江蘇淮北地區某農場養雞專業戶飼養的肉雞群于15日齡時，突然暴發一種以呼吸困難、腹瀉為主癥，剖解變化主要以氣囊炎、心包炎、肝周炎為特征的疾病。發病率約為80%，死亡率高達50%。現將結果匯報如下，以供同行參考。
1 材料與方法
1.1 發病癥狀與剖檢特征 15日齡時病雞采食量突然下降，多數雞呼吸困難，精神委頓，縮脖閉目，羽毛松亂，排稀糞，呈灰白色、黃綠色，部分病雞腹部膨脹，觸之有波動感，有的病雞眼瞼腫脹。部分病雞有搖頭、彎頸等神經癥狀。多數剖檢雞只可見氣囊增厚、混濁，呈黃白色。心包膜增厚，心包表面及心包液中有纖維素性滲出物。肝表面被覆一層纖維蛋白膜包裹，膽囊腫大、充滿膽汁。有的雞只腹腔內有大量積水，內有纖維蛋白凝塊。腎腫大，呈檳榔狀，有不同程度尿酸鹽沉積。部分病雞肌胃里充滿綠色膽汁，腺胃乳頭有散在針點狀出血。部分病雞泄殖腔出血，十二指腸、盲腸段存在散在出血點。
1.2 培養基 葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、尿素、硫化氫、蛋白胨和麥康凱培養基等生化發酵培養基購自上海醫學化驗所；檸檬酸鹽培養基、葡萄糖蛋白胨水、明膠培養基和血清型鑒定所用LB培養基參照文獻配置。
1.3 藥敏試紙和大腸桿菌單因子血清 購自中國獸醫藥品監察所。
1.4 SPF種蛋和SPF雞 購自山東家禽研究所。
1.5 新城疫和禽流感陽性血清 由揚州大學農業部畜禽傳染病學重點開放實驗室提供。
1.6 細菌分離 無菌采取病雞心包液、肝組織、胸膜、心血、氣囊積液等病料，劃線接種于麥康凱平板，37℃培養20 h；挑取單個典型菌落進行純培養，備用。
1.7 細菌鑒定
(1)形態學觀察：革蘭氏染色參照文獻的方法進行，然后進行形態學觀察。
(2)生化試驗：按文獻對所分離純培養的細菌進行生化指標測定。
(3)血清型鑒定：參照文獻的方法，取被檢細菌純培養物用生理鹽水離心洗滌兩次，稀釋成被檢抗原，處理后用標準“O”抗原單因子血清作玻片凝集反應檢定O抗原類型。
(4)藥敏試驗：參照文獻的方法進行。
(5)致病性測定：參照文獻的方法，按0.1 mL/羽(108/ml)，接種8只SPF雞，每天觀察雞只死亡和病變情況，根據文獻的方法判定分離株的致病性。
1.8 病毒分離與毒力測定〓無菌采集病雞心、肝、脾、肺、腎、法氏囊和腦等組織，研磨后，凍融3次后，按每樣接種3枚SPF雞胚，37℃孵育。血清學鑒定的具體方法參考文獻進行。
2 結果
2.1 細菌分離鑒定 (1)接種樣品在麥康凱選擇性培養基上長出典型的大腸桿菌紅色菌落。(2)染色鏡檢發現所分離的細菌均為革蘭氏陰性中等大小的桿菌。(3)從生化試驗的結果來看，與標準型菌株相比，部分糖、酶和氨基酸上存在著一定的差異，而在其他常規的生化反應基本相同。
2.2 血清型鑒定 不同雞只的臟器細菌分離株都為O115。
2.3 藥敏試驗 用常規藥敏紙片法對分離到的大腸桿菌進行藥敏試驗，結果該菌對氯霉素、慶大霉素、菌必克高敏；對卡那霉素、硫酸粘桿菌素中敏；而對紅霉素、痢菌凈、氨芐青霉素、復方新諾明則不敏感。而丁胺卡那霉素、先鋒霉素、新霉素，對此致病性大腸桿菌有較強的抑制性。相同血清型的野毒株和標準株在藥敏性上都有一定的差異。
2.4 細菌致病性試驗 接種雞只主要表現為精神沉郁，呼吸困難，喘氣，垂翅，拉稀等特征；病死雞可見纖維素性心包炎、肝周炎和氣囊上存在多量干酪樣滲出物。接種后死亡3只，為中等致病力細菌株。
