（1.江蘇畜牧獸醫職業技術學院，江蘇泰州 225300；2.西北農林科技大學動物醫學院，陜西楊陵712100）
摘 要：樹突狀細胞(dendriticcells，DC)是目前已知機體內功能最強的抗原遞呈細胞，也是惟一能啟動初始T細胞介導免疫反應的一類細胞。論文綜述了多糖對DC功能的影響，多糖能夠刺激DC分裂增殖，同時能夠顯著地誘導DC成熟，能夠有效增強DC表面分子表達與增強細胞因子分泌的能力，從而促進DC的抗原遞呈能力。
關鍵詞：多糖；樹突狀細胞；抗原
多糖又稱多聚糖，是由醛糖或酮糖通過脫水形成糖苷鍵，并以糖苷鍵線性或分枝連接而成的鏈狀聚合物。它是由10個以上單糖基通過糖苷鍵連接而成，2個～9個單糖基通過糖苷鍵連接而成的稱寡糖，由一種單糖組成的多糖稱均多糖，由兩種以上單糖組成的多糖稱雜多糖[1]。多糖鏈是生命科學中除肽鏈、核苷酸鏈之外具有重大意義的第3鏈，它比肽鏈和核苷酸鏈含有更多的生物信息，被認為是生命奧秘中的第三里程碑[2]。研究表明，多糖具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒、降血糖、抗衰老、抗凝血、降血脂等多種生物活性；多糖與蛋白質、脂類形成的糖蛋白、脂多糖，在細胞的識別、分泌以及在蛋白質的加工和轉移等方面起著不容忽視的作用；此外它還能影響細胞的分裂和分化、調節細胞的生長和衰老，所以多糖的功能非常廣泛。樹突狀細胞(dendriticcells，DC)是目前公認的體內功能最強的抗原遞呈細胞(antigen presentingcells，APC)，它能有效攝取和處理抗原；然后遷移至T細胞區域，顯著地刺激初始T細胞(native Tcells)的增殖，從而激活T細胞產生特異性細胞毒作用，啟動機體免疫反應，在激發以抗原特異性細胞毒性T細胞過繼性免疫治療腫瘤中起著重要作用[3]。
1 多糖對樹突狀細胞增殖的影響
樹突狀細胞是目前已知機體內功能最強的抗原遞呈細胞，也是惟一能啟動初始細胞介導的免疫反應的一類細胞，在惡性腫瘤以及病毒感染的生物治療中起著重要的作用。但數量極微，給研究和應用帶來極大困難。王斌等[4]觀察到靈芝多糖可明顯刺激小鼠脾臟DC增殖。他們將不同質量濃度的靈芝多糖、細胞因子與不同濃度的靈芝多糖配合使用，研究其對小鼠脾臟DC的增殖影響，結果發現，靈芝多糖與細胞因子組相比可明顯刺激小鼠脾臟DC增殖，其較高質量濃度組作用明顯；靈芝多糖與細胞因子合用，與對照組相比均有顯著的增殖作用，且明顯高于細胞因子組。證明靈芝多糖不僅能促進小鼠脾臟DC的增殖，而且與細胞因子有顯著的協同作用。當歸多糖不僅能促進小鼠脾臟DC的增殖，而且與細胞因子有顯著的協同作用，具有類生長因子和協同生長因子的作用[5]。
2 糖對樹突狀細胞成熟的影響
