摘要：目的：研究茵蓮清肝合劑中芍藥苷的含量測定方法。方法：采用高效液相法。色譜柱YWGC18(250mm×4.6 mm，10μm)，室溫，流動相為甲醇-水(30：70)；流速為1mL／min；檢測波長為230nm。結果 芍藥苷在0.15～1.5 μg范圍內呈線性關系(r=0.9998，n=5)，平均加樣回收率為99.16％ 。RSD為0.87％。結論方法準確、可行，可用于茵蓮清肝合劑的質量控制。
關鍵詞：茵蓮清肝合劑；芍藥苷；高效液相
茵蓮清肝合劑由茵陳、半枝蓮、白芍、柴胡、貫眾、茯苓、廣藿香、板藍根等19味藥組成，收載于部頒標準中藥成方制劑第12冊。由于該合劑藥味組成多、相互干擾大，因此一直沒有測定含量。為更好地控制該合劑的質量，本實驗設計采用了檢測靈敏度高、準確度及精密度好的HPLC法，測定處方中的主要藥物白芍中芍藥苷的含量。
1 儀器與試藥
美國惠普HP1050型高效液相色譜儀，四元泵，DAD檢測器，化學工作站；H66025型超聲清洗器(無錫市超聲電子設備廠)；甲醇為色譜純，流動相所用水為雙蒸水。茵蓮清肝合劑由北京亞東生物制藥有限公司提供；芍藥苷對照品購買于中國藥品生物制品鑒定所(批號0736—9708)。 ‘
2 方法與結果
2．1 色譜條件
色譜柱為YWGCl8 4.6mm×250 mm，10μm，大連化物所，柱效以芍藥苷計其理論塔板數不低于2600；流動相為甲醇-水(30：70)；流速為1mL／min；檢測波長為230nm；柱溫為室溫。
2．2 線性關系考察
精密稱取芍藥苷對照品3mg，置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。分別精密吸取對照品溶液0.5、1、2、2．5、5.0μL按上述色譜條件進樣測定，以峰面積與對照品的量進行線性回歸，求得回歸方程為A=一193.47+1343.78 m，r=0.9998，芍藥苷的線性范圍為0.77～6.12μg，可用外標一點法進行含量測定。
2．3 樣品提取溶劑及提取條件優化
據文獻報道，芍藥苷的常用提取溶劑為水、甲醇、乙酸及稀醇，文獻指出芍藥藥材中芍藥苷的提取效率以水為最高，所以，本實驗采用水為樣品提取溶劑，對加水倍數及超聲波處理時間做了對比研究。優化了樣品的提取條件，同時將水提與甲醇提做了對比。
提取條件優化：取樣品100mL，減壓干燥，取粉末，研細(過50目篩)，精密稱取0.3g，共5份，精密加入50％ 乙醇40mL，稱重，密塞，超聲處理，取出。稱重，補足重量，取上清液以0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為供試品溶液，按上述色譜條件測定。
結果：樣品各組間無明顯差異(P>0.05)，但以超聲10min及20min的含量偏低。
結論：采用超聲提取30min。
2．4 精密度試驗
精密吸取0.306g/L芍藥苷對照品溶液10μL，按前述色譜條件重復進樣5次，測得峰面積RSD為0.64％，符合分析要求。
2．5 重現性試驗
取樣品100mL，減壓干燥，取粉末研細，精密稱取0.3g，共5份，同樣品測定項下重復操作5次，并計算每份樣品中芍藥苷的含量。求得平均含量為0.69％，RSD為1.81％，符合分析要求。
2．6 回收率試驗
精密吸取已知含量的樣品100mL，減壓干燥，取粉末0.3g，共5份，按下表分別加人芍藥苷對照品一定量，按前述色譜條件測定，結果如下，求得平均回收率為99.16％ ，RSD為0.87％。
2．7 芍藥苷含量限度確定
取8批樣品，按前述樣品測定項下操作，測定、并計算含量。根據上述8批樣品的測定結果，擬訂該制劑中芍藥苷的含量應不低于0.6％。
3 討論
(1)實驗過程中采取了回流提取和超聲波提取，經比較發現超聲波提取法時間短、提取物中雜質少，直接測定可以達到完全分離。(2)芍藥苷的含量測定方法有薄層層析-比色法、薄層層析-紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相法等，該實驗采用了準確度及靈敏度、重現性好的高效液相法。該方法的建立豐富了茵蓮清肝合劑的質量標準，為該藥品的質量均一、可控，提供了保障。