1.1日齡是否需要活苗免疫?免疫效果?母源抗體對免疫的影響有多大?
2.早期免疫是否需要做滅活苗? 多大日齡做比較合適?
3.育雛期需要做幾次活苗免疫?
4.母源抗體的衰減規(guī)律?
5.育雛期已使用滅活苗免疫,育成期是否還需免疫?
6.產(chǎn)蛋期應(yīng)如何免疫?
本試驗通過不同免疫程序在育雛期的免疫抗體結(jié)果對比,制定出當(dāng)前的飼養(yǎng)環(huán)境中科學(xué)合理的雛雞免疫程序。通過生產(chǎn)實踐中對育成期、產(chǎn)蛋期的抗體檢測,總結(jié)出這兩個階段合理的免疫程序。
一、材料與方法
(一) 材料
試驗動物 父母代海蘭褐種雞
試驗儀器及用品 96孔板、微量移液器、振蕩器、試管、注射器、9號針頭、離心機、30毫升滴瓶、先靈葆雅公司和夏菲特公司提供的新城疫活苗、北京市生物藥品廠提供的新城疫滅活油乳劑、中國獸醫(yī)監(jiān)察所提供新城疫HI抗原、生理鹽水。
(二)方法
1.雞群的免疫
試驗共160只健康父母代海蘭褐雛雞,隨機分成8個小組,每組20只,各組的免疫內(nèi)容和方法如表1所示:
|
1日齡 |
7日齡 |
21日齡 |
第1組 |
ND活苗(點眼) |
不免疫 |
ND活苗(點眼) |
第2組 |
不免疫 |
ND活苗(點眼) |
ND活苗(點眼) |
第3組 |
ND活苗(點眼) |
ND活苗(點眼) |
ND活苗(點眼) |
第4組 |
ND活苗+ND油苗
(點眼)+(頸皮下注射) |
ND活苗(點眼) |
ND活苗(點眼) |
第5組 |
ND活苗(點眼) |
ND活苗+ND油苗
(點眼)+(頸皮下注射) |
ND活苗(點眼) |
第6組 |
ND活苗(點眼) |
ND活苗(點眼) |
ND活苗+ND油苗
(點眼)+(頸皮下注射) |
第7組 |
ND活苗(點眼) |
11日齡,ND活苗+ND油苗
(點眼)+(頸皮下注射) |
24日齡,ND活苗(點眼) |
對照組 |
未免疫 |
未免疫 |
未免疫 |
表1 各組的免疫內(nèi)容和方法
備注: 1日齡新城疫活苗為IV系克隆化疫苗,由先靈葆公司提供;7日齡ND活苗為VH疫苗,由夏非特公司提供;21日齡ND活苗為IV系疫苗,由先靈葆雅公司提供;ND油苗由北京市生物藥品廠提供?;蠲缑庖邉┝?頭份,油苗免疫劑量0.3毫升/只。
2.育雛期的HI試驗
心臟采血法每只雞采取1毫升血液,HI試驗參照傅先強、劉占君等主編的《養(yǎng)禽場禽病檢驗手冊》。從7日齡開始監(jiān)測,每3天測一次抗體值,一直到6周齡。
3.育成期的HI試驗
心臟采血法每只雞采取1毫升血液,HI試驗參照《養(yǎng)禽場禽病檢驗手冊》。從7周齡開始監(jiān)測,每周測一次抗體值,一直到22周齡。
4.產(chǎn)蛋期的HI試驗
心臟采血法每只雞采取1毫升血液,HI試驗參照《養(yǎng)禽場禽病檢驗手冊》。產(chǎn)蛋期間每半個月測一次抗體值,直到抗體值降到9以下。
二、 結(jié)果與分析
(一)育雛期的ND抗體監(jiān)測結(jié)果
試驗結(jié)果如表2和圖1~圖6所示。從表2中可知,免疫接種的雛雞抗體滴度先下降后上升,7日齡時,抗體滴度在7log2~8log2之間,以后抗體逐漸往下降,一直到25日齡時降到最低,一般為2log2左右;25日齡后逐漸上升,5周齡趨于穩(wěn)定。未經(jīng)免疫的雛雞4周齡后母源抗體幾乎降到零。
圖1 實驗3與實驗4雞群的ND抗體變化曲線
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7 |
10 |
13 |
16 |
19 |
22 |
25 |
28 |
31 |