DC在受到刺激后可以由未成熟狀態轉化到成熟狀態，成熟的DC具有很強的抗原遞呈能力。成熟的DC在細胞形態上發生了一定的變化，如體積增大，細胞形成許多突起；細胞表面高表達MHCⅡ類分子。邵鵬等[6]報道，黃芪多糖能夠提高小鼠骨髓來源的DC表面分子CD11c和MHCⅡ類分子的表達，并且呈黃芪多糖濃度依賴性；空白組DC的吞噬功能很強，LPS組DC和黃芪多糖處理組DC吞噬功能都明顯下降；黃芪多糖能夠促進DC白細胞介素-12的表達；電鏡觀察DC的超微結構，可見黃芪多糖處理組DC突起增多，形態上更加成熟。證明黃芪多糖能促進小鼠骨髓來源的DC表型及功能的成熟。韓進超等[7]報道，黃芪多糖雖不能誘導小鼠髓源性DC前體分化為DC，但可能有促進DC成熟的作用。朱杰等[8]發現用枸杞多糖刺激小鼠骨髓DC表達I-A/I-E、CD11c和分泌IL-12能力比空白對照組增加，吞噬FITC-dextran的能力下降，并可促進同種異基因T細胞的增殖。說明枸杞多糖可以促進體外培養的小鼠骨髓DC的成熟，促進DC誘導的免疫應答啟動。李聲方等[9]研究表明，當歸多糖可以促進乙肝病毒轉基因小鼠DC的成熟，上調其表面協同刺激分子CD86的表達，加強其抗原遞呈能力。大量文獻證明培養后期加入LPS可誘導DC成熟[10-11]，但對LPS持續性的刺激所產生的效果研究較少，季海峰等[12]研究脂多糖持續刺激對小鼠骨髓DC成熟的影響時，持續刺激組全程加入脂多糖，結果證明脂多糖持續刺激可抑制DC的發育成熟。學者已經對分化好的DC作了比較深入的研究，脂多糖作為一種DC激活和促成熟劑已經普遍被人們接受，但是目前對未分化的DC研究還比較少，有試驗報道，脂多糖對未分化的外周血單核細胞來源的DC(MoDCs)的負調節作用，MoDCs培養基中加入脂多糖將導致DC形態和表型的不成熟；細胞計數顯示DC獲得量減少，但脂多糖并非導致DC的凋亡；能夠上調IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的表達，但IL-12的含量卻很低；降低DC在混合淋巴細胞反應中促淋巴細胞增殖的能力；激活p38MAPK、抑制和降低NF-κB活性；用抗體中和IL-10能部分地改善脂多糖對DC的抑制狀態；p38抑制劑不僅能夠扭轉刺激所導致的形態和表型的不成熟，還能提高DC的抗原遞呈能力和促淋巴細胞增殖能力。這表明p38在脂多糖對DC的負調節作用中起非常重要的作用。此研究揭示了脂多糖對DC作用的雙重生物學功能，它既能夠刺激已經分化的未成熟的DC啟動免疫反應來對抗感染，同時它還抑制未分化的DC，從而減弱炎癥反應的程度達到保護正常機體組織的目的[13]。
3 多糖對樹突狀細胞表面分子表達與細胞因子分泌的影響
DC表面的MHCⅡ類分子主要參與遞呈外源性抗原，誘導抗原特異性CTL反應。DC對T細胞的激活還需要其表面表達的共刺激分子及黏附分子的參與，所以DC表面的CD80及CD54的表達可以影響DC的抗原遞呈功能以及能夠有效激活T細胞。郭文菁等[14]發現，羅勒多糖組DC能夠表達CD209、CD80、CD83、CD86、CD1a和HLA-DR，與對照組相比，羅勒多糖組DC表面分子CD80和HLA-DR的表達均明顯上調，證明羅勒多糖能夠調節DC表面分子CD80和HLA-DR的表達。陳國安等[15]在探討當歸多糖對慢性粒細胞白血病細胞誘導生成DC的影響時，發現GM-CSF/IL-4/當歸多糖培養的DC中CD83、CD80、CD86表達率明顯高于GM-CSF/IL-4組，證明當歸多糖能增強這些DC表面分子的表達。試驗同時也證明當歸多糖能促進IL-4和GM-CSF對慢性粒細胞白血病細胞誘導的DC的誘生與成熟。李羅清等[16]研究發現，用GM-CSF和IL-4誘導7d所獲得的DC表達一定水平的MHCⅡ類分子和共刺激分子CD80、CD86。培養第6天加入LPS可顯著提高其表達，而第0、3、6天連續加入脂多糖則顯著抑制其表達。
