宋長緒 王浩文 劉燕玲 黃忠 蔡汝健

（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所豬病研究室，廣州 510640）

我國的養(yǎng)豬水平和規(guī)模在近年有了很大的提高。但隨之而來的是豬群的密度也越來越大，豬的抵抗力逐步降低，另外在引進(jìn)新品種時也不斷引進(jìn)新的豬病，特別是免疫抑制性疾病如豬圓環(huán)病毒和豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒的引進(jìn)，導(dǎo)致豬病越來越錯綜復(fù)雜，給診斷和防制帶來很多困擾。因而對于一個現(xiàn)代養(yǎng)豬企業(yè)，出現(xiàn)豬病的問題或生產(chǎn)表現(xiàn)不理想，不能簡單地歸因于某一疾病，而要全面系統(tǒng)的分析問題，找到問題的關(guān)鍵，提出綜合防制措施。但很多豬場即使通過臨床觀察、病理解剖、實驗室檢測分析，仍然不能準(zhǔn)確地獲得豬病的有關(guān)信息，制定有針對性的綜合防制措施，這就關(guān)系到要正確設(shè)計豬場的檢測項目，對整個豬群的疫病進(jìn)行動態(tài)的分析，然后對取得的化驗結(jié)果能夠正確分析，并用于指導(dǎo)生產(chǎn)。本文是對某一大型豬場的疾病的臨床觀察和主要豬并的動態(tài)的系統(tǒng)的實驗室檢測于結(jié)果分析，希望能拋磚引玉，通過對這一個案的分析和處理，給廣大養(yǎng)豬企業(yè)和豬場獸醫(yī)提供一個診斷和分析豬病的參考。

1 材料與方法

1.1 豬場的背景

該豬場是一個大型豬場，年出欄量為60，000頭，檢測的是其中的一條生產(chǎn)線，存欄母豬為1，200頭。產(chǎn)房小豬的成活率、保育小豬的成活率以及生長肥育舍的成活率都在較高的水平。生長肥育的早期有消瘦、喘氣等問題。母豬的年均窩產(chǎn)活仔數(shù)偏低，主要表現(xiàn)在復(fù)配率高、流產(chǎn)率高、死胎木乃伊和弱仔多。另外通過屠宰場的觀察可以看到中豬的肺有較多的炎癥反應(yīng)，脾有腫大、腎有腫大及出血點等問題。豬瘟疫苗是某品牌的兔化弱毒, 用牛睪丸細(xì)胞培養(yǎng)而成, 4和8周齡分別注射3和5頭份；偽狂犬疫苗是某品牌的進(jìn)口疫苗，母豬每年免疫3次，小豬10周齡注射一次；小豬在10日齡和21日齡分別注射豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒弱毒疫苗（美洲株）。

1.2 血清樣品的采集

對該生產(chǎn)線的各個階段的豬，包括后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬和1、2、3、4、6、8、10、12、14、16、18、20周齡的豬各10頭（12周齡組為9頭）采血5毫升，分離血清用于檢測分析。分析豬繁殖與呼吸障礙綜合征時,也用的是同一生產(chǎn)線的豬,但分組有一定的變化,采集了后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、出生后1小時（吃初乳前）、7、14、21、45、90、180日齡的豬各10頭，采集血液5毫升，分離血清用于檢測分析。

1.3 檢測試劑盒

豬瘟抗體檢測用競爭ELISA方法，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品; 豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體檢測應(yīng)用間接ELISA法，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品；豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測用間接ELISA方法，試劑盒由華中農(nóng)大出品；豬胸膜肺炎放線桿菌抗體檢測用ELISA，試劑盒為HIRPA產(chǎn)品; 豬偽狂犬病病毒野毒抗體檢測為競爭ELISA，試劑盒為IDEXX產(chǎn)品；豬衣原體檢測用間接血凝試驗，試劑盒由蘭州獸醫(yī)研究所提供；豬弓形體檢測用間接血凝試驗，試劑盒由蘭州獸醫(yī)研究所提供。所有檢測分析在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所豬病研究室完成。

2 結(jié)果

對不同階段的豬群進(jìn)行了系統(tǒng)的采血化驗分析，主要分析了豬瘟、豬偽狂犬病、豬傳染性胸膜肺炎、弓形體、衣原體等疾病，結(jié)果見圖1。 豬繁殖與呼吸障礙病毒抗體的檢測結(jié)果見圖4。

