山東省榮城市某水貂養(yǎng)殖場(chǎng)共養(yǎng)貂約2 000余只，部分貂突然發(fā)病，主要表現(xiàn)為呼吸困難，同時(shí)伴有腹瀉癥狀，其發(fā)病率為10%，病死率為58%。根據(jù)臨床癥狀、病理剖檢變化、細(xì)菌分離培養(yǎng)及生化試驗(yàn)等綜合診斷，確診為由貂銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌混合感染所致。報(bào)告如下。
1 臨床癥狀及病理變化
患病貂精神極度沉郁，體溫升高，食欲廢絕，呼吸困難，呈腹式呼吸；腹瀉，排水樣灰白色糞便，味腥臭，后期糞便帶血呈黑色；肺充血、腫大，呈暗紅色，散在灰白色粟粒狀結(jié)節(jié)，切面有淡紅色泡沫狀液體流出，支氣管黏膜充血；心冠狀溝有出血點(diǎn)；脾腫大，有出血斑；胃、腸黏膜脫落，胃壁充血、出血；腸管腫脹，呈現(xiàn)卡他性炎癥。多于發(fā)病后24 h左右死亡。
2 細(xì)菌分離培養(yǎng)
無(wú)菌取病死貂肝、心血接種于普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24 h，可見(jiàn)綠色和灰白色兩種菌落，挑取兩種菌落分別接種于普通瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板上培養(yǎng)，可見(jiàn)綠色菌落在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好，表面光滑、濕潤(rùn)、微隆起、圓形中等大小，培養(yǎng)基表面染成青綠色；在肉湯內(nèi)生長(zhǎng)迅速，呈淡綠色，并形成一層菌膜，培養(yǎng)時(shí)間稍長(zhǎng)，則綠色加深。取細(xì)菌染色鏡檢為革蘭氏陰性桿菌（以下簡(jiǎn)稱細(xì)菌Ⅰ）。灰白色菌落在麥康凱瓊脂平板上長(zhǎng)出紅色菌落，光滑濕潤(rùn)、邊緣整齊，革蘭氏染色為陰性小桿菌（以下簡(jiǎn)稱細(xì)菌Ⅱ）。
3 生化試驗(yàn)鑒定
（1）細(xì)菌Ⅰ生化試驗(yàn)鑒定：該細(xì)菌不分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖，分解尿素，能形成硫化氫，靛基質(zhì)試驗(yàn)、M.R.及V-P試驗(yàn)均為陰性。
（2）細(xì)菌Ⅱ生化試驗(yàn)：該細(xì)菌能夠分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖和山梨醇而產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不發(fā)酵蔗糖、肌醇和衛(wèi)矛醇，吲哚試驗(yàn)和M.R.試驗(yàn)陽(yáng)性，V-P試驗(yàn)陰性。根據(jù)以上試驗(yàn)，鑒定細(xì)菌Ⅰ為銅綠假單胞桿菌，細(xì)菌Ⅱ?yàn)榇竽c桿菌。
4 細(xì)菌致病性試驗(yàn)
取細(xì)菌Ⅰ和細(xì)菌Ⅱ 18 h肉湯增菌液分別腹腔接種體重17～22 g小鼠各5只，0.2 ml/只，另取5只小鼠腹腔接種同等劑量的肉湯做對(duì)照，24 h內(nèi)試驗(yàn)組小鼠全部死亡，對(duì)照組正常。從死亡小鼠的心血中分別分離到與接種菌特征一致的細(xì)菌。
5 藥敏試驗(yàn)
選用10種抗菌藥物，采用試管液體二倍稀釋法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果為銅綠假單胞桿菌對(duì)恩諾沙星、新霉素較敏感；最小抑菌濃度（MIC）分別為4、16 μg/ml；大腸桿菌對(duì)氟苯尼考、恩諾沙星和頭孢拉定較敏感；其MIC分別為２、４、16 μg/ml，其他藥物都呈現(xiàn)一定程度的耐藥性。
6 防治措施
（1）根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，兩種病菌對(duì)恩諾沙星都很敏感，治療時(shí)可選用恩諾沙星每克兌水20 kg，每天飲水2次，連飲5～7天，對(duì)于拒食的重病貂可人工灌服，每次5～10 ml，每日3次。
