摘 要:豬圓環病毒(Porcine circovirus, PCV)是近年來新發現的一種主要感染仔豬或青年豬的傳染病。主要表現為漸進性消瘦、生長發育受阻、體重減輕、皮膚蒼白或有黃疽,有呼吸道癥狀,時有腹瀉,有的表現為腎型皮炎。該病在1991年由加拿大學者Clark最先從一種被稱為斷奶仔豬多系統衰竭綜合癥(PMWS)的新疾病中發現的。隨后,美國、西班牙、英國、丹麥、德國、荷蘭、比利時、奧地利和意大利等國也證實了該病的存在。近年來,日本、韓國、泰國、墨西哥、匈牙利、中國大陸以及中國臺灣地區均有該病流行,給養豬業造成了嚴重經濟損失。目前,該病是世界各國公認的制約養豬業發展的重要疫病之一。此文是對豬圓環病毒病防治的調研與分析。
關鍵詞:豬圓環病毒病 防治
1 病原
豬圓環病毒屬于圓環病毒科圓環病毒屬,病毒粒子大小為14~25nm,平均直徑17 nm,呈對稱的二十面體,無囊膜,基因組為單股環狀DNA,由脫氧核糖核酸組成,在組織中的懸浮密度為1.37 cm3,沉降系數為52S,是目前發現的最小的動物病毒。PCV的復制為滾環復制方式,先經過一個雙鏈的復制型(RF),然后由雙鏈的復制型轉錄和編碼蛋白。這種復制方式與雞傳染性貧血病毒(CAV)的復制方式相同。
PCV對外界的抵抗力較強,該病毒對氯仿不敏感,不凝集牛、羊、豬、雞等多種動物和人的紅細胞。PCV能在RK—15細胞上生長,但不能引起細胞病變,但感染的PK—15細胞內含有許多胞漿內包涵體。少數感染的細胞內含有核內包涵體。PCV不能在原代胎豬腎細胞、恒河猴腎細胞、BHK—21細胞上生長。
根據致病性、抗原性和核酸序列的差異,將PCV分為PCV—1和PCV—2。PCV—1無致病性,1974年由德國學者Tischer從多株連續傳代的PK-15細胞中最先發現,1982年證實該病毒來源于當初制備PK-15細胞的豬腎組織 。后來證實該病毒只是一種可以感染豬的常規病毒,不會對感染豬造成危害。PCV-2卻具有致病性,能引起豬表現多種臨床癥狀。PCV-1基因組全長1759bp,PCV-2全長1768 bp或1767 bp,二者序列間源性小于80%,但PCV-1毒株間的核酸序列同源性大于99%,PCV-2毒株間的核序列間源性大于96%。PCV-1與PCV-2都有讀碼框ORF1,編碼病毒復制蛋白。各毒株間的ORF1編碼蛋白質序列間源性大于86%,在PCV各讀碼框編碼的蛋白質中間源性最高。現已經證實,PVC有兩個主要的閱讀框,ORF1和ORF2,二者在長度上都大于600 bp(2)。ORF1是最大的閱讀框,編碼病毒的復制蛋白(R bp),分子最大小為37KDA,與病毒的復制轉錄有關。ORF2編碼病毒的結構蛋白,可以與PCV-2的抗血清反應,LiuQ等研究表明,位于12-18位及34-41位的氨基酸殘基對PCV2-ORF2是重要的。ORF2編碼蛋白(Cbp)的兩個抗原表位分別位于所編碼的氨基酸的69-83處和117-131處,這兩處對Cbp蛋白特異的。
2 豬圓環病毒病的流行病學
現已證明,圓環病毒病在規模化豬場中流行廣泛,血清學調查表明,在德國、加拿大、英國和愛爾蘭,豬血清抗體陽性率分別高達95%、55%、86%和92%,豬II型圓環病毒病的死亡率約為10—30%不等。較嚴重的地區,豬場在暴發本病時死亡率高達40%左右。在我國,郎洪武等采集了來自北京、河北、山東、天津、江西、吉林、河南等7省(市)22個豬群的559份血消,用ELISA方法檢測20日齡未斷奶仔豬、1—2月齡斷奶仔豬、后備母豬及經產母豬,結果總陽性率為42.9%,抗體陽性率隨著豬年齡增長而升高。
據報道,在我國其他省市也有該病流行,在黑龍江省、浙江省、上海市、福建省、湖南省、云南省的血清學調查表明,豬血滑抗體陽性率分別高達63.59%、58.31%、79.7%、63.6%、62.29%、29%[4]。并在檢測中發現,豬II型環病毒陽性率與豬繁殖與呼吸綜合癥陽性率有一定的相關性,豬II型圓環病毒感染豬群的免疫功能受到損害,導致機體抵抗力下降,易受其它病原的并發或繼發感染,使病情加重導致死亡。豬II型圓環病病毒與豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、豬偽狂犬病毒等病原有協同感染。