通過檢測分析發(fā)現(xiàn)豬場的疫病情況比較復(fù)雜，主要的問題是在圓環(huán)病毒的基礎(chǔ)上,存在豬瘟、豬偽狂犬病、藍(lán)耳病、豬傳染性胸膜肺炎、弓形體、衣原體等問題。尤其是豬瘟和豬偽狂犬的問題比較突出。

圖1 某豬場幾種主要豬病抗體水平分析結(jié)果

3 討論

為了更充分地分析該豬場存在的問題, 我們將圖1中的每一個病的試驗數(shù)據(jù)單獨列出來進(jìn)一步分析, 以找出疾病發(fā)生和變化的規(guī)律。

3.1 豬瘟抗體檢測結(jié)果分析

圖2為豬瘟的抗體變化規(guī)律，我們可以看到后備母豬和20周齡的大豬的豬瘟抗體水平達(dá)到了100%合格。經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體合格率為80%，1和2周齡的小豬的合格率為70%，3周齡的小豬的抗體水平降低到50%陽性，到第4周升高為90%，此時注射了一次豬瘟疫苗第6周時有所降低，第8周降至最低點，此時注射一次豬瘟疫苗，但疫苗注射后看不到抗體水平的迅速升高，直到第16周采達(dá)到60%的陽性率，第18周達(dá)到90%的陽性率。

圖2 某豬場豬瘟抗體的變化規(guī)律

分析圖2的豬瘟抗體變化規(guī)律，我們可以看出豬瘟抗體有兩個明顯的低谷，第一個是在第4周時，造成這一低谷的可能性有以下幾方面：其一可能是母源抗體的自然下降，其二可能是在15日齡以后有豬瘟野毒的感染中和了豬瘟抗體，其三可能是斷奶應(yīng)激引起的抗體水平降低。第二個抗體低谷是在8周齡時，此時的低谷可能是豬的母源抗體自然下降到最低水平，也可能是大量自然感染或應(yīng)激造成的抗體水平下降，但令人感到不滿意的是第8周的疫苗注射并沒有起到應(yīng)有的作用，抗體水平?jīng)]有如預(yù)期的在1～2周達(dá)到高峰，而是波浪狀緩慢上升，其原因很復(fù)雜，第一，疫苗的質(zhì)量問題；第二，免疫抑制問題，引起免疫抑制的原因很多，我想其中有圓環(huán)病毒的感染，有偽狂犬的感染，有其他細(xì)菌病的繼發(fā)感染，更有可能是豬瘟野毒在疫苗注射前的感染，造成對疫苗無免疫反應(yīng)。根據(jù)以往的研究，豬瘟病毒的母源抗體可以持續(xù)到42日齡，因而我個人的觀點是要想辦法把母豬的抗體水平盡量提高并且保持較好的整齊度，這樣母豬最好每年3次（或分娩前加強(qiáng)免疫一次），選用好的疫苗，如果母豬達(dá)到了較高且整齊的抗體水平，則小豬的首次免疫可以安排在40～45日齡，第二次免疫可以安排在10～15 d后，兩次這樣的免疫應(yīng)該可以使豬維持對豬瘟病毒的抵抗力到出欄。

3.1 豬偽狂犬病病毒抗體的檢測結(jié)果分析

圖3 是偽狂犬的野毒抗體變化規(guī)律，豬群的采樣方法同豬瘟，偽狂犬野毒的百分率越低，說明感染越少。我們可以清楚地看出大豬階段（16～20周齡）幾乎沒有偽狂犬野毒的感染，在后備母豬階段感染率為30%，到經(jīng)產(chǎn)母豬階段感染率為50%，從后備母豬到經(jīng)產(chǎn)母豬有一個感染上升期，說明我們的疫苗免疫保護(hù)程度不夠，或同時豬群內(nèi)的偽狂犬野毒濃度過高。除了1周齡外，偽狂犬野毒抗體還有兩個高峰，第一個是在第4周齡，第二個是在第14周齡。在第二個感染高峰前注射過一次偽狂犬疫苗（進(jìn)口gE基因確失疫苗），但所起到的作用似乎不大，沒能有效抵御偽狂犬野毒的感染，說明疫苗使用的時機(jī)有一定的問題，因此我建議偽狂犬疫苗要進(jìn)行兩次免疫，第一次要早，要控制一周齡時的早期感染，第二次免疫要提前到第7～8周。