34 |
37 |
40 |
42 |
實驗1 |
8.00 |
6.70 |
6.20 |
5.40 |
3.90 |
2.80 |
1.40 |
4.90 |
6.20 |
6.00 |
4.50 |
5.30 |
5.10 |
實驗2 |
7.30 |
5.90 |
4.90 |
5.60 |
4.90 |
3.50 |
1.30 |
5.00 |
5.70 |
5.40 |
5.10 |
4.70 |
4.60 |
實驗3 |
6.90 |
5.80 |
5.80 |
4.80 |
3.30 |
2.20 |
2.00 |
5.20 |
6.20 |
6.70 |
7.00 |
6.70 |
6.80 |
實驗4 |
8.00 |
6.20 |
5.80 |
5.30 |
3.60 |
4.00 |
3.20 |
5.10 |
6.00 |
6.50 |
6.70 |
6.80 |
7.30 |
實驗5 |
7.70 |
6.00 |
6.20 |
6.10 |
5.30 |
4.00 |
4.30 |
6.60 |
7.80 |
8.00 |
8.10 |
8.60 |
8.70 |
實驗6 |
7.50 |
6.70 |
5.80 |
5.60 |
3.90 |
3.00 |
1.90 |
5.80 |
7.80 |
8.10 |
8.00 |
8.50 |
8.60 |
實驗7 |
7.20 |
6.40 |
5.40 |
4.80 |
4.30 |
4.60 |
4.20 |
6.60 |
7.10 |
7.80 |
7.60 |
8.90 |
8.40 |
對照組 |
7.60 |
6.70 |
5.90 |
4.80 |
3.30 |
3.10 |
2.10 |
0.5 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
圖1:實驗3與實驗4雞群的ND抗體變化曲線
如圖1所示,實驗4中的雞群 1日齡時免疫接種了ND油苗,實驗3沒有,而實驗4與實驗3雞群的ND抗體消長曲線基本一致,說明1日齡沒有免疫接種ND油苗必要。
圖2:實驗3、實驗5和實驗7雞群的ND抗體變化曲線
從圖2的3條ND抗體變化曲線可知,7日齡或7日齡后免疫ND滅活苗有效,其抗體無論峰值還是最低值均比單純使用活苗組高2個滴度;抗體最低值在4log2左右,而不免滅活苗組在2log2左右。
圖3:實驗5、實驗6和實驗7雞群的ND抗體變化曲線
實驗5、7與實驗6做比較說明早免滅活苗好于晚免。雖然3個組的抗體峰值差異不顯著,但早免滅活苗組抗體最低值在4log2左右,而晚免滅活苗組在2log2左右,抗體差異如圖3所示。
圖4:實驗1、實驗2和實驗3雞群的ND抗體變化曲線
實驗3與實驗1、2做比較說明前三周三次活苗免疫要好于兩次活苗免疫。從抗體曲線可看出,前4周時抗體差別不大,但從5周齡開始,抗體滴度明顯高于兩次活苗免疫組。
圖5:實驗5、實驗6和實驗7雞群的ND抗體變化曲線
實驗1、2與對照組(7-25日齡)的抗體曲線比較說明:1日齡或7日齡首免活苗,由于受母源抗體、不健全的免疫器官、初次免疫的影響,幾乎不能產(chǎn)生有效的體液抗體;主要產(chǎn)生局部黏膜抗體與免疫記憶細胞。
圖6:對照組中雞群ND母源抗體變化曲線
母源抗體大約在4周齡降至0,但在2周齡后已不能給雞群提供保護。此年齡段是免疫空白期;這就不僅要求在2周齡以內(nèi)免疫,并且加強對雞群的隔離、消毒工作非常重要。
(二)育成期的ND抗體監(jiān)測結(jié)果
對育成期ND抗體進行監(jiān)測,其結(jié)果如圖7所示:
圖7:育成期ND抗體變化規(guī)律
