胚胎移植是提高良種母畜繁殖力的有效措施,是發展奶牛生產,獲得優質高產個體的一條快捷途徑。
1 選擇適宜的受體牛
應選擇體型較大、性情溫順的個體。在實際生產中,改良牛較適宜,最好是西門塔爾雜交改良后代。從年齡上看,以3~6歲的經產母牛為最佳,10歲以上的老齡牛不能選用。初產牛必須達到性成熟以后,年齡應在16個月齡以上,體重達成年體重的75%的個體方可選用。要求受體牛是健康、沒有疾病的個體、尤其是生殖系統的疾病。對于過肥或過瘦、卵巢發育不良、生殖器官有炎癥、人工授精不受孕的母牛,都不宜做受體牛。
2 在發情階段適時移植
母牛不發情,就不能排卵形成黃體,也不能進行胚胎移植。在第1次同期發情處理時,我們采用間隔10 d 2次PG注射,由于某些母牛產后沒有發情,結果進行注射的75頭母牛中,只有33頭發情,同期發情率僅為44%,效果欠佳。因此,發情周期不正常的受體牛,不適宜做胚胎移植。
3 短期優勢飼養
在移植前6~8周,受體牛要進行科學補飼,使機體達到最佳繁殖狀態。每天補飼精料2.5 kg,所補飼的精料要求營養豐富、品質優良,同時,還應注意維生素A、D、E和微量元素及礦物質飼料的供給。
4 注意環境條件及物品消毒
胚胎操作室要求干凈、無灰塵、無異味,因此,最好在移植前進行紫外線消毒,所有器械、用品需經嚴格消毒處理、擺放井然有序,便于使用。工作人員的手臂,在操作前要用酒精棉消毒。
5 做好受體牛的發情觀察
發情觀察在胚胎移植工作中非常重要,是確定移植時間的依據。非手術法胚胎移植是在發情后第7 d進行,起零時間應從適合做人工輸精時算起。發情觀察要定人、定時,而且觀察人員要有豐富的經驗。每天分早、上午、下午及晚4次觀察,每次1 h,準確記錄每頭母牛發情表現及時間。
6 黃體檢查
在移植前,對受體牛要進行直檢,確定黃體發育情況。好的黃體凸出卵巢表面、質地柔軟、有彈性、直徑達1 cm以上,底部充實。個別牛卵巢偏小,所形成的黃體沒有達到要求那么大、但質地的彈性和柔軟程度都很好,這樣的牛也可進行胚胎移植,并且能獲得理想的受胎率。在檢查時,檢查動作要輕,不要用力擠壓,以免弄傷受體牛。
7 胚胎操作應嚴格按程序進行
甘油冷凍胚胎的操作程序為:解凍→解凍液→移植液→裝管→裝槍,而乙二醇冷凍胚胎解凍后直接裝槍,不需要其他操作程序。在第1次同期發情處理胚胎移植時,為檢查胚胎質量,將乙二醇冷凍胚胎解凍后移植到移植液中鏡檢、裝管、裝槍,結果移植的12頭牛全部空懷。
8 麻醉劑量適當
麻醉的目的,一是為了減輕移植時對受體牛刺激,使其安穩,二是防止直腸努責,便于操作。麻醉采取尾椎麻醉方式,如果麻醉部位靠后或劑量不足,直腸努責得不到抑制;如果劑量過大,使直腸擴約肌過度松馳,在體內形成大的管狀空腔,有的后肢麻痹站不起來,給移植帶來不便,甚至無法移植。
9 要熟練掌握胚胎移植操作技術
胚胎移植是將早期胚胎移植到生理狀態相同的受體牛體內,使之繼續發育。一般是發育第7 d的胚胎,第7 d進行移植。移植部位是黃體發育較好一側子宮角的上二分之一至下三分之一,如有可能則越深越好。要求操作人員要在短時間內將胚胎移植到位,原則不超過10 min。同時要注意兩手的協調性,避免在移植的過程中擦破子宮內膜。
10 胚胎質量要有保證
胚胎質量是決定移植是否成功的重要因素之一,只有好的胚胎才能獲得較高受胎率。實踐中,移植的胚胎質量須達到B級以上,C級胚胎不能單獨移植,D級屬于死亡或沒有利用價值的胚胎。冷凍胚胎要選擇A級胚胎,因為胚胎在冷凍過程中,質量有所下降。我們在引進乙二醇冷凍胚胎移植時,只有A級受孕,B級無1例受胎。
11 要選擇適宜的移植季節和時間
移植季節是每年的3~5月份和10~11月份。在高溫季節進行移植,應選擇早、晚天氣涼爽的時候。7月17日~9月24日,對6頭自然發情母牛在早8時前和晚18時后進行7次胚胎移植,有3頭母牛受孕,效果良好。
12 為提高群體受胎率,可重復移植
據資料介紹,受體牛可連續進行2次胚胎移植,2次移植沒有成功、不可再做受體牛。我們對12頭受體牛進行重復移植試驗,第2次移植有5頭母牛受孕,受胎率為41.7%。又從中選擇2頭進行第3次移植,結果1頭母牛受孕。