圖3 偽狂犬野毒抗體的變化規(guī)律

3.2 豬圓環(huán)病毒2型抗體的變化規(guī)律

從圖4 的結(jié)果可以看出,豬的圓環(huán)病毒抗體有一定的階段性,抗體有兩個高峰,一個在1～2周齡時, 是從母體獲得的母源抗體, 另外一個是在8～10周齡,是由于圓環(huán)病毒感染造成的,然后到大豬階段,抗體水平降低到無法檢測,也說明病毒在這一階段的感染較輕微。豬圓環(huán)病毒的感染對豬的危害很大，豬群健康水平較低的時段與圓環(huán)病毒感染在時間上是吻合的，這就為我們對免疫失敗、繼發(fā)感染嚴(yán)重、豬的呼吸道問題的增多等提供了理論依據(jù)，也為我們對疫病防制提供了新的思路。

圖4 豬2型圓環(huán)病毒抗體的變化規(guī)律

3.3 豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體的變化規(guī)律

圖4表示的是同一個生產(chǎn)線的(早一個月)的豬的繁殖與呼吸障礙綜合征病毒抗體變化規(guī)律。豬群的采血安排有一定的變化，我們更注意了早期的抗體水平的檢測。分別采了經(jīng)產(chǎn)母豬、出生1h的小豬（吃初乳前）、7日齡、14日齡、21日齡、45日齡、90日齡、180日齡的豬各10頭，同時用ELISA方法（為HIRPA的PRRSV抗體試劑盒）測定抗體水平，圖中的縱坐標(biāo)是抗體陽性百分率。紅色箭頭表示的是在10日齡和21日齡注射過蘭耳病的弱毒疫苗。從圖4 中我們可以知道，小豬在獲得母源抗體前幾乎沒有PRRSV抗體。在吃到初乳后，抗體水平出現(xiàn)顯著的升高。由于連續(xù)注射了兩次蘭耳病的疫苗，所以蘭耳病的抗體沒有出現(xiàn)明顯的高峰和低谷，但我們?nèi)匀豢梢园l(fā)現(xiàn)一些規(guī)律，如第二次疫苗注射后，抗體水平看不到明顯的上升，而是有所下降，說明因為注射時機(jī)、豬體的免疫抑制等原因，疫苗的的免疫效果并未得到充分的表現(xiàn)。另外一個令人吃驚的現(xiàn)象是在中豬特別是在大豬階段，PRRSV的抗體水平有一定的升高，說明在大豬階段豬體對蘭耳病仍然有很強(qiáng)的感染力，要提醒大家注意蘭耳病對中豬尤其是大豬的影響。

圖4 豬場的蘭耳病病毒抗體和圓環(huán)病毒抗體水平的變化情況

3.4 豬胸膜肺炎放線桿菌抗體的變化規(guī)律

圖5是對豬群的胸膜肺炎放線桿菌抗體的調(diào)查。我們可以很清楚地看出我們的大豬階段并沒有APP的感染, 到了后備母豬階段有60%的感染率, 而到了經(jīng)產(chǎn)母豬階段,感染率進(jìn)一步提高, 達(dá)到80%, 說明我們的大豬的通風(fēng)等飼養(yǎng)環(huán)境要比后備母豬好,另外一個原因可能是后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的生活周期長,導(dǎo)致感染的幾率增加,但我更傾向于前者。這就提醒我們注意后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的環(huán)境條件對豬病的影響。

APP抗體水平的變化也有幾個明顯的高峰，第一個是由母源抗體引起的，位于1周齡，但下降很快，在第二周即達(dá)到了一個低谷，然后是第二個高峰。在這兩個高峰中間應(yīng)該有一個早期的感染過程。這兩個高峰對我們有一定的啟示，其一是APP的母源抗體下降很快，10d左右即下降到不足以保護(hù)小豬的程度，其二是APP的感染可以很早，當(dāng)然早期的這些抗體也可能是副豬嗜血桿菌引起的，因為該試劑盒對也可以檢測到早期的副豬嗜血桿菌的感染，只是數(shù)值較低。APP的抗體的另外一個高峰是在第12周。說明在APP抗體較低、豬感染圓環(huán)病毒的階段、豬的應(yīng)激較大的階段APP的繼發(fā)感染較嚴(yán)重。