（2）采用從死貂中分離的病菌制作甲醛滅活苗及時(shí)免疫接種，可以防止疾病的大規(guī)模暴發(fā)。（3）立即對(duì)病貂和有癥狀的貂進(jìn)行隔離，及時(shí)消毒貂舍，使用全價(jià)飼料，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高貂的抗病力。
7 小結(jié)與討論
（1）從病死貂的肝和心血中分離到兩種細(xì)菌，經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)、生化試驗(yàn)鑒定為銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌。綠膿青素為銅綠假單胞桿菌所特有，故普通瓊脂平板上生長(zhǎng)出綠色菌落即可認(rèn)為是銅綠假單胞桿菌，但為了進(jìn)一步證明此菌，我們又做了該菌的生化試驗(yàn)，結(jié)果與初步認(rèn)定結(jié)果一致。
（2）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致病性試驗(yàn)結(jié)果表明，兩種細(xì)菌均可使小鼠死亡，說(shuō)明兩種細(xì)菌都具有致病性。
（3）從藥敏試驗(yàn)看，銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌對(duì)多種抗生素都有一定的耐藥性，可能與平時(shí)濫用藥物有關(guān)。所以，治療此類疾病時(shí)最好盡早做出正確診斷，并通過(guò)藥敏試驗(yàn)，選擇最敏感藥物，才能收到顯著的防治效果，避免浪費(fèi)藥物和延誤防治時(shí)機(jī)，減少損失。
（4）貂的銅綠假單胞桿菌感染常有報(bào)道，貂的大腸桿菌病也是貂的一種常見(jiàn)病，但銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌同時(shí)感染貂還未見(jiàn)報(bào)道。由于銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌的血清型較多，不同血清型之間交叉保護(hù)效果較差，故應(yīng)采用自家苗進(jìn)行免疫接種，在實(shí)際工作中我門應(yīng)用此方法，收到了很好的效果。
1 臨床癥狀及病理變化
患病貂精神極度沉郁，體溫升高，食欲廢絕，呼吸困難，呈腹式呼吸；腹瀉，排水樣灰白色糞便，味腥臭，后期糞便帶血呈黑色；肺充血、腫大，呈暗紅色，散在灰白色粟粒狀結(jié)節(jié)，切面有淡紅色泡沫狀液體流出，支氣管黏膜充血；心冠狀溝有出血點(diǎn)；脾腫大，有出血斑；胃、腸黏膜脫落，胃壁充血、出血；腸管腫脹，呈現(xiàn)卡他性炎癥。多于發(fā)病后24 h左右死亡。
2 細(xì)菌分離培養(yǎng)
無(wú)菌取病死貂肝、心血接種于普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24 h，可見(jiàn)綠色和灰白色兩種菌落，挑取兩種菌落分別接種于普通瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板上培養(yǎng)，可見(jiàn)綠色菌落在普通瓊脂平板上生長(zhǎng)良好，表面光滑、濕潤(rùn)、微隆起、圓形中等大小，培養(yǎng)基表面染成青綠色；在肉湯內(nèi)生長(zhǎng)迅速，呈淡綠色，并形成一層菌膜，培養(yǎng)時(shí)間稍長(zhǎng)，則綠色加深。取細(xì)菌染色鏡檢為革蘭氏陰性桿菌（以下簡(jiǎn)稱細(xì)菌Ⅰ）。灰白色菌落在麥康凱瓊脂平板上長(zhǎng)出紅色菌落，光滑濕潤(rùn)、邊緣整齊，革蘭氏染色為陰性小桿菌（以下簡(jiǎn)稱細(xì)菌Ⅱ）。
3 生化試驗(yàn)鑒定
（1）細(xì)菌Ⅰ生化試驗(yàn)鑒定：該細(xì)菌不分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖，分解尿素，能形成硫化氫，靛基質(zhì)試驗(yàn)、M.R.及V-P試驗(yàn)均為陰性。
