紅景天為景天科植物大花紅景天Rhodiola crenulata（Hook.f.et.Thoms.）H.Ohba的干燥根及根莖。2005版《中國(guó)藥典》采用高效液相色譜法測(cè)定其紅景天苷的含量。文獻(xiàn)報(bào)道的紅景天及其制劑的含量測(cè)定方法主要有高效液相色譜法、紫外分光光度法、薄層掃描法等。現(xiàn)將文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)的實(shí)驗(yàn)方法作一綜述
一、高效液相色譜法
2005版《中國(guó)藥典》紅景天含量測(cè)定項(xiàng)下：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（15：85）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm.理論板數(shù)按紅景天苷峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。
供試品溶液的制備：取本品粉末（過(guò)四號(hào)篩）約0.5克，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，搖勻，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
常用的HPLC條件及供試品溶液的制備方法總結(jié)如下。
色譜儀：①美國(guó)Waters 高效液相色譜儀，600泵，DAD996 檢測(cè)器，Millennium322010 版色譜工作站；②Hi-tech (美國(guó)) 高效液相色譜儀，Hi2tech500UV/vis 檢測(cè)器，SSIP4000 泵；③島津LC24A高效液相色譜儀、島津SPD22AS紫外檢測(cè)器(島津制作所)；④SP-8800 型高效液相色譜儀，SP-200 型紫外檢測(cè)儀；⑤HP1100 型系列高效液相色譜儀；⑥島津LC-10Atvp 高效液相色譜儀；
⑦PE1022/200高效液相色譜儀；等等。
色譜條件：①色譜柱：Bondclone C18 ( 10μm, 3.9 mm×300mm)；流動(dòng)相：水-甲醇-乙腈(80：20：5)；流速：0.6mL/ min；檢測(cè)波長(zhǎng)：223nm。②色譜柱 phenomenex ODS 柱(5μm，250nm×4.6mm ID)；流動(dòng)相：甲醇-水(17：83)；流速1.0ml/ min；柱溫：室溫；檢測(cè)波長(zhǎng)223nm；③色譜柱：YWG-C18 (大連化學(xué)物理研究所，4.6×250mm，10μm)；流動(dòng)相：甲醇-水-冰醋酸(20：80：1)；檢測(cè)波長(zhǎng)：225nm；流速：1.0ml/min；紙速: 0.1mm/min；柱溫：室溫；④Discovery C18 色譜柱(250×4.6mmi. d.，5μm)；流動(dòng)相為20mmol/L磷酸鹽溶液(pH3.0)-乙腈(93：7)，流速1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)223nm；柱溫20℃；⑤Diamonsil C18 色譜柱(4.6mm×15cm)， 柱溫40℃，流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸(11：89：0.04)；檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm；等等。
供試品溶液的制備方法：甲醇溶液浸漬或回流提取；甲醇提取后，過(guò)氧化鋁柱，70%乙醇洗脫等等。
二、薄層-紫外分光光度法
采用薄層-紫外分光光度法測(cè)定紅景天苷的含量時(shí)，常用的展開(kāi)劑為氯仿-甲醇-水，固定相為硅膠GF254。如：安豐等采用薄層-紫外法測(cè)定八種紅景天屬植物中紅景天甙的含量。使用島津UV2260 型紫外分光光度儀；薄層層析用硅膠GF254，4%CMC-Na常法鋪板，105℃活化30min；展開(kāi)劑為氯仿-甲醇-水(26：14：3)；測(cè)定吸收波長(zhǎng)為223.8nm。謝乾松等測(cè)定塞北紅景天中紅景天甙含量時(shí)也采用薄層-紫外法，使用島津UV 2201 紫外分光光度儀。樣品的均以甲醇為提取溶劑。
三、薄層掃描法
錢(qián)彥叢等采用薄層掃描法測(cè)定冀產(chǎn)紅景天中紅景天苷的含量。CS-9000 型薄層掃描儀(日本島津)；硅膠G版；展開(kāi)劑：氯仿-甲醇-丙酮-水(6：3：1：1)；顯色方法：用碘蒸氣熏2～3min；λS = 226nm，λR=350nm，反射法鋸齒掃描，狹縫1.25mm×1.25mm，SX=3。藥材用甲醇回留提取。實(shí)驗(yàn)中薄層控制溫度在25℃，濕度65%
四、毛細(xì)管電泳法和氣相色譜法等
王洪倫等利用毛細(xì)管電泳法分離測(cè)定兩種紅景天中紅景天甙和酪醇的含量，所用毛細(xì)管規(guī)格為48.5cm×50μm，二極管陣列紫外檢測(cè)器(DAD) 檢測(cè)波長(zhǎng)221nm，最佳分離條件：電壓21 kV，分離溫度25℃，背景電解質(zhì)為含有30mmol/ L十二烷基硫酸鈉(SDS)，2.5 + 97.5 ( V/ V) 乙腈的14mmol/ L 硼酸溶液，pH 10.7。紅景天甙與酪醇分別在60.0～7.5μg/ mL 和27.5～3. 5μg/ mL 質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與電泳峰面積呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，檢測(cè)下限分別為3.0和1. 5μg/ mL。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行6次測(cè)定，遷移時(shí)間的RSD為0.25%和0.39%，峰面積的RSD為5.26%和3.52 %。
康勝利等采用硅醚化方法，用甘露醇丙酰化物作內(nèi)標(biāo)物，建立了紅景天植物藥材中紅景天甙和百脈根甙的氣相測(cè)定方法。硅醚化試劑為六甲基二硅胺烷-三甲基氯硅烷(2：1)。色譜條件：OV-101不銹鋼毛細(xì)管柱( 45m×0.25mm)，程序升溫200℃～245℃(5℃/ min)，載氣N2，柱前壓196 kPa，流速55ml/ min (分流比30：1)，尾吹30ml/ min，進(jìn)樣室溫度285℃，F(xiàn)ID。量程10，衰減64。藥材用甲醇提取。
張群等采用重氮化比色法測(cè)定紅景天苷含量。采用鉛鹽沉淀法和氧化鋁吸附法對(duì)流浸膏液凈化提純，最大吸收波長(zhǎng)491±2nm。重氮化試劑的配制(需新鮮配制)：甲液：磺乙酰胺鈉3.5g，置于50ml容量瓶中，加鹽酸溶液(1→10) 稀釋至刻度；乙液：亞硝酸鈉5g 加水至50ml；應(yīng)用時(shí)，甲、乙兩液取等量在冰水浴中混合, 放置片刻使用。