉米收割前2個月，河南大部分地區(qū)延綿下雨，氣溫在10～20℃間，出現(xiàn)往年少有的高濕天氣，這為鐮刀菌和ZEN的污染提供了適宜的客觀條件。ZEN對畜禽的毒副作用主要表現(xiàn)為雌激素中毒癥，引起豬和牛的不孕或流產(chǎn)；在畜禽中，豬尤其是后備母豬對ZEN最為敏感，當(dāng)飼料中含有1mg/kg以上的ZEN時就可以引起豬的雌激素中毒癥。國外推薦母豬飼料中ZEN的最高允許含量為1mg/kg（陳必芳等，1995)（歐洲推薦的飼料最高含量標準為0.5mg/kg)，我國ZEN的最高允許含量為0.1mg/kg.作者在飼料中觀察到了鐮刀菌，而且還檢測出配合飼料中ZEN含量為1.85mg/kg，遠遠超過我國相關(guān)規(guī)定，也超過了國外的最高允許含量，證明鄭州某豬場飼料中ZEN污染超標。本報告中病豬的癥狀與斯特勞等（2000)和曾蕓等（1999)描述的癥狀相一致。2003年，河南農(nóng)村不少豬場和專業(yè)戶反映母豬繁殖障礙問題，曾認為是豬細小病毒病、藍耳病、附紅細胞體病等傳染病所致，但防治效果不盡一致。由于傳染性和非傳染性因素均可引起繁殖障礙，本報告提示，有時應(yīng)注意鑒別診斷霉菌毒素ZEN中毒引起的繁殖障礙。
1、發(fā)病情況調(diào)查該豬場有2～3月齡的杜×長×大三元雜交育肥豬165頭，20～25日齡的未斷奶三元雜交仔豬81頭，長×大二元雜交后備母豬5頭、斷乳母豬12頭、哺乳母豬10頭，杜洛克公豬2頭。從2月～3月中旬，約55%的育肥豬（90頭)出現(xiàn)陰唇紅腫、乳房隆起的癥狀；后備母豬頻現(xiàn)發(fā)情癥狀，但只有2頭配上種，其余3頭1個多月仍未配上；斷乳母豬發(fā)情延遲，1個多月僅配上5頭，其余7頭1個多月仍未配上；屢配不孕的母豬占可配種母豬總數(shù)的58.8%（10/17).據(jù)畜主估算，與往年同期相比，這至少導(dǎo)致少產(chǎn)50頭仔豬。發(fā)病后，在育肥豬飼料中加過抗菌素、多種維生素和制霉菌素，但療效不明顯。種豬在配種前1～2月內(nèi)、仔豬在斷奶后均注射過正規(guī)生物藥廠生產(chǎn)的豬偽狂犬病、豬細小病毒病、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗和豬瘟弱毒疫苗等。起初懷疑疫苗質(zhì)量問題，電話詢問使用同批疫苗的另一個養(yǎng)豬專業(yè)戶，該專業(yè)戶反應(yīng)其養(yǎng)的大小豬外觀均正常，主要差別是使用的飼料來源不同。經(jīng)查，由于當(dāng)時玉米價高且收購緊張，鄭州某豬場自1月20日以來轉(zhuǎn)用了來自某飼料廠的玉米及其濃縮豬料，換用該廠飼料前，該場所有豬均未見類似異常情況。與飼料廠商聯(lián)系后，隨訪附近使用該廠混合料的一個養(yǎng)豬戶，其飼養(yǎng)的育肥豬也發(fā)生上述同類癥狀，因而懷疑飼料問題。
2、 臨床癥狀所有病豬體況、體溫未見明顯變化，沒有死亡。育肥豬除精神輕度興奮、食欲輕度下降外，主要表現(xiàn)泌尿生殖器官的發(fā)情樣癥狀。性未成熟的中、小母豬陰唇紅腫，色鮮紅，外翻；乳房隆起，乳頭腫大、發(fā)紅；少數(shù)豬的紅腫陰唇擦破，使豬圈墻上和豬體上留有血跡。部分未斷奶的小母豬也出現(xiàn)陰唇紅腫。去勢中、小公豬包皮腫大，乳房隆起，乳頭腫大；未去勢小公豬陰莖包皮腫大明顯，還常爬跨其它豬。有8頭后備母豬頻現(xiàn)發(fā)情癥狀，卻多次配種不孕；10頭斷乳母豬發(fā)情期延遲或發(fā)情不明顯，其中7頭多次配種不孕，3頭出現(xiàn)假孕，給這些母豬注射雌性激素療效不明顯；有2頭妊娠1個月的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎。哺乳母豬外觀、泌乳基本正常。2頭種公豬性欲降低，多次自然交配前注射過丙酸睪酮雄性激素。
