摘要 目的：比較測定甘草酸二銨含量的3種紫外分光光度法。方法：紫外分光光度法。用水作溶劑，甘草酸二銨測定波長為252nm，煙酰胺波長為261nm，吸收系數(E1cm1%)用5臺紫外分光光度計測定。結果：甘草酸二銨濃度在9.64～57.84μg／mL之間與吸收度線性良好，r=0.9998，吸收系數法，甘草酸二銨對照品法及煙酰胺對照品法的回收率分別為99.64％ ，99.32％及95.84％ ，RSD均為0.7％(n=6)。結論：用吸收系數和甘草酸二銨對品法測定本品含量，結果基本一致，而煙酰胺對照品法測定結果偏低。
關鍵詞甘草酸二銨；煙酰胺；吸收系數；紫外分光光度法；含量測定
甘草酸二銨(glycyrrhizic acid diamonium salt，GA)為甘利欣的主要成分，具有較好的抗肝損害作用。其含量測定方法主要是紫外分光光度法(UV法)，其中有吸收系數法、對照品比較法和煙酰胺比較法等”。為了控制本品的質量，筆者對3種UV法進行了比較。
1 儀器與試藥
紫外分光光度計型號分別為UV-260及UV2201(日本島津)，PEλ15 (美國)，GENERAL TU-1221(北京通用儀器廠)，上分7530型(上海分析儀器廠)。GA對照品(自制，由C18反相制備柱獲得色譜純GA，于80℃減壓真空干燥至恒重，含量為99.65％)；煙酰胺對照品(自制，取含量為98.5％ 的生化試劑經苯重結晶3次，以高效液相色譜法測得其含量為99.75％ ，無其他雜質峰)；GA樣品3批(按GA生產工藝自制，批號：031220—1，031223—2，031226—3)。
2 方法與結果
2．1 紫外吸收光譜
取GA對照品適量，用水溶解稀釋成濃度約為40μg／mL的溶液，以水為空白，照分光光度法在220～360nm波長之問掃描，結果在252nm波長處有最大吸收。故選擇252nm為測定波長。
2．2 吸收系數(E1cm1% )的測定
精密稱取GA對照品適量，加水配制成濃度為50.0，25.0μg／mL的兩種溶液，用5臺不同型號的分光光度計在252nm波長處測定吸收度并計算。經統計分析得E1cm1%為127.7，RSD=0.4％(n=5)。
2 3 含量測定的3種方法
吸收系數法：取GA，精密稱取，加水溶解并定量稀釋制成每1mL約含40μg的溶液，作為供試液，于252nm波長處測定吸收度，按C42H68N2016， 的 E1cm1%為127.7計算，即得。
甘草酸二銨對照品法：取上述供試液，于252nm波長處測定吸收度；另取GA對照品，精密稱取，加水溶解并定量稀釋至每1mL約含40μg的溶液，同法測定吸收度，計算，即得。
煙酰胺對照品法：取上述供試液，于252nm波長處測定吸收度；另取煙酰胺對照品，精密稱取，加水溶解并定量稀釋制成每1mL約含20μg的溶液，于261nm的波長處測定吸收度，計算，即得。
2．4 線性關系考察
精密稱取GA對照品25mg，置25mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1，2，3，4，5，6 mL，分別置100 mL量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，在252nm波長處測定吸收度。結果表明，GA濃度在9.64～57.84μg／mL范圍內與吸收度有良好的線性關系，回歸方程為C=79.472 A一0.618，r=0.9998。
2．5 穩定性試驗
將濃度為40 μg／mL的溶液分別于0，1，2，3，4，20h取樣，在252nm波長處測定吸收度。結果表明，在室溫20h內本品水溶液穩定，吸收度基本一致。
2．6 回收率試驗
精密稱取GA對照品適量，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，按吸收系數法(A法)、對照品比較法(B法)及煙酰胺對照品法(C法) 測定，計算回收率。平均回收率A法為99.64％ ，B法為99.32％ ，C法為95.84％ ，RSD均為0.7％ 。
2．7 精密度試驗
取GA樣品(批號：031220—1)按上述方法重復測定多次(n=6)，結果見表3，A法平均值為標示量的100．2％ ，RSD=0．4％ ；B法平均值為標示量的99．8％ ，RSD=0．4％ ；C法平均值為標示量的96.3％ ，RSD=0.4％ 。
2．8 樣品含量測定
取3批樣品，精密稱定，分別加水溶解并定量稀釋制成每1mL中約含40μg的溶液，依法測定。
3 討論
試驗結果表明，吸收系數法和對照品比較法回收率較高，測得的含量基本一致；煙酰胺法回收率及含量均偏低。