1.保存血清的最好方法?
我們建議血清保存在-5攝氏度至-20攝氏度。若存放于4攝氏度時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜髦?,再放回冷凍?/p>
2.如何解凍血清才不會(huì)是產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2攝氏度至8攝氏度冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過(guò)程中必須搖晃均勻。
3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理/
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但普遍的原因是血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,也是造成沉淀物的原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。最好不使用過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡茏枞^(guò)過(guò)濾膜。
4.為什么要熱滅火血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用滅火血清。
5.有必要做熱滅活嗎?
實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過(guò)正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過(guò)的血清多細(xì)胞的增長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒(méi)有任何作用,甚至通常認(rèn)為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑蟲(chóng)”,常常會(huì)讓研究者誤以為血清遭受污染,而把血清放在37攝氏度的環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。
6.為什么儲(chǔ)存在冰箱中的胎牛血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?
有些胎牛血清產(chǎn)品沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2-8攝氏度,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,纖維蛋白原,玻璃粘連蛋白)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的渾濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦-20攝氏度儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。