3 、飼料檢驗3.1 感觀檢查畜主和作者均懷疑飼料問題，先檢查飼料。該豬場購買的玉米直接堆放在新蓋平房的水泥地面上，開包檢查，聞有霉味，發(fā)現(xiàn)有的玉米粒表面長有白色綿絲狀物；粉碎的剩余玉米也有霉味。
3.2 病原分離培養(yǎng)取玉米粒和混合飼料樣，0.1%升汞消毒1min，無菌蒸餾水沖洗，然后將樣品分別無菌接種于加有抗菌素的卡貝克（czapek)瓊脂培養(yǎng)基平皿各5個，另設(shè)3個無菌蒸餾水對照培養(yǎng)基平皿，25～28℃培養(yǎng)72h.接樣培養(yǎng)基都長有白色絨絲狀物，取培養(yǎng)物涂片，乳酸酚棉藍染色鏡檢，見有分隔菌絲和孢子，大分生孢子呈鐮刀狀、中間有2～5個隔，小分生孢子多為卵圓形細胞；而對照培養(yǎng)基平皿均未見類似菌落。
3.3 毒素檢測隨機抽取玉米樣和混合飼料樣，玉米赤霉烯酮毒素提取和氣相色譜測定參考文獻（陳必芳等，1994)的方法進行。測得玉米樣和混合飼料樣中玉米赤霉烯酮的含量分別為2.51mg/kg和1.85mg/kg.挑取上述病原分離培養(yǎng)物，以pH8.0的PBS液稀釋，用0.3μm濾膜過濾除菌，將少量過濾液接種到長成單層的PK15細胞上，36h后，細胞質(zhì)濃縮、顆粒化，核濃縮、碎裂、液化，細胞呈中毒樣病變；而未接種過濾液的細胞生長正常。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、實驗室檢查，初步診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。
4 、處理措施立即停用有問題的玉米及其混合料，換用優(yōu)質(zhì)玉米配制的新鮮飼料，在飼料中多加1倍的VC、VE、VA，并補喂一些青綠飼料，如此連續(xù)7d，癥狀顯著減輕。15d后隨訪，育肥豬痊愈，種豬繁殖性能恢復(fù)正常，沒有出現(xiàn)新的病例。
5、 小結(jié)與討論綜合發(fā)病情況調(diào)查、臨床癥狀、實驗室檢查和處理結(jié)果，診斷為鐮刀菌引起的豬玉米赤霉烯酮中毒。鐮刀菌是一種所謂的“田間真菌”，它的適宜生長溫度一般在20～22℃、相對濕度在80%～90%，另有些鐮刀菌在10℃低溫及低水分條件下仍可生長。玉米、小麥等糧食與飼料在田間和儲存過程中均容易受到鐮刀菌的污染，并產(chǎn)生玉米赤霉烯酮（ZEN)、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON)和T-2毒素等；據(jù)調(diào)查，我國約1/3的玉米受到鐮刀菌及其DON、ZEN毒素的嚴重污染（王若軍等，2003).2003年秋玉米收割前2個月，河南大部分地區(qū)延綿下雨，氣溫在10～20℃間，出現(xiàn)往年少有的高濕天氣，這為鐮刀菌和ZEN的污染提供了適宜的客觀條件。ZEN對畜禽的毒副作用主要表現(xiàn)為雌激素中毒癥，引起豬和牛的不孕或流產(chǎn)；在畜禽中，豬尤其是后備母豬對ZEN最為敏感，當(dāng)飼料中含有1mg/kg以上的ZEN時就可以引起豬的雌激素中毒癥。國外推薦母豬飼料中ZEN的最高允許含量為1mg/kg（陳必芳等，1995)（歐洲推薦的飼料最高含量標準為0.5mg/kg)，我國ZEN的最高允許含量為0.1mg/kg.作者在飼料中觀察到了鐮刀菌，而且還檢測出配合飼料中ZEN含量為1.85mg/kg，遠遠超過我國相關(guān)規(guī)定，也超過了國外的最高允許含量，證明鄭州某豬場飼料中ZEN污染超標。本報告中病豬的癥狀與斯特勞等（2000)和曾蕓等（1999)描述的癥狀相一致。2003年，河南農(nóng)村不少豬場和專業(yè)戶反映母豬繁殖障礙問題，曾認為是豬細小病毒病、藍耳病、附紅細胞體病等傳染病所致，但防治效果不盡一致。由于傳染性和非傳染性因素均可引起繁殖障礙，本報告提示，有時應(yīng)注意鑒別診斷霉菌毒素ZEN中毒引起的繁殖障礙。
