乳房炎是對奶牛養殖業危害最嚴重的疾病之一,特別是隱性乳房炎,由于沒有明顯的臨床癥狀,不僅會導致奶牛乳產量和質量的降低,而且還可能傳染給其他奶牛,導致疾病的擴散。因此,對隱性乳房炎進行監測是奶牛場最重要的工作之一,由于患隱性乳房炎的奶牛沒有明顯的臨床癥狀,因此只有運用各種方法對乳汁進行檢測,通過有關生理、生化等指標的變化來判斷和評價乳房炎的發生情況。
目前,應用于奶牛隱性乳房炎檢測的方法有多種,主要有細胞學檢查、酶學指標檢測、應激蛋白檢測和物理性質檢測等。
1細胞學檢查
根據乳汁中體細胞數含量的多少來判斷是否患有隱性乳房炎,是一種比較可靠的方法,目前在臨床上應用的比例較高,常用的有乳汁體細胞直接計數法和間接計數法兩種。
直接計數法就是通過直接計算每毫升牛乳中細胞數量的方法來評價奶牛的乳房炎發病情況。如直接顯微鏡計數法(DMSCC),該方法檢測成本低,但因操作人員經驗水平和所處環境條件的不同,導致數據結果誤差較大,且耗時長,不易掌握,不適合大批量快速檢測。目前較先進的是采用熒光流式細胞技術對牛奶中的體細胞進行熒光染色處理的自動計數法。優點是快速、準確、誤差小、重復性好,電腦自動計數并打印結果,目前已經有商業的儀器出售,該方法的缺點是需要專門的儀器設備,對于一些規模較小的養殖場(戶)會增加成本。此外,雖然各個國家對體細胞計數法比較重視,但是有關的規定和標準卻不盡相同,一般在200000~500000個/毫升以內為安全。
間接計數法比較著名的是加州乳房炎測試法(CMT),其原理是將乳汁中的細胞破壞后,根據釋放出的DNA沉淀或凝塊的數量間接判斷細胞數目多少的方法。據此原理還衍生出了Wisonsin乳房炎測試法(WMT)、Michigan乳房炎測試法(MMT)、蘭州乳房炎測試法(LMT)等等改進方法。此外還有應用表面活性劑配方制成的SMT系列診斷液。總體來說,這一類方法操作簡單,診斷迅速,成本較低,但缺點是結果判定的主觀性較強,容易出現主觀誤差。
2微生物學檢測
對乳汁的病原微生物進行分離培養和鑒定,并與患牛的臨床癥狀和乳汁的性狀結合起來,判定乳房炎的發生情況。如在乳汁中分離到無乳鏈球菌、金黃葡萄球菌、大腸桿菌或霉形體時,就要注意這些病原可能與牛群的乳房炎發生有關系。但需要指出的是,有些隱性乳房炎不能在乳汁中檢出病原菌,而有些病原菌經常存在于乳房內,檢出時牛只不一定發病。因此根據乳汁中有無病原菌來判斷奶牛是否患有乳房炎需要綜合分析。
3乳汁理化性質的檢測
3.1乳汁PH值檢查法
研究證實當發生乳房炎時,乳汁的PH值升高,升高的程度取決與炎癥的程度。因此通過檢測乳汁PH值的方法可以檢測乳房炎。常用的方法有溴麝香草酚藍試驗(BTB)法和乳房炎試紙法。
3.2乳汁導電性檢查法
當奶牛發生乳房炎是,其乳汁中的離子濃度升高,進而表現為導電性的增加,因此,通過檢測牛奶導電性的變化可以用于乳房炎的診斷。但不同的個體及不同的飼養管理狀況,乳汁電導率變化較大,因此判斷隱性乳房炎的關鍵是確定不同牛群正常乳汁的閾值。目前國內外有很多基于這一原理的奶牛乳房炎電子診斷儀,實現對奶牛乳房炎及牛奶形狀的快速、綜合檢查。