1、涂片鏡檢
采取病死鴨肝、脾組織和心、皮下滲出物、關節液等病料,涂片用革蘭氏染色法染色,鏡檢可見到革蘭氏陽性的單個散在,成對或短鏈排列,不運動、無芽孢的球菌。
2、分離培養
無菌操作取病料接種于普通營養瓊脂培養基、血液瓊脂培養基和麥康凱瓊脂培養基上,37℃條件下培養24h~48h,在普通營養瓊脂培養基上長出圓形、灰白色、邊緣整齊、光滑隆起的針尖狀小菌落。在血液瓊脂培養基上可見到無色透明、圓形、光滑、隆起、露珠狀、有p溶血環的小菌落,挑取典型菌落涂片鏡檢,革蘭氏染色可見到典型的革蘭氏陽性球菌。在麥康凱培養基上不生長。挑取單個菌落接種于肉湯培養基中,置37℃條件下培養24h,肉湯混濁,革蘭氏染色鏡檢可見6個~8個菌體呈長鏈排列的革蘭氏陽性球菌。
3、生化試驗
將24h肉湯培養物接種于微量生化發酵管,置37℃培養24h~48h,結果該菌發酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇,產酸不產氣。
4、動物接種試驗
取分離菌肉湯培養物腹腔接種健康家兔6只,0.3ml/只,12h~30h發病死亡,剖檢可見出血性敗血癥變化,涂片鏡檢可見到典型的革蘭氏陽性球菌。
5、藥敏試驗
用分離到的細菌做藥敏試驗,結果對慶大、恩諾沙星高敏,對青霉素、卡那霉素中敏,對鏈霉素、氟哌酸、紅霉素低敏或抗藥。