摘 要： 目的：研究黃芪藥材皂苷類成分的指紋譜。方法：色譜柱：Hypersil

ODS（4.6×250mm，5-Micro），流動相：乙腈：水（梯度洗脫），柱溫：30℃，檢測波長：203nm，分析時間：60min，流速：1.0ml/min。結果：共標出黃芪藥材13個共有峰。結論：該方法可用于黃芪藥材的指紋圖譜質量控制。

關鍵詞 黃芪 色譜指紋譜 HPLC

指紋圖譜質控技術是保證中成藥功效、實現中藥現代化的關鍵<1>。控制中成藥質量，首先要抓源頭，控制中藥材的質量。蒙古黃芪分布于河北、山西、內蒙古。本文研究所用黃芪產地來源于山西雁北地區(qū)。山西雁北地區(qū)的渾源、應縣、陽高等地的黃芪，品質極佳，該地區(qū)種植面積16000公傾，出口量占我國黃芪出口量的60%以上<2>。本文采用HPLC研究了山西產蒙古黃芪的指紋圖譜，以控制藥材質量。

1 儀器與試劑

1.1 儀器

Agilent1100高效液相色譜儀，包括：四元泵，在線脫氣機，柱溫箱，VWD檢測器，化學工作站（chimstation

system工作站）；

1.2 試劑

乙腈：HPLC級，美國天地（TEDIA）試劑公司。

人參皂苷Re對照品：中國藥品生物制品檢定所，批號：0754-9608。

2 方法與結果

2.1色譜條件

柱：ZORBAXSB-C18（4.6×250mm，5-Micro）；柱溫：30℃；檢測波長：203nm；分析時間：70min；流速：1.0ml/min；進樣量：供試品溶液與對照品溶液各20ul；理論板數以人參皂苷Re計算應不低于200000。

2.2 內標選擇與配制

對照品選擇：黃芪甲苷對照品吸收較弱，且樣品中其對應峰很低，不便于分析；人參皂苷Re在此分析條件下與黃芪中其它成分可較好分離，因此選作內標，圖1為加有內標人參皂苷Re的藥材樣品圖，圖2為人參皂苷Re的圖譜，圖3為未加內標的藥材樣品圖。

對照品配制：精密稱取人參皂苷Re對照品2mg，置5ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.3 供試品的制備

取藥材粗粉2g，加甲醇50ml回流提取2次，每次2小時，合并甲醇液，回收甲醇，殘渣加熱水10ml溶解，用等量水飽和的正丁醇萃取5次，合并正丁醇液，用等量氨試液洗滌一次，棄氨試液，正丁醇液水浴蒸干，殘渣加60%乙腈溶解至5ml，離心，過濾，取濾液1ml，加內標（人參皂苷Re0.4mg/ml）1ml，搖勻，作為供試品溶液。

2.4 流動相的選擇

經試驗比較，以乙腈：水為流動相，梯度洗脫能較好地使樣品中各色譜峰分離且出峰最多；分析時間60分鐘，樣品2小時圖譜顯示，60分鐘后無特征峰出現。

2.5 方法學考察

（1）穩(wěn)定性試驗：

取同一供試品溶液，分別于0、2、4、8、24小時檢測，其相對保留時間穩(wěn)定，主要共有峰相對峰面積RSD為1.45%。結果表明：供試品溶液穩(wěn)定性較好。

（2）精密度試驗：

取同一供試品溶液，連續(xù)進樣5次，其主要共有峰相對峰面積RSD為1.13%，符合規(guī)定。

（3）重現性試驗：

取同一批號供試品5份，分別處理測定，主要共有峰相對峰面積RSD為0.86%，符合規(guī)定。

2.6 樣品測定

①測定了10批樣品，其指紋圖譜峰相對保留時間：表1。

②樣品指紋圖譜中主要峰的相對峰面積：表2。

3 結論與討論

3.1以人參皂苷Re為內標，研究標示了蒙古黃芪藥材指紋圖譜共有峰13個，相對保留時間依次為：0.037、0.059、0.130、0.794、1.027、1.047、1.093、1.125、1.421、1.441、1.456、1.491、1.616。

3.2 《中國藥典》規(guī)定黃芪來源于蒙古黃芪與膜莢黃芪，本文研究了山西渾源產蒙古黃芪Astragalus

membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus

(Bge.) Hsiao的指紋圖譜。膜莢黃芪的指紋譜及其與蒙古黃芪的指紋譜的特征有待進一步研究。

3.3 由于黃芪皂苷類成分UV沒有特征吸收，因此本文選擇其末端吸收203nm作為檢測波長，結果表明，方法可行。

3.4蒙古黃芪在本文條件下指紋圖譜的特征為兩組7強峰：第一組4強峰相對保留時間依次為：1.027、1.047、1.093、1.125，第二組3強峰相對保留時間依次為：1.421、1.456、1.491，比較容易識別。