摘　要：以等比濃度灌胃法測定蒼術揮發油對小鼠的急性毒性，采用改良寇氏法計算蒼術揮發油對小鼠的半數致死量(LD50 )。測得LD50為2245.87 mg/kg，LD50的95%可信限為1 958.3 mg/kg～2 575.7mg/kg，表明蒼術揮發油有一定毒性，應引起臨床用藥的注意。

關鍵詞：蒼術；揮發油；LD50；小鼠

蒼術為菊科植物茅蒼術或北蒼術的干燥根莖。性溫，味辛、苦；具有燥濕健脾、祛風散寒、明目的功效。主治脘腹脹滿，泄瀉，水腫，腳氣痿躄，風濕痹痛，風寒感冒，夜盲[1]。蒼術主要含揮發油，由一系列的倍半萜、聚乙烯炔類及少量的酚類、有機酸類等組成[2]。揮發油的主要成分是β-桉葉醇、茅術醇、蒼術酮，有促進胃腸運動[3] 、抗氧化作用[4]、增強琥珀酰膽堿誘導的神經肌肉麻醉阻斷作用等[5]。為了給臨床用藥提供理論依據，進行了半數致死量測定。

1　材料與方法

1.1　材料

1.1.1　試藥　蒼術揮發油，由中醫藥大學提取并提供，批號：060915。

1.1.2　試驗動物　昆明小鼠，體重為20 g±2g，雌雄各半，由中國科學院遺傳與發育生物學研究所提供，許可證編號2002-0006。

1.2　方法

1.2.1　供試溶液的配制　稱取蒼術揮發油16.9 g和吐溫-80 33.8 g，溶于滅菌雙蒸水中，定容到65mL，配制成濃度為260 g/L蒼術揮發油溶液，室溫保存備用(此濃度的吐溫-80不會引起小鼠中毒)。

1.2.2　小鼠急性毒性試驗　預試驗前對小鼠進行 7 d的喂養觀察，觀察期內小鼠自由采食、飲水。在反復大跨度摸索劑量范圍的基礎上，再做批量的預試驗。

預試驗將小鼠隨機分成7 組，每組 4只，雌雄各半，各組按等比濃度灌胃給藥，確定試驗小鼠0%和100%死亡的劑量范圍。根據預試驗所用劑量，按公式求出正式試驗的劑量比 r。

r ＝log－1(logb－loga/n－1)

式中：r ＝相鄰兩組劑量的比值；b ＝最大劑量；a ＝最小劑量；n ＝預分組數。

正式試驗時將小鼠隨機分成 6 組，每組 10 只，雌雄各半，組間計量比值為 r，按1∶K (K＝1/r)等比稀釋法，配制等比濃度揮發油藥物，按 0.2 mL/10 g灌胃給藥，觀察記錄各組小鼠死亡數。

給藥后觀察小鼠的臨床癥狀(皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、心血管系統、生殖泌尿系統、胃腸系統、自主及中樞神經系統行為表現及變化情況)，對死亡小鼠及時剖檢，觀察病理變化。

根據改良寇氏法公式計算半數致死量(LD50 )：LD50＝ lg－1[Xm－i (Σp－0.5)]；LD50的95%可信限＝lg－1(LD50±1.96×Sx50)；Sx50＝i

式中：Xm＝最大劑量組劑量的對數值；i ＝劑間比的對數值；Σp＝各組死亡率之和；p＝各組死亡率；q＝各組存活率，q＝1－p；n＝各組動物數；Sx50＝ lg LD50的標準誤差。

2　結果

2.1　蒼術揮發油對小鼠的急性毒性試驗結果

2.1.1　蒼術揮發油對小鼠急性毒性試驗的預試驗結果　初步確定0%和100%死亡劑量分別是1 077.3 mg/kg和4 000.0mg/kg。根據公式計算結果r ＝1.3。

2.1.2　蒼術揮發油對小鼠的急性毒性試驗　試驗結果見表1。

將表1數據代入改良寇氏法公式中計算得出：

LD50＝2 245.87 mg/kg

LD50的95%可信限為1 958.3 mg/kg～2 575.7 mg/kg。

表1　蒼術揮發油對小鼠的急性毒性試驗結果

Table 1 The results of acute toxicity using volatile oil ofAtractylodes chinensis

給藥后小鼠活動減少，趴臥不動，運步失調，對外界反映降低。呼吸減慢，次數由120次/min～180次/min降低到60次/min左右，采食量下降或不采食，體重減輕；未死亡的小鼠，給藥1d后恢復正常，繼續觀察7 d未發現異常，采食、活動恢復正常。

部分小鼠死亡時，臉面部、尾巴發黑。4 h內死亡小鼠解剖無明顯的病理變化；延長至48h內死亡小鼠剖檢時可見膀胱集尿、膽汁分泌增多、肺充血或淤血；部分小鼠有腸道水腫，甚至胃底和十二指腸出血；晶狀體混濁，其他未見異常。

3　討論

蒼術揮發油對昆明小鼠灌服給藥的急性毒性試驗得LD50為2 245.87 mg/kg體重，95%可信限為1 958.3 mg/kg～2575.7mg/kg體重。根據化學物急性毒性(LD50)劑量分級表，蒼術揮發油分級為低毒。試驗過程中小鼠出現少動、運步失調，呼吸減慢等中毒表現，也說明蒼術揮發油具有一定的毒性，應引起臨床用藥的注意。

蒼術揮發油對小鼠機體的影響，蒼術中含有的β-桉葉醇、茅術醇對小鼠有鎮靜作用，抑制小鼠自發活動[6]，這可能是給小鼠灌服蒼術揮發油后中毒時出現活動減少、趴臥、對外界反映降低等臨床癥狀的原因，而膀胱蓄尿可能與蒼術揮發油的利尿作用有關[7]。蒼術含有的蒼術素能促進膽汁分泌作用[6]，這與解剖時出現的膽汁增多癥狀相符。小量蒼術揮發油有抑制心搏、減慢心率及鎮靜作用；大量可致心臟麻痹，使呼吸麻痹而致死[8]。大劑量試驗組中小鼠死亡的主要原因可能與其對心血管及呼吸抑制有關，而其具體的毒性成分及中毒機理尚有待更進一步探討。