2.5 病毒分離與毒力測定鑒定 研磨病料接種的SPF雞胚于接種后36h全部死亡，死亡雞胚全身出血，頭部尤為嚴重。死亡雞胚尿囊液具有凝集雞紅細胞的特性，血凝價為8log2。按著參考文獻的方法，用新城疫、H5和H9陽性血清做血凝抑制試驗（HI），同時設立相應的陽性抗原對照試驗，試驗結果表明死亡雞胚尿囊液的血凝特性能被新城疫陽性血清所抑制，而不能被H5和H9禽流感陽性血清所抑制，說明死亡雞胚尿囊液中含有新城疫病毒。然后對該病毒的致病特性進行了測定，雞胚平均死亡時間為48h，IVPI指數為3.0。
3 防治與討論
根據診斷結果，對全雞群采用丁胺卡那霉素飲水，同時采用新城疫油苗進行緊急接種，疫情很快得到了控制。雖然通過采取果斷措施，疫情得到了有效控制，但是該場的疫情發生，值得我們思考。該場采用的免疫程序如下：3日齡接種新城疫和傳染性支氣管炎二聯苗（英特威）；7日齡接種新城疫、法氏囊和禽流感（H5）油苗。相對來講，其免疫程序對肉雞還是可以的，但偏偏就發生雞瘟。初步分析原因有三：(1)3日齡免疫的二聯苗，常溫運輸，導致免疫效果不確實。(2)7日齡接種新城疫、法氏囊和禽流感油苗系黑市疫苗，疫苗質量存在問題，導致免疫失敗。(3)環境污染嚴重，病死雞到處亂扔，飼養場吃病死雞的狼犬在雞場到處亂串，導致疾病迅速傳播且很難根除。因此，在臨床實踐中，要想有效控制該類型疾病的發生，必須采取以下措施，方能防止類似事件的發生：(1)飼養場必須采取嚴格的生物安全措施，杜絕外來疾病的入侵。(2)疫苗的質量、運輸過程的管理以及合理的使用方法才能保證疫苗免疫的使用效果。(3)科學的飼養管理是降低飼養成本，提高雞群抵抗疾病的根本保證。
1 材料與方法
1.1 發病癥狀與剖檢特征 15日齡時病雞采食量突然下降，多數雞呼吸困難，精神委頓，縮脖閉目，羽毛松亂，排稀糞，呈灰白色、黃綠色，部分病雞腹部膨脹，觸之有波動感，有的病雞眼瞼腫脹。部分病雞有搖頭、彎頸等神經癥狀。多數剖檢雞只可見氣囊增厚、混濁，呈黃白色。心包膜增厚，心包表面及心包液中有纖維素性滲出物。肝表面被覆一層纖維蛋白膜包裹，膽囊腫大、充滿膽汁。有的雞只腹腔內有大量積水，內有纖維蛋白凝塊。腎腫大，呈檳榔狀，有不同程度尿酸鹽沉積。部分病雞肌胃里充滿綠色膽汁，腺胃乳頭有散在針點狀出血。部分病雞泄殖腔出血，十二指腸、盲腸段存在散在出血點。
1.2 培養基 葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、尿素、硫化氫、蛋白胨和麥康凱培養基等生化發酵培養基購自上海醫學化驗所；檸檬酸鹽培養基、葡萄糖蛋白胨水、明膠培養基和血清型鑒定所用LB培養基參照文獻配置。
1.3 藥敏試紙和大腸桿菌單因子血清 購自中國獸醫藥品監察所。
1.4 SPF種蛋和SPF雞 購自山東家禽研究所。
1.5 新城疫和禽流感陽性血清 由揚州大學農業部畜禽傳染病學重點開放實驗室提供。
1.6 細菌分離 無菌采取病雞心包液、肝組織、胸膜、心血、氣囊積液等病料，劃線接種于麥康凱平板，37℃培養20 h；挑取單個典型菌落進行純培養，備用。
1.7 細菌鑒定
(1)形態學觀察：革蘭氏染色參照文獻的方法進行，然后進行形態學觀察。