通過對APP抗體的分析，我們對APP的防制有了一個總體的概念，就是第一要重視母豬的保健，預(yù)防小豬在產(chǎn)房階段的早期感染，第二是在敏感的6～12周階段注意合理的用藥，當(dāng)然必要時也可以使用藥物進(jìn)行控制。

圖5 豬胸膜肺炎放線桿菌抗體的變化規(guī)律

3.5 豬衣原體抗體的變化規(guī)律

我們也對衣原體的情況進(jìn)行了分析，結(jié)果見圖6。

從圖6可以明白, 該豬場始終存在較嚴(yán)重的衣原體感染,而且仔細(xì)分析會發(fā)現(xiàn),衣原體的感染在經(jīng)產(chǎn)母豬達(dá)到了最高峰, 提示產(chǎn)房母豬是一個重要的傳染源, 再進(jìn)一步往上推,可以發(fā)現(xiàn)公豬在衣原體的傳播中起到了不可忽視的作用,該場公豬有較高的感染率(數(shù)據(jù)未顯示)。

衣原體是一個以繁殖障礙為主的疾病,從圖中也可以看出,種豬群的問題比較突出,從一個側(cè)面印證了衣原體對處于繁殖期的生產(chǎn)種豬的影響較大。

圖6 衣原體的抗體變化規(guī)律

3.6 豬弓形體抗體的變化規(guī)律

對豬場的弓形體[10]的發(fā)生情況也進(jìn)行了檢測，檢測結(jié)果見圖7。

圖7 弓形體抗體的變化規(guī)律

從圖7可以看出，在檢測前豬場的發(fā)生過一次弓形體爆發(fā)流行，可能在檢測時仍在流行。我們從中可以得到的有用信息是后備母豬、母豬、16～20周齡的大豬均未檢測到抗體，而抵抗力較弱的第6～8周感染最嚴(yán)重，陽性率達(dá)到了20%，2～4周齡和10～14周齡的豬也較易感，那么我們在加藥時就可以對一些重點階段重點關(guān)照。此結(jié)果也是對豬的抵抗力的一個很好的檢驗,從中我們可以很清楚地了解到現(xiàn)代養(yǎng)豬生產(chǎn)中哪個階段豬群的抵抗力最弱。

3.7 豬瘟病毒和豬圓環(huán)病毒抗體的比較分析

通過這一次調(diào)查我們也發(fā)現(xiàn)了一個有趣的現(xiàn)象，我們將PCV2的和豬瘟的抗體變化曲線放在一起比較，結(jié)果見圖8。

從圖8我們可以發(fā)現(xiàn)每當(dāng)圓環(huán)病毒抗體水平高的時候，豬瘟抗體的合格率就明顯下降，共有4個這樣的交叉變化。第一個是在后備母豬和母豬階段；第二個是在4～6周齡；第三個是在8～10周齡；第四個是在14～20周齡。通過這樣4個交叉，我們可以看出豬圓環(huán)病毒對豬瘟的免疫抑制是多么強(qiáng)烈，也提醒我們預(yù)防和控制豬圓環(huán)病毒的重要性。

圖8 豬瘟和豬圓環(huán)病毒抗體水平的比較

綜上所述， 該豬場第2周各種抗體因為母源抗體的原因抗體水平均較高，但第三周有一個低谷，可能是受到了病原的感染，也可能是斷奶的應(yīng)激造成的，到第6周開始母源抗體開始下降，各種感染也開始嚴(yán)重，是豬群抵抗力最弱的階段，與實際生產(chǎn)中的豬群的臨床表現(xiàn)和生產(chǎn)水平也是一致的（見圖1）。這樣就為我們在疫苗的注射時機(jī)，疫苗效果的評估，藥物預(yù)防和治療的時機(jī)等方面提供了較有意義的參考資料。所以對有條件的大型豬場，可以定期進(jìn)行系統(tǒng)的動態(tài)的豬病檢測分析，這樣才能在豬病預(yù)防和治療過程中有的放矢，取得滿意的效果。