蓮子心為睡蓮科植物蓮Nelumbo nucifera Gaertn.的成熟種子中的干燥幼葉及胚根。2005版《中國藥典》一部采用高效液相色譜法,以蓮心堿為對照測定其含量。文獻報道的常用的含量方法為高效液相色譜法和分光光度法等。
一、 高效液相色譜法
2005版《中國藥典》蓮子心含量測定項下:
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0.015mol/L十二烷基磺酸鈉溶液(取十二烷基磺酸鈉0.41g加水100ml使溶解)-冰醋酸(56:43:1)為流動相,檢測波長為282nm。理論板數(shù)按蓮心堿峰計算應不低于2000。
供試品溶液的制備:取本品粉末(過四號篩)約0.5g,精密稱定,精密加入2%鹽酸甲醇溶液25ml,稱定重量,加熱回流30分鐘,放冷,再稱定重量,用2%鹽酸甲醇溶液補足減失的重量,濾過。精密量取續(xù)濾液5ml,置10ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,即得。
文獻報道的比較少,一般采用藥典方法,其它的現(xiàn)具體舉例,如:張先洲等采用了高效液相色譜法同時測定蓮子心中蓮心堿、異蓮心堿、甲基蓮心堿等3種生物堿的含量。采用338型高效液相色譜儀(美國Beckman), 配有110B雙泵, 166檢測器, 406控制器, 427積分儀。色譜條件:Ultrasphere Si 4.6mm×250mm柱;流動相為二氯甲烷-異丙醇-二乙胺(70:30:0.2); 流速1ml/min;檢測波長282nm。在此條件下,回歸方程為A = 29.43+ 4233.4C,r= 0.9993,線性范圍4~32mg/L。蓮子心藥材用甲醇冷浸后超聲提取。
壽國香等用離子對反相HPLC法測定蓮子心藥材中蓮心堿的含量。采用日本Shimadzu LC-10A 高效液相色譜儀,SPD210AV紫外可見檢測器。色譜條件: 色譜柱為日本TOSOH TSK-GEL -ODS280TM (10μm, 4.6mm×250mm );流動相為甲醇-水-冰醋酸-辛烷磺酸鈉-乙酸鈉( 55:45:0.6:10mmol/L:5mmol/L);柱溫40℃;流速1mL/min;檢測波長282nm。回歸方程Y =6 698 659.95X - 2 634.76,r = 0.999 9,樣品在0.005~0.146 mg/m L范圍內(nèi),線性關(guān)系良好。蓮子心藥材用鹽酸-甲醇(2:98)混合溶液加熱回流處理。
二、 分光光度法
用此方法測定蓮心堿的含量,雖然報道較少,但是該方法簡單、快速。如:胡學民等采用紫外分光光度法測定蓮心堿的含量。蓮心堿的最大吸收波長為282nm,對照品用無水乙醇溶解,回歸方程為A=0.015+0.01746C,r=0.9999。樣品的處理:蓮心堿片的粉末用無水乙醇振搖提取,取續(xù)濾液。