蛇床子為傘形科植物蛇床Chidium monnieri(L.)Cuss.的干燥成熟果實。2005版《中國藥典》一部采用高效液相色譜法測定其蛇床子素的含量。
一、高效液相色譜法
2005版《中國藥典》蛇床子含量測定項下：
色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（65：35）為流動相；檢測波長為322nm。理論板數按蛇床子素峰計算應不得低于2500。
供試品溶液的制備：取本品粉末（過三號篩）約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇25ml，密塞，稱定重量，放置2小時，超聲處理（功率300W，頻率50kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用無水乙醇補足減失的重量。精密量取上清液5ml，置10ml量瓶中，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
HPLC法測定蛇床子及其制劑中蛇床子素的含量，制備樣品時一般以50%乙醇、碳酸氫鈉飽和溶液、甲醇等為提取溶劑，按流動相系統分類介紹：
A：甲醇-水
此系統應用最多，常用的比例為：
①Agilent 1100 高效液相色譜儀(美國)；色譜柱為YWG-C18 (10μm,4.6mm×250mm)；流動相為甲醇-水(80：20)；檢測波長322nm；柱溫25℃。
②Waters高效液相色譜儀；C18色譜柱（Xterra column，pH1～12，5μm，3.9mm×190mm）；流動相為甲醇-水(75：75)；檢測波長322nm；柱溫28℃。
③WATERS 515 高效液相色譜儀；色譜柱為Kromasil C18柱(4.6mm×250mm, 5μm)；流動相為甲醇-水(73 ：27)；檢測波長322nm；柱溫35℃。
④日本島津LC-10A 高效液相色譜儀；Polaris C18色譜柱(150mm×4.6mm,5μm)；流動相為甲醇-水(62.5：37.5)；檢測波長為323nm；柱溫為30℃。
⑤日本島津LC-10A 高效液相色譜儀；流動相為甲醇-水(75：25)；檢測波長為325nm；柱溫為室溫。
⑥Waters 2460/2996高效液相色譜儀；流動相：甲醇-水(70：30)；檢測波長310nm；柱溫30℃。供試品溶液的制備：取本品5ml,加硅膠(60～200目,下同)3g拌勻,70℃烘干,移置硅膠柱(1～115cm,1g,干法裝柱)上,用石油醚( 60～90℃)-醋酸乙酯(65：35)混合溶液100 ml洗脫,洗脫液低溫揮干,殘渣加甲醇溶解并定容至5ml,搖勻,即得。（黃志海等，“HPLC法測定復方苦參洗劑中蛇床子素的含量” 中藥材，2005，28（5））
B：乙腈-水
①Waters 510高效液相色譜儀；色譜柱為Hypersil C18柱（5μm,4.6mm×250mm）；流動相為乙腈-水（54：46）；檢測波長321nm；柱溫為室溫。
②Waters 510/484/745B 色譜系統；Hypersil C18分析柱(150mm×4.6mm, 5μm)；流動相：乙腈-水(54：46)；測定波長321nm；柱溫室溫。供試品溶液的制備：精密吸取本品5mL,置分液漏斗中,用乙醚振搖提取3次,每次20mL,合并乙醚提取液,用5%氨溶液10mL洗滌,靜置分層,棄去氨溶液,傾取乙醚上清液。剩余少量乳化層用乙醚洗滌2次,每次5mL。合并乙醚液,揮干, 殘渣加乙醇溶解并轉移至25mL 量瓶中,加乙醇稀釋至刻度,搖勻,濾過。（朱山寅等，“HPLC 法測定膚陰凈洗液中蛇床子素的含量”，中草藥，2004，35（5））
③Waters 系列高效液相色譜儀；Kromasil-C18色譜柱(5μm,4.6mm×150mm,北京潮聲公司)；流動相為乙腈-水(52：48)；柱溫為室溫；檢測波長322nm。
C：甲醇-水-磷酸
①Waters 600 高效液相色譜儀；流動相為甲醇-水-磷酸(375：125：1)；檢測波長322nm；柱溫室溫。
