SPA免疫檢測技術是根據葡萄球菌A蛋白(SPA)能與多種動物lgG的Fc端結合的原理,用SPA標記物(酶、熒光、放射性等標記)顯示抗原與抗體結合反應的各種免疫檢測試驗。最早于1982年建立了酶標SPA的ELISA試驗。
?。ㄒ唬┰?
SPA可從金黃色葡萄球菌細胞壁中提取,為395個氨基酸組成的多肽,有四個能與1gG的Fc結合的位點,即一個SPA分子可結合4個lgG分子。SPA可與人、豬、狗、小鼠、豚鼠、成年牛、綿羊等20多種動物lgG結合,而與兔lgG的結合力報道不一,雞、馬、山羊、犢牛lgG 不能與SPA結合。因此,制備SPA標記物后,可應用于多種動物,不受種屬限制,可應用于同一種動物的各種免疫檢測(如豬的各種傳染病的酶標檢測),有了SPA標記物,就不需標記各種抗體或抗原,即SPA標記物可作為一個通用試劑,它使免疫檢測方法向更簡便、更商品化進了一大步。
?。ǘ?
1.SPA放射免疫分析 在固相放射免疫分析中,可利用125I-SPA代替標記的抗抗體。先將抗原包被于固相載體,然后加入被檢血清作用洗滌后,加入125I-SPA作用,洗去未結合的部分,計數測定管中的放射活性。此法靈敏度高,可測出ng/ml的抗體含量,需時短,重復性好。同樣也可建立檢測抗原的SPA放射免疫分析。
2.SPA酶標檢測技術 用辣根過氧化物酶標記的SPA(HRP-SPA)可用于酶免疫組化法染色。由于HRP-SPA比HRP-IgG分子小,能更好地穿過細胞膜,使在免疫電鏡亞細胞水平定位分析中,具有更好的辨析力。用HRP-SPA建立的ELISA則具更多的優越性,即它可作為多種動物,以及同一種動物多種抗原抗體檢測的通用試劑,已經得到了廣泛的應用。如國內已建立了檢測豬瘟的SPA-ELISA試劑盒 。
3.SPA熒光抗體技術 熒光SPA主要用于淋巴細胞表面標志研究,亦可代替熒光抗體進行病毒抗原、腫瘤抗原等的檢測。
4.SPA其他標記技術 如SPA膠體金、SPA-發光免疫技術等。
?。ㄒ唬┰?
SPA可從金黃色葡萄球菌細胞壁中提取,為395個氨基酸組成的多肽,有四個能與1gG的Fc結合的位點,即一個SPA分子可結合4個lgG分子。SPA可與人、豬、狗、小鼠、豚鼠、成年牛、綿羊等20多種動物lgG結合,而與兔lgG的結合力報道不一,雞、馬、山羊、犢牛lgG 不能與SPA結合。因此,制備SPA標記物后,可應用于多種動物,不受種屬限制,可應用于同一種動物的各種免疫檢測(如豬的各種傳染病的酶標檢測),有了SPA標記物,就不需標記各種抗體或抗原,即SPA標記物可作為一個通用試劑,它使免疫檢測方法向更簡便、更商品化進了一大步。
?。ǘ?
1.SPA放射免疫分析 在固相放射免疫分析中,可利用125I-SPA代替標記的抗抗體。先將抗原包被于固相載體,然后加入被檢血清作用洗滌后,加入125I-SPA作用,洗去未結合的部分,計數測定管中的放射活性。此法靈敏度高,可測出ng/ml的抗體含量,需時短,重復性好。同樣也可建立檢測抗原的SPA放射免疫分析。
2.SPA酶標檢測技術 用辣根過氧化物酶標記的SPA(HRP-SPA)可用于酶免疫組化法染色。由于HRP-SPA比HRP-IgG分子小,能更好地穿過細胞膜,使在免疫電鏡亞細胞水平定位分析中,具有更好的辨析力。用HRP-SPA建立的ELISA則具更多的優越性,即它可作為多種動物,以及同一種動物多種抗原抗體檢測的通用試劑,已經得到了廣泛的應用。如國內已建立了檢測豬瘟的SPA-ELISA試劑盒 。
3.SPA熒光抗體技術 熒光SPA主要用于淋巴細胞表面標志研究,亦可代替熒光抗體進行病毒抗原、腫瘤抗原等的檢測。
4.SPA其他標記技術 如SPA膠體金、SPA-發光免疫技術等。