豬“高熱病”即豬高熱綜合征，是一種發病率和病死率均較高的疾病，主要發生在育成期豬和部分母豬^[1]，病豬臨床主要表現為體溫升高，精神沉郁，食欲不振或廢絕，呼吸困難，喘氣，部分豬伴有皮膚發紅變紫等癥狀，少數毛孔有出血點病原主要為多種病毒和細菌、寄生蟲的混合感染和繼發感染^[2]，包括豬瘟病毒(CSFV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬流感病毒(SIV)、偽狂犬病病毒(PRV)、豬圓環病毒2型(PCV2)、豬鏈球菌(SS)^[3]、副豬嗜血桿菌(HP)、大腸埃希菌、沙門菌、巴氏桿菌^[4]、豬丹毒桿菌等細菌的混合感染。

2006年－2007年，濟寧市各縣市的許多豬場，生長育成豬和部分母豬、保育豬暴發豬“無名高熱病”，大部分發病豬場患豬發病率在40%以上，病死率高達50%～70%。對濟寧市3個正規養豬場(定為A點),3個小規模養殖戶(定為B點),7個散養農戶(定為C點)共2 760頭豬進行了流行病學調查，統計出發病率；并對混合感染和繼發感染豬“高熱病”的幾種細菌進行了檢測、鑒定；同時對豬“高熱病”細菌多重感染狀況進行統計與分析。

1　材料與方法

1.1　材料

1.1.1　被檢材料　取豬“高熱病”中病死或瀕死架子豬、母豬血液、組織器官共146份，送實驗室進行診斷。

1.1.2　培養基及主要試劑　普通營養瓊脂培養基、鮮血瓊脂平板培養基、血清肉湯培養基、普通肉湯培養基、麥康凱瓊脂培養基和生化試驗用培養基、生化反應管，均購自上海醫學化驗所試劑廠，按參照文獻[5]制備。

1.1.3　實驗動物　昆明小白鼠，體重20 g～23 g，為清潔級，雌雄各半，購自山東泰邦生物有限公司。

1.1.4　儀器設備　顯微鏡及其它儀器均由山東農業大學微生物實驗室提供。Anke TGL-16B型臺式離心機，購自上海安亭科學儀器廠。

1.2　流行病學調查

2006年、2007年夏季豬“高熱病”普遍流行，危害十分嚴重。2007年7月中旬，分別對本市大部分縣市區不同養豬場(戶)進行流行病學調查，對病豬的發病情況、臨床癥狀進行實地考查了解，并對瀕死豬和死亡豬進行剖檢觀察，記錄主要病理變化。

1.3　病原學檢查

1.3.1　細菌的分離培養　分別采取死亡豬的內臟器官，在鮮血瓊脂平板及普通營養瓊脂平板上進行劃線分離，37 ℃培養24 h～48 h，挑選單個菌落進行純培養。將獲得的純培養物再進行下述試驗檢查。

1.3.2　細菌形態與培養特征觀察　將分離菌分別接種到鮮血瓊脂平板、普通營養瓊脂平板上，37 ℃培養24 h～48 h，觀察菌落特征。純培養物分別做革蘭氏染色，觀察菌體形態特征。

1.3.3　細菌生化試驗　按參照文獻[6]方法，取純培養物，分別接種于細菌生化特性鑒定用的培養基中，進行氧化酶、硝酸鹽(還原)、糖(醇及苷)類代謝、H₂S、檸檬酸鹽(利用)試驗等較系統的生化特性測定。

1.3.4　人工感染試驗　將分離的各菌株在普通肉湯培養基中，37 ℃培養12 h～18 h后，腹腔接種小白鼠(5只/株)，每只接種0.2 mL(菌液濃度均調整到2×10¹⁰cfu/mL)，無菌生理鹽水作對照，接種后每天觀察記錄發病死亡情況，同時從發病死亡的小鼠中再分離細菌，從中篩選出致病力最強的菌株。

1.3.5　藥敏試驗　將分離的菌株，分別采用瓊脂擴散法(K-B法)進行常用抗菌類藥物的敏感性試驗，37 ℃恒溫培養18 h～24 h后取出，以抑菌圈直徑作為判定指標，判斷標準依據美國臨床標準委員會(NCCLS)手冊2005版。

1.3.6　細菌多重感染的狀況統計及分析　對146份病料樣品均采用上述方法進行病原學檢查，統計所分離細菌的分離率，并分別統計單獨感染、二重感染、三重感染和四重感染率。

2　結果

2.1　流行病學調查

病豬主要表現為持續高熱40 ℃～42 ℃，食欲下降，精神不振，采食量下降或食欲廢絕，被毛粗亂；皮膚表現出嚴重出血，呈紫紅色，有斑塊狀；豬群便秘，糞便秘結，呈球狀，部分豬拉黃綠色稀便，尿黃而少、混濁；出現嚴重的腹式呼吸，氣喘急促；部分母豬在懷孕后期出現流產，死胎，弱仔和木乃伊；病程稍長的病豬全身蒼白，出現貧血現象，持續性消瘦，多種抗生素治療無效果，最后全身抽搐而死。2006年－2007年，豬“高熱病”在濟寧大部分地區豬群中暴發，主要危害架子豬、生產母豬。在濟寧不同地區，其發病率、病死率高低不等(表1)。

表1　各場(戶)“高熱病”病豬發病和死亡情況

Table 1　The state of death and morbility of swine high fever in different farms