②Agilent-1100 高效液相色譜系統；色譜柱為Nova-parkC18(250×4.6mm, 4μm ) (大連依利特科學儀器有線公司裝填)；流動相：甲醇-1%磷酸溶液(65：35)；柱溫室溫；檢測波長320nm。供試品溶液的制備：精密量取本品25ml, 加水25ml, 用乙醚振搖提取5次,每次20ml,合并乙醚液,蒸干,殘渣加石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(2：8)少量溶解, 加于中性氧化鋁柱(內徑2cm,100～200目,15g)上, 用石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(2：8)洗脫, 收集洗脫液80ml,于水溶上蒸干,殘渣加甲醇溶解,轉移至10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。（游勇基等，“高效液相色譜法測定祛風勝濕酒中蛇床子素的含量”，海峽藥學，2002，14（5））
D：甲醇-水-四氫呋喃
LC-10A高效液相色譜儀；色譜柱:Shimpack CLC - ODS (150mm×4.6mm,5μm)，保護柱：自填國產YWGC18H37(20mm×4.6mm,10μm)；流動相：甲醇-水-四氫呋喃( 70：40：5)；檢測波長317nm；柱溫35℃。
其它條件，如：孫海峰等HPLC測定祛腐二香栓中蛇床子素含量時，采用日立638250型HPLC儀。色譜柱為 Elite Hypersil ODS 柱( 5μm，4.6mm×150mm)；流動相：甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鈉溶液(62：38)；檢測波長322nm；柱溫25℃。
葉曉平等用RP-HPLC法同時測定蛇床子中蛇床子素、歐芹屬素乙和異茴芹素的含量。采用Agilent 1100 高效液相色譜儀；色譜柱為Vercopark Inertsil N-5 ODS (4.6mm×250mm,5μm)；流動相為1%醋酸-甲醇(梯度為0～30min1%醋酸95%～5%)；檢測波長254nm；柱溫30℃。
李遇伯等立測定骨疏丹中淫羊藿苷和蛇床子素含量，采用P200 Ⅱ型高效液相色譜儀；色譜柱為Hypersil ODS2 (250mm×4.6mm,5μm,大連依利特科學儀器有限公司)；流動相為甲醇-0.4%醋酸水溶液(65：35)；檢測波長為322nm；柱溫為室溫。
二、薄層掃描法
薄層掃描法測定蛇床子素的含量時，常用的展開劑為正己烷-醋酸乙酯和苯-乙酸乙酯。
曹智勇測定凍瘡涂膜劑中蛇床子素的含量，薄層色譜條件為：硅膠G薄層板；以正己烷-醋酸乙酯(6：1)為展開劑。薄層掃描條件為：λs=320nm,λR=260nm,線性參數SX=3 ,狹縫1.2mm×1.2mm,雙波長反射鋸齒形掃描。供試品溶液的制備方法：精密吸取本品5mL,加0.1mol/ L 的氫氧化鈉溶液20mL,邊加邊攪拌,靜置1小時,濾過,殘留物再加氫氧化鈉溶液15mL提取2次,水浴加熱提取5分鐘,濾過,合并氫氧化鈉溶液,以鹽酸調節pH3～4,以乙醚提取3次(40、30、30mL),合并乙醚液,回收乙醚,殘留物以甲醇溶解并定容至10mL量瓶中,作為供試品溶液。
馮盛等測定還春補力片中蛇床子素的含量，薄層色譜及薄層掃描條件：吸附劑：Merk 硅膠G60薄層板；展開劑：苯-乙酸乙酯(30：1)；顯色：于紫外光燈365nm下檢視。采用雙波長反射掃描法, λs=325nm,λR=271nm。
三、薄層熒光掃描法
劉杰采用薄層熒光掃描法測定氣血葆口服液中蛇床子素的含量，采用硅膠G薄層板, 以苯- 醋酸乙酯(30：1)為展開劑,采用熒光線性掃描, 光源為汞燈, K400濾光片,λEx=313nm,狹縫0.5mm×5mm,掃描速度5.0mm/s。
趙韶華等采用熒光掃描法測定八子補腎膠囊中蛇床子素的含量，采用熒光透射法線性掃描，激發波長為320nm，濾光片為1號。
龐志功等文以β-環糊精(β-Cyclodextrin, 簡寫為β-CD) 包含熒光法對原藥蛇床子中所含蛇床子素進行含量測定, RF540 型熒光分光光度計(日本島津),展開劑為苯-乙酸乙酯（9：1），刮取的蛇床子素斑點用95%乙醇分次洗脫。激發波長(λex ) 發射波長(λem ) 分別為320nm和420nm。
四、氣相色譜法
寧江松采用氣相色譜法測定凈陰靈中蛇床子素的含量。日本島津公司生產的GC- 14B 型氣相色譜儀；色譜柱為3mm×200cm玻璃柱，擔體為80～100目的Chromosorb W(AWDMCS)；固定相為5%的SE-30；柱溫250℃；檢測器FID；載氣為氮氣；流速為30ml/min；氫氣90kPa；空氣50 kPa。供試品溶液制備：精密量取凈陰靈50ml,置分液漏斗中,用氯仿提取5次,每次50m l,合并氯仿提取液,用無水硫酸鈉適量脫水,濾出氯仿液,濾楂用少量氯仿洗滌,合并濾液和洗液, 用旋轉蒸發器低溫蒸干,殘渣加氯仿使溶解。