(2)生化試驗：按文獻對所分離純培養的細菌進行生化指標測定。
(3)血清型鑒定：參照文獻的方法，取被檢細菌純培養物用生理鹽水離心洗滌兩次，稀釋成被檢抗原，處理后用標準“O”抗原單因子血清作玻片凝集反應檢定O抗原類型。
(4)藥敏試驗：參照文獻的方法進行。
(5)致病性測定：參照文獻的方法，按0.1 mL/羽(108/ml)，接種8只SPF雞，每天觀察雞只死亡和病變情況，根據文獻的方法判定分離株的致病性。
1.8 病毒分離與毒力測定〓無菌采集病雞心、肝、脾、肺、腎、法氏囊和腦等組織，研磨后，凍融3次后，按每樣接種3枚SPF雞胚，37℃孵育。血清學鑒定的具體方法參考文獻進行。
2 結果
2.1 細菌分離鑒定 (1)接種樣品在麥康凱選擇性培養基上長出典型的大腸桿菌紅色菌落。(2)染色鏡檢發現所分離的細菌均為革蘭氏陰性中等大小的桿菌。(3)從生化試驗的結果來看，與標準型菌株相比，部分糖、酶和氨基酸上存在著一定的差異，而在其他常規的生化反應基本相同。
2.2 血清型鑒定 不同雞只的臟器細菌分離株都為O115。
2.3 藥敏試驗 用常規藥敏紙片法對分離到的大腸桿菌進行藥敏試驗，結果該菌對氯霉素、慶大霉素、菌必克高敏；對卡那霉素、硫酸粘桿菌素中敏；而對紅霉素、痢菌凈、氨芐青霉素、復方新諾明則不敏感。而丁胺卡那霉素、先鋒霉素、新霉素，對此致病性大腸桿菌有較強的抑制性。相同血清型的野毒株和標準株在藥敏性上都有一定的差異。
2.4 細菌致病性試驗 接種雞只主要表現為精神沉郁，呼吸困難，喘氣，垂翅，拉稀等特征；病死雞可見纖維素性心包炎、肝周炎和氣囊上存在多量干酪樣滲出物。接種后死亡3只，為中等致病力細菌株。
2.5 病毒分離與毒力測定鑒定 研磨病料接種的SPF雞胚于接種后36h全部死亡，死亡雞胚全身出血，頭部尤為嚴重。死亡雞胚尿囊液具有凝集雞紅細胞的特性，血凝價為8log2。按著參考文獻的方法，用新城疫、H5和H9陽性血清做血凝抑制試驗（HI），同時設立相應的陽性抗原對照試驗，試驗結果表明死亡雞胚尿囊液的血凝特性能被新城疫陽性血清所抑制，而不能被H5和H9禽流感陽性血清所抑制，說明死亡雞胚尿囊液中含有新城疫病毒。然后對該病毒的致病特性進行了測定，雞胚平均死亡時間為48h，IVPI指數為3.0。
3 防治與討論
根據診斷結果，對全雞群采用丁胺卡那霉素飲水，同時采用新城疫油苗進行緊急接種，疫情很快得到了控制。雖然通過采取果斷措施，疫情得到了有效控制，但是該場的疫情發生，值得我們思考。該場采用的免疫程序如下：3日齡接種新城疫和傳染性支氣管炎二聯苗（英特威）；7日齡接種新城疫、法氏囊和禽流感（H5）油苗。相對來講，其免疫程序對肉雞還是可以的，但偏偏就發生雞瘟。初步分析原因有三：(1)3日齡免疫的二聯苗，常溫運輸，導致免疫效果不確實。(2)7日齡接種新城疫、法氏囊和禽流感油苗系黑市疫苗，疫苗質量存在問題，導致免疫失敗。(3)環境污染嚴重，病死雞到處亂扔，飼養場吃病死雞的狼犬在雞場到處亂串，導致疾病迅速傳播且很難根除。因此，在臨床實踐中，要想有效控制該類型疾病的發生，必須采取以下措施，方能防止類似事件的發生：(1)飼養場必須采取嚴格的生物安全措施，杜絕外來疾病的入侵。(2)疫苗的質量、運輸過程的管理以及合理的使用方法才能保證疫苗免疫的使用效果。(3)科學的飼養管理是降低飼養成本，提高雞群抵抗疾病的根本保證。