大量試驗證明，多糖還能夠影響DC細胞因子的分泌。侯安繼等[17]將羧甲基茯苓多糖加入經粒-巨噬細胞集落刺激因子和白細胞介素-4培養乙型肝炎病毒轉基因小鼠脾臟來源DC，ELISA法檢測樹突狀細胞分泌IL-12。羧甲基茯苓多糖在0～500mg/L濃度對HBV轉基因小鼠無毒性作用，并能顯著促進乙型肝炎病毒轉基因小鼠DC分泌IL-12，抑制IL-10的分泌。透明質酸是一種多糖，在炎癥反應中透明質酸被活化的成纖維細胞釋放的酶降解出一種低分子量片斷sHA能夠刺激產生大量的IL-1β、TNF-α和IL-12，并且TNF-α的表達有濃度和時間依賴性[18]。
4 多糖作用下樹突狀細胞對混合淋巴細胞反應的影響
DC越趨于成熟它遞呈抗原的能力越強，刺激淋巴細胞增殖的功能也逐漸增強。桑黃多糖試驗組DC促淋巴細胞增殖能力是空白組的5倍。IL-2是Th1細胞分泌的一種細胞因子，在混合淋巴細胞反應培養上清液中桑黃多糖試驗組IL-2的含量是空白組的2倍[19]。靈芝多糖試驗組DC促淋巴細胞增殖能力與空白組相比有11.6%～20.9%的增高，并且靈芝多糖呈濃度依賴性[20]。從真菌云芝中提取的蛋白多糖PSK處理人單核細胞來源的DC和小鼠骨髓來源的DC促淋巴細胞增殖能力都比空白組有顯著增高，并且DC細胞呈濃度依賴性[21]。
5 多糖對樹突狀細胞抗腫瘤作用的影響
成熟的DC可高表達MHC分子、協同刺激分子和黏附分子從而刺激初始T細胞誘導初級免疫反應，同時通過分泌IL-12活化自然殺傷(NK)細胞，促進Th1型細胞因子的分泌。王俊等[22]在研究不同劑量香菇多糖單獨或聯合gp100-DC瘤苗對荷瘤小鼠的免疫治療作用及其相關機制時，發現香菇多糖聯合gp100-DC瘤苗能有效抑制惡性黑色素瘤生長，無瘤生存率達到66.7%。香菇多糖聯合gP100-DC瘤苗治療后，能顯著增強荷瘤小鼠的細胞毒性T淋巴細胞(CTL)和NK細胞活性，提高脾細胞γ干擾素(IFN-γ)和IL-2分泌水平，組織學檢查發現瘤體及瘤周有大量炎性細胞浸潤，腫瘤細胞發生明顯壞死。榮微等[23]報道，香菇多糖能通過調節DC的免疫功能而增強其對腫瘤的浸潤功能，從而發揮更好的抗腫瘤作用，因此DC被認為是一種很強的天然佐劑，能誘導細胞毒性T細胞反應，在應用于抗感染和抗腫瘤免疫過程中發揮關鍵性的作用。
綜上所述，多糖在提高機體免疫力、預防多種疾病的發生方面起著重要的作用，這主要歸功于它能從整體上調節機體的免疫功能，使機體能夠有效的對抗疾病的發生發展。DC作為機體內功能最強大的抗原遞呈細胞，它能攝取各類抗原，在機體細胞免疫和體液免疫調控中均起著重要作用。到目前為止關于多糖作為免疫調節劑對DC的影響的研究報道雖然較少，但近年來逐漸被人們所重視，隨著研究的深入進行，將會有更多關于多糖與DC之間的關系被發現，它們之間的作用機制也將會被逐漸闡明，為合理有效的利用多糖奠定堅實的基礎。
作者簡介：黃文強(1979－`)，男，吉林柳河人，碩士，主要從事中藥藥理學研究。