第一種方法是物理鑒別法,就是對黃芪多糖的物理性質從望、聞、嘗、摸、溶五個方面進行鑒別。
首先是望,望就是看黃芪多糖粉的顏色,真正的黃芪多糖粉應該是淡黃色粉末,具有吸濕性,如果放入瓶中上下搖晃時可出現掛壁現象,若假冒的黃芪多糖粉中加入了葡萄糖粉,那么將黃芪多糖粉放在鋪平的白紙上可看到有白色的顆粒;如果加入了麥芽糖糊精復合物,黃芪多糖粉的顏色則表現為深黃色。
其次是聞,聞就是聞黃芪多糖粉的味道,由于黃芪多糖粉是從植物黃芪中提取的,所以真正的黃芪多糖粉可聞到青草的味道,而假冒的黃芪多糖粉則多是加入了化學成分,往往聞不到青草的味道。
再次是嘗,嘗就是嘗它的口感,黃芪多糖從字面的意思來看是糖,好像應該甜,但是事實上只有單糖才有甜味,而黃芪多糖是多糖,它并沒有甜味,如果假冒偽劣的黃芪多糖粉中加入了蔗糖復合物,就會品嘗到其中的甜味。
第四是摸,也就是用手摸黃芪多糖粉的手感,真正的黃芪多糖粉剛開始用手摸時,會感覺光滑細膩,但是由于它具有吸濕性,很快就會有沾手的感覺,而假劣的黃芪多糖粉由于加入了其它成分,往往表現為沒有吸濕性或者吸濕性不明顯,不會有沾手的感覺。
最后一點是溶,溶就是指溶解性,黃芪多糖粉中的黃芪決定了它的溶解性良好,不會有不溶性成分沉淀,但是溶解速度比較慢,如果黃芪多糖粉中加入了蔗糖復合物、葡萄糖復合物、麥芽糖糊精復合物、糊精水溶性淀粉復合物等物質,都會出現溶解速度過快的現象,而且還有可能出現不溶性的沉淀物質。
另外,將黃芪多糖粉進行溶解后,由于其中含有皂苷成分,因此會出現很多泡沫,而假冒的黃芪多糖粉泡沫較少或沒有泡沫。除此以外,還可以看到真正的黃芪多糖溶解速度較慢,但是可以完全溶解,而假冒的黃芪多糖溶解速度較快,但是溶解后容器底部往往有不能溶解的物質。
第二種方法是化學鑒別方法,化學鑒別方法有3種,即醇沉法(80%)、高熱法(350℃)和高效薄層色譜儀鑒別法,常用的是醇沉法和高熱法,高效薄層色譜儀鑒別法對儀器和操作人員要求較高,在基層不常用。
首先說80%酒精醇沉法,它的原理就是利用不同的酒精濃度能夠沉淀出不同分子量大小的物質,如50%的酒精能夠沉淀出蛋白質、淀粉、粘液質、果膠等大分子物質(溶液會呈現黏稠狀或有黃色沉淀物質);80%的酒精能夠沉淀出具有活性的黃芪多糖(出現乳白色絮狀沉淀,為國家三類新獸藥標準); 90%以上的酒精能夠沉淀出葡萄糖、蔗糖。
可取黃芪多糖粉10克放入燒杯,加水20毫升水溶解后,同時再加如乙醇80毫升攪勻靜置沉淀,上清液為淺棕色,底部有大量沉淀,并聚集成團狀,說明該樣品即為未加入葡萄糖的黃芪多糖;若沉淀物較少,則說明該黃芪多糖粉中摻入了葡萄糖。
將上述液體放入4℃冰箱靜置約2小時后,可見黃芪多糖溶液底部出現乳白色絮狀沉淀,而假劣黃芪多糖溶液只現渾濁現象,沒有沉淀生成。最后將靜置的溶液倒出,黃芪多糖溶液中的絮狀沉淀隨液體一塊倒出,無沉淀物附著于瓶底,而假劣黃芪多糖有沉淀物附著于瓶底(提取黃芪多糖時發生斷裂,未除去蛋白質果膠、粘液等雜質),或者干脆沒有沉淀物生成。
其次是高熱法,高熱法就是取黃芪多糖粉適量于350℃下高溫加熱2小時,待冷卻后,殘渣應呈硬塊狀,如果黃芪多糖中含有葡萄糖,那么在350℃的干熱條件下,2小時后即呈現蜂窩狀,由此,也可對黃芪多糖的真偽做出鑒別。
最后一種是高效薄層色譜儀鑒別法,這是目前鑒別黃芪多糖最有效的方法,通過對薄層斑點的判斷,可以辨別樣品的真偽,即供試品色譜中,真正的黃芪多糖應該與對照品色譜相應的位置上,應顯相同顏色的熒光斑點。