1 發(fā)病情況 南寧市某豬場存欄母豬126頭,2004年6月熱冷交替時發(fā)生以高熱、咳嗽、呼吸困難、流產或產死胎為特征的急性傳染病。不論年齡豬均發(fā)生高熱;中后期母豬流產、產死胎,共記48頭(窩)發(fā)生流產或產死胎,占懷孕母豬的70%。仔豬死亡52頭,占存欄仔豬的14.2%。筆者通過對典型病例的解剖和實驗室診斷,綜合診斷為豬胸膜肺炎放線桿菌、附紅細胞體和繁殖呼吸綜合征病毒混和感染。
2 臨床癥狀 不同年齡豬都表現持續(xù)高熱,食欲不振,體溫40.5~41.5℃,鼻孔有清涕,呼吸困難,咳,喘氣,無腹瀉,使用抗生素和退燒藥治療效果不明顯,血蟲凈治療有一定效果;仔豬咳、喘氣較嚴重,個別發(fā)生痙攣性干咳,呈犬坐式,腹式呼吸,鼻尖發(fā)藍,耳尖和邊緣青紫,皮膚蒼白;發(fā)病率為20%,死亡率為15%左右,仔豬在病后4~7死亡率高;懷孕母豬發(fā)燒后2~3天流產,產出仔豬1~3天整窩死亡或產死胎,流產率達70%。公豬和育肥豬表現體溫升高,食欲不振,沒有死亡。
3 病理變化 現場剖檢3頭仔豬,主要表現為:可視黏膜蒼白,全身淋巴結腫大,肺門淋巴結腫大、出血,肺尖葉、膈葉、心葉肉變,整個肺部水腫、氣腫、有出血點,切面流出帶泡沫液體,呈紅白相間的花斑狀;脾臟表面凹凸不平;腎臟變軟。
4 實驗室診斷
4.1 豬胸膜肺炎放線桿菌的分離和鑒定 無菌取瀕死仔豬的肺、脾、淋巴組織接種到加有5%健康兔血的腦心湯中,置于溫室或燭缸中37℃培養(yǎng)24 h增菌,培養(yǎng)液經抹片、革蘭氏染色,發(fā)現陰性、絲狀的細菌,菌液轉接到兔血瓊脂上,37℃、24 h培養(yǎng)后,有灰色、圓形、半透明的菌落,革蘭氏染色,發(fā)現單個或成雙排列的陰性桿菌。生化鑒定:氧化酶、過氧化酶陽性,0.1%美藍牛奶、七葉苷、馬尿酸陽性;能利用木糖、蔗糖;不利用甘露醇、山梨醇;麥康凱培養(yǎng)基上能生長。37℃培養(yǎng)24 h的菌液,腹腔注射30 g體重的小鼠(每只0.2 ml)2只,24 h死1只、另1只注射5天后死亡。剖檢死亡小鼠發(fā)現:肺出血、脾和腎腫大,肝和腎有膿腫點等病變。
4.2 豬附紅細胞體的檢驗 取發(fā)燒期病豬耳靜脈血滴于載玻片上,加生理鹽水稀釋加蓋玻片,油鏡觀察,在紅細胞表面、邊緣及血漿中可見到圓形或卵圓形的附紅細胞體。另取發(fā)燒期病豬耳靜脈血注射到小鼠腹腔內,24小時后采尾靜脈血壓片鏡檢均發(fā)現附紅細胞體。
4.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒檢測 RT-PCR反應,在3個組織樣品中均擴增出519p特異性條帶,說明該患豬已經感染豬繁殖呼吸綜合征病毒。
5 防治
5.1 豬放線桿菌能引起仔豬發(fā)燒,喘氣,鼻炎,耳尖發(fā)紫;斷奶豬厭食,發(fā)燒,持續(xù)性咳嗽,呼吸急促和肺炎;母豬出現子宮炎和流產。豬附紅細胞體病表現為耳廊邊緣、尾以及四肢的末端發(fā)紺,母豬出現繁殖障礙;而豬繁殖呼吸綜合征主要以仔豬嚴重呼吸道疾病、母豬繁殖障礙為特征。本文通過病原學的檢測確診了這3種疾病呈混合感染:分離出豬放線桿菌、檢測到鑒定豬附紅細胞體和RT-PCR檢測豬繁殖呼吸綜合征病毒。該豬場沒有使用過豬繁殖與呼吸綜合征疫苗。同時,我們也進行了豬瘟(RT-PCR)、偽狂犬病(PCR)的檢測,結果兩者都為陰性。從流行病學特征來分析,本次疫病的流行仔豬死亡率并不高,主要表現呼吸癥狀和流產、死胎或產弱仔等繁殖障礙。因此,可以認為本次疫病的流行是以豬繁殖呼吸綜合征和豬放線桿菌病為主,伴發(fā)豬附紅細胞體病。
5.2 根據豬附紅細胞體病對貝尼爾敏感和豬放線桿菌藥敏試驗結果,建議對病豬肌肉注射貝尼爾(10 mg/kg體重,隔天1次,連用3次)和氟苯尼考注射液(0.4 ml/kg體重連用3天);整場用土霉素600 g/t拌料,連喂2周。同時,將從病料分離到的豬放線桿菌擴大培養(yǎng)增殖后,制成滅活苗全場緊急免疫,以及全場豬肌肉注射PRRS疫苗。采取上述措施后1周豬發(fā)燒、咳嗽、母豬流產得到控制,兩周豬采食恢復正常。
