中醫動物模型是根據中醫理論,對人類疾病原型的某些特征進行模擬復制,創造出的人工疾病和證的實驗動物。通過對動物模型的研究,探討證的實質,提示辨證論治的基本規律,規范中藥及復方的使用,使實驗中醫學與臨床有機地結合,才能使中醫理論的發展有所突破,從而有助于更方便、更有效地認識人類疾病的發生、發展規律和研究防治措施。
中醫動物模型的建立,其造模方法的選擇至關重要,造模方法大致可歸納為如下三種類型。
一、模擬中醫傳統病因建立動物模型
此類模型是依據中醫傳統理論,以研制開發“純”中醫病證動物模型為目的,一般不與現代醫學疾病模型相等,造模方法有單因素和復合因素兩種。
1. 單因素造模:如根據中醫“恐傷腎”原理,采用貓嚇孕鼠法,得到子代先天腎虛模型;用耗氣破氣理論,以中藥(大黃、厚樸、枳實)灌喂大鼠,塑造脾氣虛動物模型;以寒邪傷陽、遲脈主寒證的原理,用寒冷刺激法(大鼠在零下15C的冷環境中,持續4H左右),復制“遲脈”模型,然后應用溫陽活血中藥(附子、黨參、丹參、紅花等)使其復健。
2. 復合因素造模:用睡眠剝奪的小站臺法,模擬中醫理論的“驚”和“勞”等病因,在大鼠身上建立心虛證模型;用中醫先天不足和后天失養的病因,復制仔兔體弱易感動物模型,以“捋捏、三揉、三里求”的按摩手法復健,表明此法具有扶正祛邪的作用;采用麻黃湯發汗復加風寒刺激和高溫發汗復加風寒刺激制作小鼠衛氣虛動物模型,玉屏風散對此模型具有糾正作用;根據血虛證其因不外生血少和耗血多兩個方面的理論,用放血和限制飲食法復制“血虛”動物模型;采用饑餓、酒醋及大黃等綜合方法塑造“脾虛證”大鼠模型,并經四君子湯在辰、戌兩時治療,結果提示,戌時比辰時治療效果好。
二、采用西醫病因病理復制動物模型
此種模型多是在特定的化學、生物、機械和物理的致病因素作用下,復制出西醫或中醫病名的動物模型,或再用中藥或中醫療法觀察療效及監測病理改變,其在造模時重視動物組織、器官或全身的病理損害,這是目前應用最廣泛的一種實驗形式。
1. 化學因素刺激法:如采用灌注地塞米松法,建立家兔糖皮質激素受抑模型,并觀察到中藥生地能減輕由糖皮質激素對兔垂體-腎上腺皮質系統和形態的影響;由家兔耳緣靜脈注入10%高分子右旋糖酐液復制“血瘀”動物模型,實驗證明川芎注射液對“血瘀”動物具有較好的治療作用;采用胃飼大鼠適量秋水仙堿后,出現了一系列典型的脾氣虛證候群及符合脾虛證的一些生化、組織指標的相應變化,運用補中益氣湯可使這些病理改變得到有效的防治。
2. 生物因素刺激法:取新西蘭小黑鼠與昆明小白鼠第五代雜交鼠具有自身IgG和抗核抗體的特點,經血清或組織液誘導形成類似人類內傷痹證的病理模型;以“氣管內接種”肺炎雙球菌作造模因素,初步建立了家兔邪熱壅肺證動物模型,該實驗用宣肺透熱的代表方劑-麻杏石甘湯進行治療,證實了麻杏石甘湯對邪熱壅肺的治療效應;在建立巴氏桿菌性家兔溫病氣營傳變模型及小鼠模型的基礎上,騅解毒涼營護陰注射液在阻斷溫病氣營傳變中的治療作用,結果提示該藥能夠明顯降低模型動物的高熱,改善癥狀,控制病變,減輕病損,處長存活時間,從而達到阻斷氣營傳變,促進機體恢復的治療作用。
3. 物理、機械因素刺激法:用結扎大鼠一側大腦中動脈(MCAO)造成局部灶性腦缺血模型,通過對MACO大鼠神經病學、被動性條件反射、腦梗死面積及腦組織病理學等多項指標的檢查測定,顯示出醒腦開竅針法對局灶性腦缺血的明顯治療作用;取體外直腸半結扎法建造“肺與大腸相表里”實驗動物模型,著重指出,人工致直腸狹窄后模型鼠所出現的反應性肺損害,大承氣湯對其有明顯促修復作用;采用國產G32型電熱灼器代替Jane Boudet法制作大鼠實驗性慢性腎衰模型。實驗中發現電灼所致慢性腎衰大鼠存在較嚴重的血瘀表現。
4. 綜合因素刺激法:采用地塞米松、呋喃苯胺酸和大腸桿菌內毒素聯合造模的方法,制作溫病營熱陰傷證家兔動物模型,方法簡便,而且模型家兔在證候表現和病理改變上與傳統中醫理論相關性較高地;用靜注Pb-Acet和5-羥色胺(5-HT),同時口灌LPS的方法,對大鼠進行腸源性內毒素血癥(EETM)造模,而大承氣湯對EETM模型出現的病理損害具有明顯的保護作用;以氟氫可的松和腎上腺素使大鼠處于陰虛火旺狀態復制慢性血瘀模型。
三、依據中西醫結合病因學說塑造動物模型
這類模型的造模方法是既運用了中醫的發病學說,又考慮了西醫的致病原理,實際上是綜合了上述兩類型的造模特點而塑造的動物模型,這是目前應用較少的一種實驗方法。如以Ⅱ型膠原免疫所致關節炎動物模型為基礎,以風寒濕為痹證外因,腎虛為痹證內因的學說為依據,利用中西醫結合腎本質研究的成果,采用復合因子方法制作痹證動物模型;用飲食不節、勞倦過度等因素塑成了大白鼠脾虛證模型,在此基礎上并用氯化鋁(AlCl)復制了Alzheimer 型癡呆疾病模型,補益脾胃方藥對其具有較好的療效;將家兔在禁水禁食18h后,予速尿二度利尿脫水,造成“陰津虧虛”狀態,然后注射大腸桿菌內毒素以致“熱盛”,從而完成溫病陰虛熱盛模型的制作;采用中劑量鏈脲佐菌素腹腔內注射及肥甘飲食持續喂養10周的方法,復制實驗性NIDDM大鼠模型(消渴病);以給動物灌服寒涼藥及結扎冠狀動脈并逐漸縮窄升主動脈口徑,制作家兔充血性心力衰竭少陰病陽虛水停證模型,加味真武湯注射可明顯降低模型家兔血漿內皮素水平,是治療該病證的作用機制之一。