摘 要2004年12月份,采用引進的莎能奶山羊凍胚,以關中奶山羊為受體進行了胚胎移植。同期發情處理受體羊122只,移植49只,40天后B超診斷妊娠32只,出生29只。結果表明本次凍胚移植產生了較明顯的經濟效益,技術成熟可以推廣應用。
關鍵詞 莎能奶山羊;凍胚;同期發情處理;胚胎移植
莎能奶山羊原產于瑞士,羊體呈白色,是世界上最優秀的奶山羊之一。成年公羊體重80~100kg,成年母羊60~80kg,泌乳期280~300天,產奶量800~1600kg,個體最高產奶量為3430kg,繁殖力強,遺傳性能強,產羔率在170~180%,利用年限8~10年,被廣大的養殖戶稱為“家庭的小奶牛”。我國從20世紀60年代引進莎能奶山羊,進行了純種培育和雜交改良,取得了較好的效果,得到了廣大養殖戶的認可,市場的需求量增大。但活體引進費用高、風險大,給莎能奶山羊的推廣帶來一定的限制。近年來,隨著胚胎移植技術的研究與推廣,這個問題有望解決。2004年11月~12月份,云南中科胚胎工程生物技術有限公司在其基地及昆明周邊地區開展了莎能奶山羊的凍胚移植,其效果較好,經濟效益可觀,值得推廣。
材料與方法
1 材料
1.1 胚胎的來源與質量
胚胎是從新西蘭引進的冷凍體內胚。冷凍前為發育至7天的A級桑椹胚和囊胚,胚胎供體的父母本均為高產純種的莎能奶山羊,系譜清楚。
1.2 時間與地點
同期發情與移植時間安排在了2004年的11月下旬和12月上旬。試驗地點在云南中科胚胎工程生物技術有限公司養殖基地及昆明周邊地區。
1.3 受體來源
所選擇的受體是從陜西購進的關中奶山羊,健康、發情周期正常、空懷,年齡在2~5歲,經產羊在產后3個月以上,且斷奶。在處理前2個月驅蟲,并單獨飼養,加強管理。
2 方法
2.1 受體的同期發情處理
采用埋植陰道栓CIDR(新西蘭)和注射Folligon(澳大利亞)的方法。在去栓前1天注射Folligon 200IU,撤栓后24~72小時進行發情鑒定。
2.2 胚胎的解凍
采用四步法解凍脫甘油,解凍溫度為30℃,環境溫度保持在25℃。
2.3 胚胎移植
對發情后7±0.5d的受體進行移植,采用常規的手術方法進行移植。拉出卵巢記錄黃體和卵泡數,將胚胎吸入移植針移入子宮角尖端,每只受體羊移入胚胎1枚B級以上胚胎,腹腔內注入150ml溫生理鹽水,常規縫合。對無黃體、小黃體、退化黃體及卵巢上有大卵泡的受體不移植。
2.4 術后護理
對受體羊術后加強護理,術后肌注抗菌素及術部噴涂碘酊,注意觀察返情情況,飼喂全價飼料,規范管理,分娩前后注意母仔護理。
結果
1 受體羊同期發情處理的結果(見表1)
共同期發情處理受體羊122只,發情94只,移植49只,妊娠31只,產羔29只,受體利用率為40.8%。
表1 受體羊同期發情處理效果統計表
處理
時間 受體
埋栓數 去栓
受體數 同期發
情受體數 手術
受體數 移植
受體數 同期發情
受體利用率% 受 體
利用率%
20/11 122 120 94 94 49 52.1 40.8
備注:同期發情受體利用率=(移植受體數/同期發情受體數)×100%;受體利用率=(受體移植數/去栓受體數)×100%。
2 胚胎移植結果及產羔(見表2)
共解凍凍胚52枚,移植到發情后7±0.5的49只受體羊子宮角,40天后用B型超聲波診斷儀妊娠檢查,有31只懷孕,2只流產,29只受體產羔29只。統計得術者A移植妊娠率為66.6%,術者B移植妊娠率為51.2%,差異明顯。
表2 胚胎移植效果統計表
移植
時間 移植
頭數 解 凍
胚胎數 受 體
妊娠數 受 體
流產數 分 娩
受體數 產羔
總數 妊娠率
% 產羔率
%
21/12 49 52 31 2 29 29 63.2 93.6
備注:有3枚胚胎在解凍以后判定為C級,搭配移植。
討論
1 影響受體同期發情效果和受體利用率的因素
受體同期發情效果主要受到受體羊的健康狀況、營養情況、飼養管理的規范程度、同期發情處理時間、受體羊同期處理時所處的生理階段和同期發情處理程序等因素的影響。選擇受體時應選擇體型較大,性成熟的關中奶山羊作為受體,這樣可減少難產率,提高羔羊的成活率。根據多次試驗,山羊的同期發情時間和移植時間應放在2~5月和9~12月之間。
受體利用率直接影響胚胎移植的經濟效益,發情鑒定的準確性,受體的營養水平是影響受體利用率的主要因素。在發情鑒定時應選擇性欲比較旺盛的試情公羊進行發情鑒定,應在受體羊處理前的2個月進行補飼,加強管理,盡量減少應激反應。同時處理受體時可連續處理幾批,這樣可將發情提前或滯后的部分受體充分利用,提高受體的利用率。
2 影響胚胎移植妊娠率的因素
胚胎移植的妊娠率受著多方面因素的影響,這些因素主要有:胚胎的質量、受體的黃體情況、胚胎移植的季節、受體的飼養管理、移植技術、無菌操作和移植后的保胎工作等。陳永昌等報道從妊娠率來看,A、B級囊胚和A級桑椹胚差異不顯著,B級桑椹胚的妊娠率顯著降低,C級桑椹胚和囊胚的妊娠率均低于10%。另外通過分析本次的試驗的妊娠結果的比較,手術操作者的熟練程度對受胎率也有所影響,熟練人員和初學者移植后的妊娠率相差在15.4%。
3 經濟效益分析
本次共解凍莎能奶山羊的凍胚 52 枚,移植到 49 只受體,共產羔 29 只,平均產羔1只需 1.79枚胚胎,大大降低了引種成本。由此可說明通過莎能奶山羊的胚胎移植可加快該品種的繁殖速度,而且為改良當地的山羊品種提供了大量的公羊,能夠創造較好的經濟效益和社會效益。
結論
用關中奶山羊作莎能奶山羊的受體效果好;在移植前2個月驅蟲,分圈飼養,提高營養水平,選擇合適的季節,熟練人員操作等措施可提高移植受胎率;從國外引進莎能奶山羊的胚胎,進行胚胎移植進行良種繁育,可減少引種費用和避免活體引進的風險,并可創造較好的經濟效益和社會效益。