2 臨床癥狀 不同年齡豬都表現持續(xù)高熱,食欲不振,體溫40.5~41.5℃,鼻孔有清涕,呼吸困難,咳,喘氣,無腹瀉,使用抗生素和退燒藥治療效果不明顯,血蟲凈治療有一定效果;仔豬咳、喘氣較嚴重,個別發(fā)生痙攣性干咳,呈犬坐式,腹式呼吸,鼻尖發(fā)藍,耳尖和邊緣青紫,皮膚蒼白;發(fā)病率為20%,死亡率為15%左右,仔豬在病后4~7死亡率高;懷孕母豬發(fā)燒后2~3天流產,產出仔豬1~3天整窩死亡或產死胎,流產率達70%。公豬和育肥豬表現體溫升高,食欲不振,沒有死亡。
3 病理變化 現場剖檢3頭仔豬,主要表現為:可視黏膜蒼白,全身淋巴結腫大,肺門淋巴結腫大、出血,肺尖葉、膈葉、心葉肉變,整個肺部水腫、氣腫、有出血點,切面流出帶泡沫液體,呈紅白相間的花斑狀;脾臟表面凹凸不平;腎臟變軟。
4 實驗室診斷
4.1 豬胸膜肺炎放線桿菌的分離和鑒定 無菌取瀕死仔豬的肺、脾、淋巴組織接種到加有5%健康兔血的腦心湯中,置于溫室或燭缸中37℃培養(yǎng)24 h增菌,培養(yǎng)液經抹片、革蘭氏染色,發(fā)現陰性、絲狀的細菌,菌液轉接到兔血瓊脂上,37℃、24 h培養(yǎng)后,有灰色、圓形、半透明的菌落,革蘭氏染色,發(fā)現單個或成雙排列的陰性桿菌。生化鑒定:氧化酶、過氧化酶陽性,0.1%美藍牛奶、七葉苷、馬尿酸陽性;能利用木糖、蔗糖;不利用甘露醇、山梨醇;麥康凱培養(yǎng)基上能生長。37℃培養(yǎng)24 h的菌液,腹腔注射30 g體重的小鼠(每只0.2 ml)2只,24 h死1只、另1只注射5天后死亡。剖檢死亡小鼠發(fā)現:肺出血、脾和腎腫大,肝和腎有膿腫點等病變。
4.2 豬附紅細胞體的檢驗 取發(fā)燒期病豬耳靜脈血滴于載玻片上,加生理鹽水稀釋加蓋玻片,油鏡觀察,在紅細胞表面、邊緣及血漿中可見到圓形或卵圓形的附紅細胞體。另取發(fā)燒期病豬耳靜脈血注射到小鼠腹腔內,24小時后采尾靜脈血壓片鏡檢均發(fā)現附紅細胞體。
4.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒檢測 RT-PCR反應,在3個組織樣品中均擴增出519p特異性條帶,說明該患豬已經感染豬繁殖呼吸綜合征病毒。
5 防治
5.1 豬放線桿菌能引起仔豬發(fā)燒,喘氣,鼻炎,耳尖發(fā)紫;斷奶豬厭食,發(fā)燒,持續(xù)性咳嗽,呼吸急促和肺炎;母豬出現子宮炎和流產。豬附紅細胞體病表現為耳廊邊緣、尾以及四肢的末端發(fā)紺,母豬出現繁殖障礙;而豬繁殖呼吸綜合征主要以仔豬嚴重呼吸道疾病、母豬繁殖障礙為特征。本文通過病原學的檢測確診了這3種疾病呈混合感染:分離出豬放線桿菌、檢測到鑒定豬附紅細胞體和RT-PCR檢測豬繁殖呼吸綜合征病毒。該豬場沒有使用過豬繁殖與呼吸綜合征疫苗。同時,我們也進行了豬瘟(RT-PCR)、偽狂犬病(PCR)的檢測,結果兩者都為陰性。從流行病學特征來分析,本次疫病的流行仔豬死亡率并不高,主要表現呼吸癥狀和流產、死胎或產弱仔等繁殖障礙。因此,可以認為本次疫病的流行是以豬繁殖呼吸綜合征和豬放線桿菌病為主,伴發(fā)豬附紅細胞體病。
5.2 根據豬附紅細胞體病對貝尼爾敏感和豬放線桿菌藥敏試驗結果,建議對病豬肌肉注射貝尼爾(10 mg/kg體重,隔天1次,連用3次)和氟苯尼考注射液(0.4 ml/kg體重連用3天);整場用土霉素600 g/t拌料,連喂2周。同時,將從病料分離到的豬放線桿菌擴大培養(yǎng)增殖后,制成滅活苗全場緊急免疫,以及全場豬肌肉注射PRRS疫苗。采取上述措施后1周豬發(fā)燒、咳嗽、母豬流產得到控制,兩周豬采食恢復正常。