獨活為傘形科植物重齒毛當歸Angelica pubescens Maxim.f. biserrata Shan etYusn的干燥根。2005版《中國藥典》一部收載的含量測定方法為采用高效液相色譜法,以蛇床子素為指標成分。文獻報道的獨活及其制劑的含量測定方法主要為高效液相色譜法等。
2005版《中國藥典》獨活含量測定項下:
色譜條件與系統適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水(60:40)為流動相,檢測波長為322nm;理論板數按蛇床子素峰計算應不低于6000。
供試品溶液的制備:取本品粉末(過三號篩)約0.5克,精密稱定,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇20ml,稱定重量,超聲處理(功率300W,頻率15kHz)30分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補足減失的重量,搖勻,濾過;精密量取續濾液5ml,置20ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
文獻報道的HPLC法:
承云等測定寄生追風液中蛇床子素的含量,采用Gilson 液相色譜儀,ODS 柱(150mm×4.6mm, 5Lm) 為分析柱,ODS預柱;流動相為甲醇-0.1mol/L硫酸銨溶液(70∶30), 用硫酸溶液(1→5) 調節pH為2.5;流速1.0ml/min;柱溫35℃;檢測波長322nm。樣品用乙醚振搖提取3次, 每次10ml,水浴溫度揮干乙醚控制在45℃。
徐以亮等測定獨活藥材及配方顆粒中蛇床子素的含量,采用Waters 600E高效液相色譜儀;色譜柱: Kromasil C18 (中國科學院大連化學物理研究所);流動相:甲醇-水-磷酸( 375∶125∶1 );檢測波長322nm;柱溫室溫;流速1.0mL/min。樣品用甲醇超聲處理。