一 雞新城疫、禽流感免疫程序設計
共設5個免疫程序(5個試驗組),每組2棟雞舍,18000只/棟,免疫程序見表1。
血凝抑制試驗(HI)。試驗在96孔V型微量血清反應板上進行,用固定病毒稀釋血清的方法,自第1孔至第11孔各加25μL生理鹽水。第1孔加被檢雞血清25μL,吹吸混合均勻,吸25μL至第2孔,依此倍比稀釋至第10孔,吸棄25μL,稀釋度分別為:1:2、1:4、1:8……;第12孔加陽性血清25μL作為血清對照。自第1孔至12孔各加25μL4個血凝單位的病毒液,其中第11孔為4單位病毒液對照,振蕩混合均勻,置室溫中作用20分鐘。自第1孔至12孔各加0.5%雞紅細胞懸液25μL,振蕩混合均勻,恒溫培養箱作用20分鐘后觀察。
二 雞法氏囊炎免疫程序設計
7日齡羅斯308免疫VH+H120+28/86,1.2倍量滴鼻點眼,同時肌肉注射新城疫滅活苗0.25mL:試驗雞分組與IBD疫苗免疫見表2。用IBD抗體檢測ELISA試劑盒(IDEXX公司生產)進行抗體檢測。
數據分析:抗體結果用平均數表示,用SPSS進行單因素方差分析,P<0.05表示差異顯著。
三 結果
根據結果,形成標準化的免疫程序(見表3),并開始在4個商品雞場推廣應用,推廣規模累計已達30萬只。推廣期間抗體合格率高、無重大疫情發生,養殖效益明顯提高。
四 討論
試驗雞新城疫免疫程序結果表明,A~E 5個免疫組均在24曰齡前后出現一個抗體低谷,相比之下,B組(ND活疫苗+滅活苗)比其它4個免疫組(只用ND活疫苗)抗體滴度高,而且比較整齊,與國內同類研究結果一致。禽流感(H5)滅活苗對商品肉雞的免疫效果不佳,主要表現為抗體產生慢,免疫后31天(38日齡)才達到抗體保護臨界值,對于45天左右就出欄的商品肉雞來說,只能提供7天的免疫保護期。因此,必須從免疫佐劑、抗原濃縮等方面進行新型商品肉雞禽流感疫苗的研究。
雞新城疫和IB在首免和二免均可進行聯合免疫。雞新城疫和IB首免最好使用雞新城疫-H120二聯活疫苗+雞新城疫滅活疫苗,雞新城疫和IB二免使用雞新城疫-H52二聯活疫苗+雞新城疫滅活疫苗。雞新城疫和禽流感(包括H9和H5)首免和二免均可以進行聯合免疫。考慮現有苗品種,結合試驗結果,雞新城疫和禽流感聯合免疫使用H5(Re-4+Re-5)二價疫苗和雞新城疫-H9二聯疫苗,按1:1混合進行免疫。針對短日齡肉雞制定了免疫程序,見表3。如果H5(Re-4+Re-5)首免后抗體較高,H5(Re-4+Re-5)也可以不進行二免。
通過試驗,對本地區商品肉雞禽流感、新城疫、法氏囊炎等重要疫病的綜合免疫防控程序進行了優化。以抗體測定為手段,結果顯示7-9日齡用ND-IB二聯活疫苗、1.5mL/只份,滴鼻、點眼免疫;同時ND-H9二聯滅活苗、0.3~0.5mL/只份和H5滅活苗、0.5mL/只份頸部皮下注射免疫;13~14日齡IBD活疫苗1.2mL/只份,飲水免疫;18~25日齡ND活疫苗3~4倍/只份,飲水加強免疫能夠獲得較佳的免疫效果,值得推廣應用。