目前2005版中國藥典對阿奇霉素相關物質的測定采用薄層色譜法（TLC），對含量的測定是采用微生物檢定法，方法的專屬性不好。USP以及歐洲藥典現行分析方法是采用液相色譜法。

以下是沃特世（Waters?）公司實驗室根據歐洲藥典的HPLC方法分析阿奇霉素相關雜質所得到的色譜圖（阿奇霉素以及15種雜質完全分離）：

色譜條件：

色譜柱：XBridgeTM C18 4.6mm ×250, 5 μm

檢測波長：254nm

同時國家藥監局對于阿奇霉素兩種注射液有關物質檢查項進行了修訂【請參考“關于修訂阿奇霉素氯化鈉注射液和阿奇霉素葡萄糖注射液藥品標準有關事宜的公告(國食藥監辦[2007]334號)”】，修訂后的檢驗方法也是采用液相色譜法，流動相pH值為8.2，方法中推薦使用的色譜柱為XBridgeShield RP18。

上述分析方法對液相色譜柱的要求：

無論是歐洲藥典方法還是藥監局公告中要求的方法，流動相的pH值都超過8。眾所周知，對于硅膠基質的反相色譜柱（無論是超純硅膠還是傳統硅膠填料），其可以耐受的流動相pH范圍是2－8，pH超過8的流動相條件將造成硅膠基體的溶解，導致色譜峰形變差，分離度下降,色譜柱壽命短等不良后果。

此前解決這個問題的方法是使用聚合物填料（或填料表面有聚合物涂層），但聚合物填料會有分離選擇性難以預測、機械強度低、柱床溶脹/收縮的情況以及柱效低等問題。

沃特世公司于1999年首次推出了有機/無機雜化填料顆粒專利技術XTerra?（此為第一代甲基雜化顆粒)，2004年伴隨著超高效液相色譜UPLC?推出了第二代亞乙基橋雜化顆粒(BEHTechnologyTM)，它結合了硅膠填料機械強度高、柱效高以及保留行為可預測的優點和聚合物填料耐受高pH的優點，徹底突破了反相色譜柱在高pH條件下應用的局限性。XBridge是沃特世公司2005年推出的基于BEHTechnology填料基體的色譜柱，有不同的鍵合化學，包括C18，極性嵌入基團ShieldRP18，C8和苯基柱，它對任何類新的化合物都提供好的色譜峰形、高柱效以及前所未有的超寬pH應用能力，在高pH條件下柱壽命比硅膠基體反相柱提高十倍以上！

為什么雜化顆粒可以保證高pH條件的柱壽命呢？

目前普遍接受的有關高pH條件下反相硅膠柱損壞的機理如下：OH－親核進攻硅膠晶格中的硅氧鍵，溶解后的原硅酸在堿性含水流動相條件下溶解度較大，因此硅膠顆粒基體將發生溶解，當水解過程達到臨界點時，將造成柱內空洞而導致柱效喪失。因此，有些廠家宣稱的高密度或多齒鍵合相適用于高pH應用是不準確的，高密度的烷基鏈雖然能夠在一定程度上對OH－進攻硅膠基體有所“屏蔽”，但并不能從根本上解決硅膠基體在高pH條件下溶解的問題。

對于無機/有機雜化顆粒來講，它們在高pH流動相中要穩定得多。我們先前將XTerra系列填料在高pH條件下的穩定性改善歸功于雜化顆粒骨架中硅碳有機結構所起的保護作用1，2。分布于XTerra雜化顆粒整個結構網絡(不僅僅在顆粒表面)的硅甲基呈疏水性，被認為對硅膠的結構單元起了一種屏蔽作用。XBridge顆粒當然也可從類似的疏水性屏蔽效應中獲益，但它與XTerra雜化顆粒相比的更大優勢是，內嵌的結構性亞乙基橋單元完全不會水解。因此，要從XBridge顆粒中完全釋放出一個亞乙基橋單位必須同時打斷多達6個硅氧鍵。也就是基于這個原因，XBridge顆粒即使是沒有進行化學鍵合時亦表現出非常優異的抗高pH腐蝕特性。這一特性，加之XBridge顆粒非常杰出的機械強度，很好地解釋了XBridge系列色譜柱在高pH流動相中罕見的超長壽命。

說明：

Waters，UPLC和XTerra為沃特世公司的注冊商標。XBridge和BEH Technology為沃特世公司的商標。