3 豬II型圓環病毒的臨床癥狀、病理變化和危害
斷奶豬多系統衰竭綜合癥(PMWS):主要發生在哺乳期和保育期仔豬,特別是5-12周齡的仔豬,一般斷奶后2-3天開始發病,急性發病豬群中,發病率4%-25%,病死率高達90%以上,豬感染后主要表現為漸進性消瘦,生長遲緩,采食量下降,被毛粗亂,有的豬出現貧血、皮膚蒼白,個別豬出現黃單間疸癥狀,皮膚和被毛發典,有相當一部分豬只出現呼吸困難、喘氣,呈腹式呼吸,少數豬只出現拉稀癥狀,剖檢病變:全身淋巴結異常腫脹,切片均勻的白凈,肺臟腫脹,堅硬似橡皮樣,肝臟發暗,肝小葉間結締組織增生。
豬皮炎和腎病綜合癥(PDNS):發病率為0.5—2%,有時可達7%。在英格蘭的一次PDNS暴發,發病率達14%,而死亡率可至30%。最近在上海郊區該病的發病率達11%,而死亡率達40%,該病多發生于12-14周齡。病豬表現為厭食、呆滯、蒼白、發熱、結膜炎,呼吸困難、腹瀉,消瘦。剖解病變為腎臟腫大、蒼白、有病灶,成斑瀾狀,有時出血和水腫,淋巴結顯著腫大,腹水、胸腔、腹瀉、心包積液、粘膜,漿膜而出血,肺水腫或呈橡皮樣,有時皮下水腫、結腸、腸系膜水腫。
繁殖障礙:感染母豬發生流產、死產、產木乃伊,母豬的返情率增加,仔豬斷奶前死亡率上升,斷奶后母豬發情延遲,在死產和新生仔豬出現非化膿性、壞死性或纖維性心肌炎。此外,在公豬精液中也分離到豬II型圓環病毒。
增生性壞死性肺炎(PNP):發生PMWS的仔豬有呼吸困難、肺炎癥狀,在生長育肥期,豬II型圓環病毒與豬肺炎霉形體、豬流感病毒、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、多殺性巴氏桿菌等發生協同感染,導致病豬咳嗽、壞死性肺炎、發紫、豬只增重下降等癥狀。
4 豬II型圓環病毒的診斷
依據流行病學、臨診癥狀和病理變化可作出初步診斷,確診必須進行實驗室診斷。以發病早期,無菌采取病豬的血清。對病死豬立即無菌采取肺、扁桃體、淋巴結、脾、腎、肝等組織處小塊,處理后用PK-15細胞(無豬圓環病毒、豬細小病毒、豬繁殖與呼吸綜合癥病毒等6種病原污染)培養進行病毒分離,在第一代培養時,若間接免疫熒光試驗檢測為陰性應繼續傳代,如培養三代后間接免疫熒光試驗、聚合酵鏈式反應(PCR)檢測為陽性,則判定為豬II型圓環病毒分離陽性。
實驗室診斷中還可用血清中和試驗。該方法具有特異性高的優點,但費時、費力,而且操作繁瑣,不能檢出感染早期的抗體。ELLSA法其特異性強,重復性良好,比LFA的符合率高,且敏感性優于IFA,為我國大型豬場血清學檢查提供了一種快速、敏感、特異的方法,但它對條件要求非常高;Dot—ELLSA的結果比較直觀,但操作比較繁瑣,存在一定的非特異性,重復性也不一致:進口ELLSA試劑盒的檢測程序較為規范化,但需特殊儀器,同時價格昂貴。
5 豬圓環病毒病的防治措施
實驗獸醫生物安全措施:認真地對待引種工作,引種不慎往往是暴發疫情的主要原因。引進的后備母豬應進行嚴格的檢疫,所購買的種公豬、精液必須無II型圓環病毒感染。
改進飼養管理,減少應激,合理配制日糧。注意通風與保暖,保持豬舍干燥,改善豬舍的空氣質量,降低氨氣濃度。去勢和注射須遵循良好的衛生和消毒習慣。
在豬場內禁養貓、犬,定期驅蚊蠅、投餌滅鼠。搞好種豬群的凈化,堅持自繁自養。定期監測,合理制訂免疫程序,避免過早或過多地對仔豬免疫,減少各種應激因素對仔豬的影響。
在豬II型圓環病毒易感期最好不注射應激較大的疫苗,如仔豬副傷寒疫苗、口蹄疫疫苗、氣喘病疫苗等,某些可以靠藥物預防的細菌性傳染病,如豬丹毒、豬肺疫、豬鏈球菌病、仔豬副傷寒等,可以暫停疫苗注射。