5.3　溶血素

豬鏈球菌2型溶血素(suilysin，SLY)是細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中分泌的一種蛋白質(zhì)，是一種可被巰基活化的蛋白毒素，膽固醇對(duì)其溶血性具有不可逆的阻止作用[9]。其他一些血清型如1、1/2、4、5、14、15、17、19型和20型等亦能從其培養(yǎng)液中檢測(cè)出溶血素，其溶血活性與溫度、血清白蛋白、氧氣等因素相關(guān)，溶血素基因在細(xì)菌染色體中為單拷貝，全長(zhǎng)為1 494個(gè)核苷酸，編碼含497個(gè)氨基酸的蛋白，分子質(zhì)量為54 ku，N末端前27個(gè)氨基酸為信號(hào)肽。Norten等認(rèn)為豬溶血素可能在豬鏈球菌侵入和裂解細(xì)胞的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。Tenenbaum T等[10]的研究表明，溶血素陽(yáng)性的豬鏈球菌可以破壞脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞，從而突破腦脊液屏障，導(dǎo)致腦膜炎癥狀的發(fā)生。Vanier G等[11]通過(guò)試驗(yàn)證實(shí)，溶血素陽(yáng)性豬鏈球菌2型對(duì)豬腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用是隨濃度而改變的，在5 μg/mL時(shí)達(dá)到最大，而溶血素陰性細(xì)菌則無(wú)細(xì)胞毒性作用。

5.4　黏附素

黏附是病原菌建立定植和感染的前提。黏附素可分成18 ku和39 ku兩種，純化后的18 ku黏附素不僅具有強(qiáng)的免疫原性，而且能誘導(dǎo)小鼠體內(nèi)的殺菌活性。39 ku的黏附素存在于豬鏈球菌2型的無(wú)毒株和有毒株中，有一定的黏附活性，能提高豬鏈球菌對(duì)小鼠的致病性。

5.5　纖連蛋白結(jié)合蛋白

Greeff等克隆測(cè)序了豬鏈球菌2型的纖維蛋白結(jié)合蛋白(FBPS)，并提純了FBPS，證實(shí)它可以黏附到人的血纖維蛋白原和纖維蛋白原上，并對(duì)豬具有免疫原性，可以產(chǎn)生特異性抗體，在細(xì)菌定植靶器官的過(guò)程中也起了一定的作用，是一種值得重視的細(xì)菌非菌毛黏附素，也是一種豬鏈球菌2型新近鑒定的毒力因子[12]。

5.6　IgG結(jié)合蛋白

IgG結(jié)合蛋白，分子質(zhì)量60 ku，存在于多種豬鏈球菌血清型中，結(jié)合于豬的IgG-Fc端。IgG結(jié)合蛋白不僅存在于細(xì)胞表面，也存在于培養(yǎng)上清中。豬免疫血清中的IgM和IgG及針對(duì)表面抗原的血清，對(duì)豬鏈球菌2型的攻擊均能起到一定的保護(hù)作用，在體內(nèi)具有保護(hù)作用的血清成分，在體外起調(diào)理素的作用。

5.7　谷氨酸脫氫酶蛋白

谷氨酸脫氫酶(GDH)是新近發(fā)現(xiàn)的一個(gè)與豬鏈球菌2型毒力相關(guān)的因子。核酸序列分析表明，它包括一個(gè)開放性閱讀框，編碼448個(gè)氨基酸殘基，分子質(zhì)量為48.8 ku，作用底物為L(zhǎng)-谷氨酸。此基因的普遍性和它表達(dá)的保守蛋白具有免疫原性，同時(shí)，這個(gè)蛋白又能特異性的與免疫了豬鏈球菌2型的豬的抗血清反應(yīng)，說(shuō)明它可作為檢測(cè)豬鏈球菌的重要標(biāo)志性抗原基因。GDH為屬特異性基因，而且通過(guò)GDH蛋白的非變性電泳圖譜的不同，能夠區(qū)分出高致病株、中等毒力株和無(wú)毒株，用GDH基因與1、2 7、9、1/2型CPS基因建立的多重PCR診斷方法，可以進(jìn)行快速診斷和血清型分型，對(duì)其他型的球菌則不能擴(kuò)增。

5.8　致病性基因-ORF2

Smith等用體內(nèi)互補(bǔ)法發(fā)現(xiàn)一段毒力相關(guān)序列V10。經(jīng)計(jì)算機(jī)分析，它包括兩個(gè)完整的閱讀框和兩個(gè)不完整的閱讀框，ORF1、ORF3、ORF4與其他已知基因都有部分同源性，而ORF2與數(shù)據(jù)庫(kù)中的任何基因都無(wú)同源性。所以這一新的與致病性有關(guān)的基因，有可能就是一新的毒力基因。而且李干武等根據(jù)報(bào)道的ORF2基因設(shè)計(jì)引物，對(duì)中國(guó)近年來(lái)的豬鏈球菌分離株進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)7株豬鏈球菌2型中有6株為ORF2陽(yáng)性。

5.9　細(xì)菌素樣抑制性物質(zhì)

Melancon和Grenier通過(guò)延緩性頡頏試驗(yàn)，首次發(fā)現(xiàn)豬鏈球菌2型在生長(zhǎng)過(guò)程中能夠分泌一種細(xì)菌素樣抑制性物質(zhì)，分子質(zhì)量在14 ku～30 ku之間，能抑制多種鏈球菌和其他豬源病原菌的生長(zhǎng)，可以作為前生命期菌株早期定植在豬體內(nèi)，來(lái)預(yù)防其他病原菌的入侵。所以首次提出，利用細(xì)菌之間的干擾和產(chǎn)生的細(xì)菌素來(lái)預(yù)防和治療鏈球菌的感染。

5.10　分泌型核酸酶SsnA

Fontaine M C等[13]在致病菌株SX332和后來(lái)的血清1型～9型中，發(fā)現(xiàn)了一種分泌型核酸酶SsnA。SsnA基因大小為3 126 bp，此核酸酶的底物為單鏈和雙鏈DNA，Ca2＋和Mg2＋為SsnA的活性必需因子。RT-PCR表明SsnA在整個(gè)豬鏈球菌的生長(zhǎng)過(guò)程中都表達(dá)，用抗豬鏈球菌抗體做免疫轉(zhuǎn)印發(fā)現(xiàn)SsnA在體內(nèi)也表達(dá)，而且，用去頂端的SsnA衍生物制備的抗血清能中和SsnA的活性，利用核酸電泳和免疫轉(zhuǎn)印分析菌株SX332和它的缺失株的亞細(xì)胞成分，表明SsnA存在于細(xì)胞壁上。

5.11　氨基酸通透酶

氨基酸通透酶(Amino acid permease)在金黃色葡萄球菌的致病過(guò)程中起到了重要的作用。金黃色葡萄球菌可引起人的多種侵襲性感染，其脯氨酸通透酶基因(putP)的突變可導(dǎo)致其在傳染性心內(nèi)膜炎模型中的毒力的顯著減弱。經(jīng)同源性查找后發(fā)現(xiàn)， 210片段與氨基酸通透酶具有同源性，故推測(cè)其可能與豬鏈球菌2型菌株的毒力有關(guān)[14]。