雞群經(jīng)過3次活苗和1次滅活苗免疫后,監(jiān)測育成雞的抗體變化規(guī)律,發(fā)現(xiàn)在8~10周齡、15~17周齡抗體有下降趨勢,因而在這兩個階段應(yīng)進行活苗免疫;同時為了產(chǎn)蛋期有一個高且穩(wěn)定的抗體,在產(chǎn)蛋前的3~4周需有一次滅活苗免疫。
(三)產(chǎn)蛋期的ND抗體監(jiān)測結(jié)果
對產(chǎn)蛋期ND抗體進行監(jiān)測,其結(jié)果如圖8所示:
圖8:產(chǎn)蛋期ND活苗免疫后的抗體變化規(guī)律
產(chǎn)蛋雞ND抗體值低于9時細霧滴氣霧免疫,免后15天抗體達到峰值,可以維持4個月。考慮到不同免疫方法對抗體的影響及環(huán)境的差異,建議產(chǎn)蛋雞2~4個月活苗免疫一次。
三、結(jié)論
(一)雛雞早期ND免疫應(yīng)堅持的原則
1.活苗與滅活苗聯(lián)合使用?;蠲缈蔀殡u群提供局部黏膜抗體,保護疾病入侵的門戶。通過疫苗在體內(nèi)的占位性免疫,先入為主,干擾野毒的入侵。滅活苗產(chǎn)生的抗體高且維持時間長,無論是峰值抗體還是最低值抗體均比只用活苗組高2~3個滴度左右。但滅活苗的使用日齡應(yīng)在1~2周齡,過早免疫不能產(chǎn)生有效抗體,晚免則使抗體產(chǎn)生延遲。
2.提倡1日齡活苗免疫,盡早產(chǎn)生局部黏膜抗體。雛雞30日齡以前,體液免疫和細胞免疫機能不健全,對侵入機體的病毒清除能力差,對注射滅活苗產(chǎn)生的免疫應(yīng)答低,早期抵抗NDV感染的機制主要依靠的是黏膜的局部免疫作用。盡管10日齡前活苗免疫由于免疫器官尚未發(fā)育成熟、母源抗體的中和作用、首次免疫等因素存在,不能產(chǎn)生良好的體液抗體。但其主要作用是產(chǎn)生局部黏膜抗體和免疫記憶細胞,且這種抗體的產(chǎn)生不受母源抗體的影響,因而要盡早落實活苗免疫。
3.育雛期間3次免疫的間隔時間以1~2周為最佳。即1日齡首免,7~12日齡二免,21~24日齡三免。機體接受抗原刺激以后,在產(chǎn)生體液免疫的同時也產(chǎn)生免疫記憶細胞,在1~2周的間隔時間內(nèi),再次接受相同抗原刺激時,免疫記憶細胞會在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的抗體。呼吸道和消化道的黏膜細胞2周會產(chǎn)生生理性脫落,導(dǎo)致免疫記憶喪失。所以育雛期間相鄰兩次免疫時間間隔1~2周為宜,時間過長不能產(chǎn)生良好的免疫效果。
4.無論采用哪種免疫程序,都不能給2~4周齡的雞群提供有效抗體保護,此年齡段是疾病易感期,做好隔離消毒工作非常重要。
5.雞群經(jīng)過3次活苗和1次滅活苗免疫后,監(jiān)測育成雞的抗體變化規(guī)律,發(fā)現(xiàn)在8~10周齡、15~17周齡抗體有下降趨勢,因而在這兩個階段應(yīng)進行活苗免疫;同時為了產(chǎn)蛋期有一個高且穩(wěn)定的抗體,在產(chǎn)蛋前的3~4周需有一次滅活苗免疫。
6.由產(chǎn)蛋雞ND免疫后的抗體值變化規(guī)律看:產(chǎn)蛋期需2~4個月活苗免疫一次。
(二)合理的免疫程序
綜上所述,在ND流行地區(qū),建議合理的免疫程序為:
首免:1日齡,新城疫IV系克隆化疫苗或B1株點眼或粗霧滴噴霧。
二免:7~12日齡,新城疫 IV系克隆化或B1株點眼+滅活苗注射。
三免:21~25日齡,新城疫 IV系活苗點眼。
四免:8~10周齡,新城疫IV系活苗點眼或噴霧。
五免:產(chǎn)蛋前3~4周齡,新城疫IV系活苗點眼或噴霧+滅活苗注射。
產(chǎn)蛋期:2~4個月免疫一次,IV系活苗點眼或噴霧。