石楠葉有祛風(fēng)、通絡(luò)、益腎之功效。其中的兩種有效成分齊墩果酸和熊果酸在抗炎、保肝、止疼、強心等許多療效方面已被現(xiàn)代科學(xué)證實。目前石楠葉中熊果酸的測定方法有薄層色譜法。本實驗采用毛細(xì)管電泳法測得了石楠葉中齊墩果酸和熊果酸異構(gòu)體的含量
1 實驗部分
儀器與藥品：美國Waters Quanta 4000E毛細(xì)管電泳儀。毛細(xì)管(河北永年光導(dǎo)纖維廠，直徑75μm)總長60cm，有效長度52cm。數(shù)據(jù)處理由Waters Millennium 2010色譜管理軟件完成。Na2HPO4，Na2B4O7，SDS，95%乙醇均為分析純。齊墩果酸和熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品購自中國藥品生物制品檢定所。石楠葉購于河北保定市藥材公司。水為雙蒸餾水。
2 方法與結(jié)果
2．1 實驗方法：實驗前，毛細(xì)管依次用0.1mol／L鉻酸、重蒸餾水、0.1mol／L KOH、重蒸餾水各沖洗5min，然后再用緩沖溶液沖洗4min。在每兩次運行之間，毛細(xì)管僅用緩沖溶液沖洗4min。3次運行后，毛細(xì)管需用上面方法清洗一回。運行電壓為16kV，214nm 紫外檢測，重力進(jìn)樣時間為5s，實驗溫度是26℃。實驗前緩沖溶液用微濾膜過濾。
2．2 優(yōu)化的實驗條件：綜臺考察緩沖溶液組份濃度，SDS濃度及有機溶劑(乙醇)含量對齊墩果酸和熊果酸標(biāo)準(zhǔn)混合物分離的影響。確定了最佳的緩沖溶液體系為15mmo|／L Na2HPO4、15mmol／Lna2B4O7、10mmol／L SDS、5 %乙醇的電解質(zhì)溶液。在此條件下，齊墩果酸和熊果酸譜峰能完全分開，分離度達(dá)到0.98。
2．3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精確稱取適量的齊墩果酸和熊果酸對照品，分別溶于一定量乙醇中得標(biāo)準(zhǔn)溶液以此標(biāo)準(zhǔn)溶液為基礎(chǔ)再配成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，在最佳分離條件下進(jìn)行測定。以譜圖中峰面積校正值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。兩種物質(zhì)的線性回歸方程(校正峰面積mV／s，濃度g／mL)和相關(guān)系數(shù)(r)及線性范圍為：
齊墩果酸Y=一28.5+13.4×10000(r=0.997)線性范圍為0.53～3.56mg/mL。
熊果酸Y=一14.8+16.9×10000X(r=0.996)線性范圍為0.57～4.12mg／mL。
2．4 樣品測定：精確稱取3.94 g石楠葉碎塊，放人索氏提取器中，用80mL 95%乙醇提取1、5h，將提取液濃縮并定容至50mL得樣品溶液。在最佳分離條件下運行樣品溶液，測得石楠葉中齊墩果酸含量(g／g)為2.79％，RSD=2.67%(n=5)；熊果酸含量(g／g)為7.98%，RSD=2.44%(n=5)。
2．5 回收率測定：加樣回收率測定結(jié)果，齊墩果酸為102%，RSD=2.85% ( =4)；熊果酸為104％，RSD= 3.21% (n=4)。
3 討論
毛細(xì)管電泳法測定石楠葉中齊墩果酸和熊果酸的含量具有快速、準(zhǔn)確、微量優(yōu)點。其中齊墩果酸含量為首次給出。此法測得的熊果酸含量高于其它方法測定值，說明用乙醇提取效率好于甲醇。本文提供了評價石楠葉藥材及相關(guān)藥物質(zhì)量的一種可靠分析手段。