雞敗血支原體病和滑膜囊支原體病的診斷
雞敗血支原體病
對雞群感染敗血支原體的監測,通常采用以下幾種方法。
(1)全血凝集反應 這是目前國內外用于診斷該病的簡易方法,在20~25℃室溫下進行,先滴2滴染色抗原于白瓷板或玻板上,再用針刺破翅下靜脈,吸1滴新鮮血液滴人抗原中,輕輕
攪拌,充分混合,將玻板輕輕左右搖動,在1~2分鐘內判斷結果。在液滴中出現藍紫色凝塊者可判為陽性;僅在液滴邊緣部分出現藍紫色帶,或超過2分鐘僅在邊緣部分出現顆粒狀物時可
判定為疑似;經過2分鐘,液滴無變化者為陰性。
(2)血清凝集反應 本法用于測定血清中的抗體凝集效價。首先用磷酸鹽緩沖鹽水將血清進行二倍系列稀釋,然后取1滴抗原與1滴稀釋血清混合,在1~2分鐘內判定結果。能使抗原凝集的血清最高稀釋倍數為血清的凝集效價。
平板凝集反應的優點是快速、經濟、敏感性高,感染禽可早在感染后7~10天就表現陽性反應。其缺點是特異性低,容易出現假陽性反應,為了減少假陽性反應的出現,實驗時一定要用無污染、未凍結過的新鮮血清。
(3)血凝抑制試驗 本法用于檢測血清中的抗體效價或診斷本病病原。測定抗體效價的具體操作與新城疫血凝抑制試驗方法基本相同。反應使用的抗原是將幼齡的培養物離心,將沉淀細胞用少量磷酸鹽緩沖鹽水懸浮并與等體積的甘油混合,分裝后于-70℃保存。使用時首先測定其對紅細胞的凝集價,然后在血凝抑制試驗中使用4個血凝單位,一般血凝抑制價在1:80以上判為陽性。診斷本病病原時可先測其血凝價,然后用已知效價的抗體對其做凝集抑制試驗,如果兩者相附或相差1—2個滴度即可
判定該病原體為本支原體。此方法特異性高,但敏感性低于平板凝集試驗,一般雞感染3周以后才能被檢出陽性。
(4)瓊脂擴散試驗 用兔制備抗支原體的特異性抗血清,主要用于各種禽支原體的血清分型,也可用于檢測雞和火雞血清中的特異性抗體。
(5)酶聯免疫吸附試驗 本試驗具有很高的特異性,而且敏感性比HI試驗高許多倍。其抗體在感染后約與HI試驗相同時間測得,其缺點是容易出現假陽性反應,這個問題可以通過使用改進的抗原制劑來消除。
滑膜囊支原體病
檢測雞群血清抗體最常用的方法是血清平板凝集試驗和瓊脂擴散試驗,受感染的雞一般需要2~4周才能產生抗體,所以第一次血清學檢查陰性,不能得出結論,還需要間隔數日再做幾次重復檢查。另外,雞敗血支原體抗原與滑膜囊支原體抗原之間有交叉反應,對此情況可用HI試驗進一步確認,因兩者在此反應中無交叉反應。用血清學檢測本病感染情況時,需要注意的是乎板凝集試驗常會出現非特異性凝集反應,尤其是注射過油乳劑疫苗的雞,有這種情況發生時,需要用瓊脂擴散或血凝抑制試驗證實反應的特異性。