第一法除另有規定外,取各藥品項下規定量的供試品,加水溶解,置于25ml的納氏比色管中,加水稀釋至10ml。另取規定色調和色號的標準比色液10ml,置于納氏比色管中,兩管同置白色背景上,自上向下透視,或同置白色背景前,平視觀察;供試品管呈現的顏色與對照管比較,不得更深。比色用重鉻酸鉀液 取重鉻酸鉀,研細后,在120℃干燥至恒重,精密稱取0.4000g,置500ml量瓶中,加適量水溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。每1ml溶液中含0.800mg的K2Cr2O7。 比色用硫酸銅液取硫酸銅約32.5g,加適量的鹽酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精密量取10ml,置碘量瓶中,加水50ml、醋酸4ml與碘化鉀2g,用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定,至近終點時,加淀粉指示液2ml,繼續滴定至藍色消失。每1ml的硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當于24.97mg的CuSO4·5H2O。根據上述測定結果,在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液(1→40),使每1ml溶液中適含62.4mg的CuSO4·5H2O,即得。比色用氯化鈷液取氯化鈷約32.5g,加適量的鹽酸溶液(1→40)使溶解成500ml,精密量取2ml,置錐形瓶中,加水200ml,搖勻,加氨試液至溶液由淺紅色轉變至綠色后,加醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH6.0)10ml,加熱至60℃,再加二甲酚橙指示液5滴,用乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)滴定至溶液顯黃色.每1ml的乙二胺四醋酸二鈉滴定液(0.05mol/L)相當于11.90mg的CoCl2·6H2O。根據上述測定結果,在剩余的原溶液中加適量的鹽酸溶液(1→40),使每1ml溶液中適含59.5mgCoCl2·6H2O,即得。各種色調標準貯備液的制備 按下表量取比色用氯化鈷液、比色用重鉻酸鉀液、比色用硫酸銅液與水,搖勻,即得。
各種色調標準貯備液的配制表
色 調 | 比色用氯化鈷液 | 比色用重鉻酸鉀液 | 比色用硫酸銅液 | 水 |
黃綠色 | 1.2 | 22.8 | 7.2 | 68.8 |
黃 色 | 4.0 | 23.3 | 0 | 72.7 |
橙黃色 | 10.6 | 19.0 | 4.0 | 66.4 |
橙紅色 | 12.0 | 20.0 | 0 | 68.0 |
棕紅色 | 22.5 | 12.5 | 20.0 | 45.0 |
各種色調色號標準比色液的制備 按下表量取各色調標準貯備液與水, 搖勻,即得。 各種色調色號標準比色液的配制表
色 號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
貯備液(ml) | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 | 4.5 | 6.0 | 7.5 | 10.0 |
加水量(ml) | 9.5 | 9.0 | 8.5 | 8.0 | 7.5 | 7.0 | 5.5 | 4.0 | 2.5 | 0 |
第二法 除另有規定外,取各藥品項下規定量的供試品,加水溶解使成10ml,必要時濾過,濾液照分光光度法于規定波長處測定,吸收度不得超過規定值。