（2）細(xì)菌Ⅱ生化試驗(yàn)：該細(xì)菌能夠分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖和山梨醇而產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不發(fā)酵蔗糖、肌醇和衛(wèi)矛醇，吲哚試驗(yàn)和M.R.試驗(yàn)陽(yáng)性，V-P試驗(yàn)陰性。根據(jù)以上試驗(yàn)，鑒定細(xì)菌Ⅰ為銅綠假單胞桿菌，細(xì)菌Ⅱ?yàn)榇竽c桿菌。
4 細(xì)菌致病性試驗(yàn)
取細(xì)菌Ⅰ和細(xì)菌Ⅱ 18 h肉湯增菌液分別腹腔接種體重17～22 g小鼠各5只，0.2 ml/只，另取5只小鼠腹腔接種同等劑量的肉湯做對(duì)照，24 h內(nèi)試驗(yàn)組小鼠全部死亡，對(duì)照組正常。從死亡小鼠的心血中分別分離到與接種菌特征一致的細(xì)菌。
5 藥敏試驗(yàn)
選用10種抗菌藥物，采用試管液體二倍稀釋法進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn)，結(jié)果為銅綠假單胞桿菌對(duì)恩諾沙星、新霉素較敏感；最小抑菌濃度（MIC）分別為4、16 μg/ml；大腸桿菌對(duì)氟苯尼考、恩諾沙星和頭孢拉定較敏感；其MIC分別為２、４、16 μg/ml，其他藥物都呈現(xiàn)一定程度的耐藥性。
6 防治措施
（1）根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果，兩種病菌對(duì)恩諾沙星都很敏感，治療時(shí)可選用恩諾沙星每克兌水20 kg，每天飲水2次，連飲5～7天，對(duì)于拒食的重病貂可人工灌服，每次5～10 ml，每日3次。
（2）采用從死貂中分離的病菌制作甲醛滅活苗及時(shí)免疫接種，可以防止疾病的大規(guī)模暴發(fā)。（3）立即對(duì)病貂和有癥狀的貂進(jìn)行隔離，及時(shí)消毒貂舍，使用全價(jià)飼料，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，提高貂的抗病力。
7 小結(jié)與討論
（1）從病死貂的肝和心血中分離到兩種細(xì)菌，經(jīng)過(guò)分離培養(yǎng)、生化試驗(yàn)鑒定為銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌。綠膿青素為銅綠假單胞桿菌所特有，故普通瓊脂平板上生長(zhǎng)出綠色菌落即可認(rèn)為是銅綠假單胞桿菌，但為了進(jìn)一步證明此菌，我們又做了該菌的生化試驗(yàn)，結(jié)果與初步認(rèn)定結(jié)果一致。
（2）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致病性試驗(yàn)結(jié)果表明，兩種細(xì)菌均可使小鼠死亡，說(shuō)明兩種細(xì)菌都具有致病性。
（3）從藥敏試驗(yàn)看，銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌對(duì)多種抗生素都有一定的耐藥性，可能與平時(shí)濫用藥物有關(guān)。所以，治療此類疾病時(shí)最好盡早做出正確診斷，并通過(guò)藥敏試驗(yàn)，選擇最敏感藥物，才能收到顯著的防治效果，避免浪費(fèi)藥物和延誤防治時(shí)機(jī)，減少損失。
（4）貂的銅綠假單胞桿菌感染常有報(bào)道，貂的大腸桿菌病也是貂的一種常見(jiàn)病，但銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌同時(shí)感染貂還未見(jiàn)報(bào)道。由于銅綠假單胞桿菌和大腸桿菌的血清型較多，不同血清型之間交叉保護(hù)效果較差，故應(yīng)采用自家苗進(jìn)行免疫接種，在實(shí)際工作中我門應(yīng)用此方法，收到了很好的效果。